钉螺头足部组织浸出液调控日本血吸虫母胞蚴Aldolase基因促进其生长发育的研究

发布时间：2022-01-08 07:33

　　目的:前期研究结果表明,钉螺头足部组织浸出液（protein extract from head-foot tissue of Oncomelanian hupensis,PhfO）具有促进共培养日本血吸虫母胞蚴生长发育的功能,但其潜在的分子调控机制尚不明确。果糖二磷酸醛缩酶（Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,ALD）是糖酵解过程中的重要裂解酶,参与日本血吸虫的能量代谢,在PhfO共培养母胞蚴体内呈差异性上调表达,可能是调控母胞蚴生长发育的关键基因。本课题在此基础上,进一步研究PhfO调控虫体ald基因促进共培养母胞蚴生长发育的作用机制。方法:利用体外建立的PhfO与日本血吸虫母胞蚴共培养体系,定期观察、记录PhfO共培养组和对照组母胞蚴的生长发育情况,测量其体长、体宽,计算各组母胞蚴的体积和存活率,同时检测各组母胞蚴ATP代谢水平的变化。采用分子克隆方法,构建PET28（a）-Sjald的重组表达质粒,原核表达ALD蛋白,蛋白纯化后免疫家兔,获得ALD免疫血清。免疫荧光组织化学染色检测ALD蛋白在母胞蚴体内的分布和表达。培养第3、4、5和8天,re... 

【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PhfO共培养第3天和8天的日本血吸虫母胞蚴Figure1MothersporocystsofS.japonicumculturedwith1%PhfO(Coculture)onthe3rdand8thday

PET28a(+)-Sjald重组表达质粒阳性克隆的筛选M:DNAMarkerDL2000；1-10：阳性克隆片段

rSjALD兔免疫血清的多克隆抗体滴度检测A-H：依次为1:200、1:400、1:800、1:1600、1:3200、1:6400、1:12800、1:25600

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3576148