棉花Aux/IAA家族基因功能的初步探究
发布时间：2022-01-14 07:25
棉花（Gossypium hirsutum L.）是我国重要的纤维作物和油料作物,其无限生长的特性是导致棉纤维产量降低、质量变差原因之一。生长素是一类重要的植物生长激素,参与调节植物生长发育的许多过程。生长素/吲哚乙酸蛋白（auxin/indoleacetic acids proteins,Aux/IAAs）是生长素信号途径中的关键蛋白,但它在棉花生长发育中的调控作用及机理还不清楚。本研究利用病毒诱导的基因沉默技术（virus-induced gene silencing,VIGS）初步探究棉花营养生长期特异表达的Aux/IAA家族某些基因的功能,主要结果如下:1.本研究利用RT-PCR从棉花中获得Aux/IAA家族中GhAux1、GhAux3、GhAux6和GhAux7四个基因的cDNA片段,经EcoRI/KpnI双酶切后分别连入pTRV-RNA2载体,构建并获得重组质粒病毒载体,之后分别转入农杆菌,并注射棉花幼苗子叶。农杆菌注射后7天,采用Real-time PCR检测发现GhAux1、GhAux3、GhAux6和GhAux7在相应沉默植株中的表达量分别较空载体对照下调了73.9%...
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
目的基因克隆与重组质粒的双酶切鉴定Fig.3-1Cloneofdestinationgeneanddoubledigestionanalysis注：M：DL2000;（B）1，2，3和4分别是pTRV-GhAux1、pTRV-GhAux3、pTRV-GhAux6
棉花 Aux/IAA 家族基因功能的初步探究3.1.2 GhAuxs 在棉花幼苗中沉默效率的检测pTRV-GhCLA1 作为干扰效率的对照组，pTRV-00 作为空载体对照组。当注射含pTRV-GhCLA1 农杆菌的棉花幼苗的叶片显现明显的白化时，表明 GhCLA1 被成功沉默。当 pTRV-GhCLA1 棉花幼苗叶片白化出现一周时，采用 Real-time PCR 分别检测沉默棉花幼苗中 GhAux1、GhAux3、GhAux6 和 GhAux7 基因的相对表达水平。如图 3-2，与空载体 pTRV-00 植株相比，GhAuxs 在相应的沉默植株中的相对表达量均显著下调，其中GhAux1、GhAux3、GhAux6 和 GhAux7 的相对表达量分别下调 73.9%、66.8%、60.8%和51.6%，由此，本试验分别成功获得了 GhAux1、GhAux3、GhAux6 和 GhAux7 沉默的棉花植株。
26图 3-3 GhAux1 沉默的棉花幼苗的生长状况Fig.3-3 Phenotype of GhAux1-silenced cotton seedlings（A）：注射农杆菌 15 天时棉花幼苗；（B）：GhAux1 沉默的棉花幼苗的株高；（C）：GhAux1 沉默的棉花幼苗的株高日增量。数据为平均值±SD；“*”代表差异显著(P<0.05) ；“**”代表差异极显著(P<0.01)。Note：（A）：Photos taken in the 15 days after the injection by pTRV-GhCLA1、pTRV-00 and pTRV-GhAux1；（B）：Plant height of GhAux1-silenced cotton seedlings；（C）：Plant height increase per day afterGhAux1-silenced in cotton seedlings. Data are means±SD ,“*”represent significant difference betweenpTRV-GhAux1 and pTRV-00 groups(P<0.05) ,“**”represent very significant difference betweenpTRV-GhAux1 and pTRV-00 groups(P<0.01).
【参考文献】：
期刊论文
[1]Stock6在玉米自交系选育中的应用[J]. 徐艳霞. 黑龙江农业科学. 2014(11)
[2]GhCPS基因沉默对棉花幼苗生长和内源激素含量的影响[J]. 王丽,穆春,张明才,杜明伟,田晓莉,李召虎. 棉花学报. 2014(03)
[3]我国棉花生产现状与发展趋势[J]. 喻树迅. 中国工程科学. 2013(04)
[4]生长素合成途径的研究进展[J]. 王家利,刘冬成,郭小丽,张爱民. 植物学报. 2012(03)
[5]生长素的运输及其在信号转导及植物发育中的作用[J]. 任怡怡,戴绍军,刘炜. 生物技术通报. 2012(03)
[6]盐胁迫对高羊茅生长及抗氧化系统的影响[J]. 樊瑞苹,周琴,周波,江海东. 草业学报. 2012(01)
[7]棉花主要抗旱鉴定指标研究进展[J]. 杜传莉,黄国勤. 中国农学通报. 2011(09)
[8]生长素调控植物重力反应的分子机理研究[J]. 李真,熊国胜,王永红. 生命科学. 2010(01)
[9]生长素结构与其活性关系的揭示[J]. 杨艳会,张清哲,陈军营,陈新建. 植物生理学通讯. 2009(11)
[10]植物生长素的极性运输载体研究进展[J]. 李运合,孙光明,吴蓓. 西北植物学报. 2009(08)
硕士论文
[1]外源调节物质对棉花成铃的调节效应[D]. 王宏武.南京农业大学 2003
本文编号：3588082
【文章来源】：河南师范大学河南省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
目的基因克隆与重组质粒的双酶切鉴定Fig.3-1Cloneofdestinationgeneanddoubledigestionanalysis注：M：DL2000;（B）1，2，3和4分别是pTRV-GhAux1、pTRV-GhAux3、pTRV-GhAux6
棉花 Aux/IAA 家族基因功能的初步探究3.1.2 GhAuxs 在棉花幼苗中沉默效率的检测pTRV-GhCLA1 作为干扰效率的对照组，pTRV-00 作为空载体对照组。当注射含pTRV-GhCLA1 农杆菌的棉花幼苗的叶片显现明显的白化时，表明 GhCLA1 被成功沉默。当 pTRV-GhCLA1 棉花幼苗叶片白化出现一周时，采用 Real-time PCR 分别检测沉默棉花幼苗中 GhAux1、GhAux3、GhAux6 和 GhAux7 基因的相对表达水平。如图 3-2，与空载体 pTRV-00 植株相比，GhAuxs 在相应的沉默植株中的相对表达量均显著下调，其中GhAux1、GhAux3、GhAux6 和 GhAux7 的相对表达量分别下调 73.9%、66.8%、60.8%和51.6%，由此，本试验分别成功获得了 GhAux1、GhAux3、GhAux6 和 GhAux7 沉默的棉花植株。
26图 3-3 GhAux1 沉默的棉花幼苗的生长状况Fig.3-3 Phenotype of GhAux1-silenced cotton seedlings（A）：注射农杆菌 15 天时棉花幼苗；（B）：GhAux1 沉默的棉花幼苗的株高；（C）：GhAux1 沉默的棉花幼苗的株高日增量。数据为平均值±SD；“*”代表差异显著(P<0.05) ；“**”代表差异极显著(P<0.01)。Note：（A）：Photos taken in the 15 days after the injection by pTRV-GhCLA1、pTRV-00 and pTRV-GhAux1；（B）：Plant height of GhAux1-silenced cotton seedlings；（C）：Plant height increase per day afterGhAux1-silenced in cotton seedlings. Data are means±SD ,“*”represent significant difference betweenpTRV-GhAux1 and pTRV-00 groups(P<0.05) ,“**”represent very significant difference betweenpTRV-GhAux1 and pTRV-00 groups(P<0.01).
【参考文献】：
期刊论文
[1]Stock6在玉米自交系选育中的应用[J]. 徐艳霞. 黑龙江农业科学. 2014(11)
[2]GhCPS基因沉默对棉花幼苗生长和内源激素含量的影响[J]. 王丽,穆春,张明才,杜明伟,田晓莉,李召虎. 棉花学报. 2014(03)
[3]我国棉花生产现状与发展趋势[J]. 喻树迅. 中国工程科学. 2013(04)
[4]生长素合成途径的研究进展[J]. 王家利,刘冬成,郭小丽,张爱民. 植物学报. 2012(03)
[5]生长素的运输及其在信号转导及植物发育中的作用[J]. 任怡怡,戴绍军,刘炜. 生物技术通报. 2012(03)
[6]盐胁迫对高羊茅生长及抗氧化系统的影响[J]. 樊瑞苹,周琴,周波,江海东. 草业学报. 2012(01)
[7]棉花主要抗旱鉴定指标研究进展[J]. 杜传莉,黄国勤. 中国农学通报. 2011(09)
[8]生长素调控植物重力反应的分子机理研究[J]. 李真,熊国胜,王永红. 生命科学. 2010(01)
[9]生长素结构与其活性关系的揭示[J]. 杨艳会,张清哲,陈军营,陈新建. 植物生理学通讯. 2009(11)
[10]植物生长素的极性运输载体研究进展[J]. 李运合,孙光明,吴蓓. 西北植物学报. 2009(08)
硕士论文
[1]外源调节物质对棉花成铃的调节效应[D]. 王宏武.南京农业大学 2003
本文编号：3588082
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3588082.html
最近更新
教材专著
