人肝细胞生长因子融合基因慢病毒载体的构建及鉴定

发布时间：2022-01-10 18:59

　　目的构建及鉴定人肝细胞生长因子（hHGF）基因和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因融合慢病毒表达载体（pNL-EGFP/CMV-hHGF）。方法应用DNA重组技术,将hHGF基因克隆到带有EGFP基因的pNL慢病毒表达载体上,筛选阳性克隆,经限制性内切酶酶切鉴定重组载体后,送基因公司测序。结果重组质粒经限制性内切酶酶切分析证实hHGF基因片段插入到慢病毒载体中,测序结果正确。结论成功构建了pNL-EGFP/CMV-hHGF慢病毒表达载体,为进一步研究hHGF基因的功能奠定了基础。 

【文章来源】：慢性病学杂志. 2020,21(06)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

MfeⅠ酶切鉴定pNL-EGFP/CMV-hHGF

慢病毒表达载体pNL-EGFP由福建医科大学章涛教授惠赠，pUC-SRα/HGF质粒由福建医科大学附属第一医院林群教授惠赠（质粒图谱见图1），限制性内切酶NheⅠ、NotⅠ、KpnⅠ、MfeⅠ、klenow酶（Thermo）和T4 DNA连接酶（TaKaRa），质粒小量抽提试剂盒（Omega），核酸胶回收试剂盒（Axgen），测序由上海生物工程公司完成。1.2 pNL-EGFP/CMV-hHGF基因的慢病毒表达载体的构建和鉴定

pUC-SRα/HGF酶切


本文编号：3581246