激肽释放酶4（KLK4）基因干扰对口腔鳞状细胞癌增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其机制的研究

发布时间：2022-01-11 03:57

　　口腔鳞状细胞癌（OSCC）是一类极具破坏性且致命的恶性肿瘤,在所有头颈部恶性肿瘤当中占有很大比例,已经成为人类健康的一大杀手。口腔鳞状细胞癌因为其特殊的解剖位置,常严重影响患者的生存质量且多数预后不良。人们的日常不良习惯,如吸烟和饮酒等是癌症转移的危险因素,而肿瘤的转移是癌症患者面临的一个严重问题。据统计,超过90%的癌症相关死亡率是由于转移。在口腔鳞状细胞癌当中,有超过50%的病人出现淋巴结转移,而这些患者的5年生存率显著下降。人类激肽释放酶基因家族（kallikrein,KLKs）是人类基因中最大的丝氨酸蛋白酶基因簇。KLKs是由15个不同基因编码的丝氨酸蛋白酶,其定位于人类染色体19q13.4上,是一组高度保守的基因结构和蛋白质序列。KLKs在多个组织器官中表达。在许多生理过程中KLKs都扮演着重要角色。最近,KLKs被报道在肿瘤生长和转移中发挥重要功能,并被认为是各种癌症的生物标志物。许多KLKs在各种恶性肿瘤中表现出异常表达,被认为是疾病发展的预后标志。目前的研究表明,KLKs与口腔鳞状细胞癌（OSCC）密切相关,涉及到肿瘤细胞的增殖、凋亡和转移等诸多方面,而严重影响了人类的... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：151 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

KLKs促进恶性肿瘤侵袭和转移的可能机制

图 3.1 干扰质粒转染后的口腔鳞癌细胞 KLK4 表达明显降低通过实时定量 PCR 方法检测 KLK4 表达水平发现，转染了干扰片段和无关序列片段质粒的口腔鳞癌细胞的 KLK4 表达明显降低，纯细胞组和阴性对照组的 KLK4 表达无显著异。分析结果显示转染了干扰片段的口腔鳞癌细胞的 KLK4 表达明显降低，其沉默效率在 KB 细胞达到约 84%，而在 Tca-8113 细胞达到约 78%。三小结经过设计合成 KLK4 基因的干扰片段和无关序列片段 (siRNA for KLK4：5′-AATCCGTGTCCGAGTCTGAC-3′)，并将上述片段分别构建至 pGCsi-H1 的质粒中，获得 pGCsi-H1-KLK4 的干扰质粒和 pGCsi-H1-NC 的对照质粒，将质粒转染口腔鳞癌细胞 KB、Tca-8113，用 G418 筛选，从而获得了稳定转染pGCsi-H1-KLK4 的细胞系和对照细胞系；同时应用实时定量 PCR 的方法验证了

图 3.1 MTT 检测各组细胞增殖能力通过 MTT 检测可见 KLK4 基因干扰能够显著抑制口腔鳞癌细胞增殖能力，而纯细胞组和阴性对照组的细胞增殖能力无显著差异。二流式细胞术检测细胞周期1 主要设备试剂1.1 主要设备表 2.1 实验所用主要设备Tab2.1 Main equipments for the experiment设备名称 生产企业超纯水系统 香港 Heal Force超速冷冻离心机 长沙湖南湘仪


本文编号：3582040