白背飞虱酚氧化酶原PPO基因特性及其免疫应答

发布时间：2022-01-11 03:41

　　【目的】酚氧化酶（phenoloxidase,PO）是昆虫体内的免疫蛋白,在昆虫体内起重要的调节作用,主要以无活性的酚氧化酶原（prophenoloxidase,PPO）形式存在。本研究在转录组测序获得白背飞虱（Sogatella furcifera）3条PPO序列的基础上,通过分析白背飞虱体内不同SfPPO的发育和组织表达模式,并进一步抑制SfPPO的表达以及病原菌诱导,探讨SfPPO在白背飞虱体内的生物学功能。【方法】以白背飞虱3条SfPPO序列为研究对象,利用生物信息学方法分析其蛋白结构以及与其他昆虫之间的同源性。并以注射绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的dsRNA作为对照组,通过注射合成的ds SfPPO后采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测基因表达抑制效果;此外,为了探究SfPPO在白背飞虱生长发育和免疫应答方面的作用,利用qRT-PCR检测SfPPO在不同发育阶段及组织中的表达情况,以及注射大肠杆菌（Escherichia coli）和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）后3个SfPPO的诱导表达情况。【结果】... 

【文章来源】：中国农业科学. 2020,53(15)北大核心CSCD

【文章页数】：12 页

【部分图文】：

注射48 h和72 h后SfPPO的表达情况

对于获得的白背飞虱的3条SfPPO序列进行分析，发现白背飞虱的3条SfPPO(SfPPO1、SfPPO2-1和SfPPO2-2）的开放阅读框长度分别为2 079、999、2 070 bp，分别编码692、332、689个氨基酸，预测蛋白分子量分别为79.84、37.67、79.53 kD，等电点分别为6.43、9.56、6.20。通过SfPPO蛋白的跨膜结构域TMHMM分析，推测这3个SfPPO蛋白不含跨膜区域，可能是SfPPO在核糖体合成后，经过翻译加工成为成熟蛋白质，可通过细胞破裂释放进入细胞液中。DictyOGlyc预测结果表明SfPPO1和SfPPO2-2只含1个糖基化位点，而SfPPO2-1不含糖基化位点（图1）。2.2 SfPPO蛋白的系统进化分析

不同SfPPO发育表达模式不同，Sf PPO1在成虫第3天表达量最高，5龄第2天表达量最低（图3-A);Sf PPO2-2和Sf PPO2-1发育表达模式一致，分别在成虫第3天时表达量最高，成虫第1天时表达量最低（图3-B、3-C）。2.4 SfPPO的组织表达分析

【参考文献】：
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本文编号：3582016