沉默CPNE1、FUNDC2、KCTD14、Vimentin基因对MDA-MB-231细胞增殖的影响

发布时间：2022-01-06 00:54

　　目的探究沉默MDA-MB-231细胞的CPNE1、FUNDC2、KCTD14、Vimentin基因及研究其对增殖能力的影响,初步为在三阴性乳腺癌的防治中提供理论基础。方法1.先针对20个待检基因设计3个RNA沉默靶点,并将携带不同靶点的3个质粒等比例混合及单独进行慢病毒包装,通过慢病毒包装载体感染MDA-MB-231细胞,再通过Celigo对细胞实现拍照和自动计数,比较沉默目的基因对MDA-MB-231细胞增殖的影响,初步筛选出增殖抑制表型明显的基因。2.通过qRT-PCR验证CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM基因被沉默后mRNA的表达水平情况。3.通过MTS实验检测CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM基因被沉默后对细胞短期增殖能力的影响。4.通过平板克隆形成实验检测CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM基因被沉默后对细胞长期增殖能力的影响。结果1.高内涵筛选结果显示:在20个待检基因中,增殖抑制表型明显的基因为CPNE1、VIM、KCTD14、FUNDC2。2.qRT-PCR检测显示:沉默CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM实验组mRNA的表达... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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沉默MDA-MB-231细胞CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM基因后可抑制MDA-

19图 4.4 慢病毒感染 MDA-MB-231 细胞，检测沉默目的基因对细胞长期增殖能力的影响注：A：细胞克隆数拍照图片 ；B:细胞克隆数对应的柱状图， 各实验组与 NC 组比较 ***P<0.001，t 检验，各组同时各重复 3 次。

【参考文献】：
期刊论文
[1]沉默FBI-1基因对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响[J]. 陈茂剑,王丽,杨伟萍,覃庆洪,谭启杏,练斌,韦长元.  生理学报. 2018(05)
[2]波形蛋白在原发性肝癌组织中的表达及临床意义[J]. 成超,李海洋,叶朝阳,李国炜.  重庆医学. 2017(33)
[3]乳腺癌在中国的流行状况和疾病特征[J]. 柏尚柱.  世界最新医学信息文摘. 2017(41)

博士论文
[1]CPNE1促进人肺腺癌细胞增殖迁移的作用及机制研究[D]. 刘顺林.苏州大学 2017



本文编号：3571386