微小RNA-218-5p靶向TLR2基因对LPS所致人牙周膜干细胞炎症反应的影响

发布时间：2022-01-15 04:06

　　目的:研究微小RNA（microRNA,miR）-218-5p对脂多糖（LPS）诱导的牙周膜干细胞（PDLSCs）增殖、凋亡和炎症的影响及作用机制。方法:分离培养PDLSCs,用LPS处理PDLSCs细胞建立炎症模型,MTT法和流式细胞术分别检测细胞存活率和凋亡率,qRT-PCR和Western blot分别检测miR-218-5p和Toll样受体2（TLR2）蛋白的表达,检测细胞中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-ɑ（TNF-ɑ）的含量,双荧光素酶报告系统检测miR-218-5p和TLR2的靶向关系。结果:LPS处理人PDLSCs 0、12、24和48 h,PDLSCs细胞中miR-218-5p表达下调,TLR2表达上调,细胞存活率下降,凋亡率升高,炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α含量升高,呈时间依赖趋势,差异均有统计学意义（P<0.05）;miR-218-5p靶向调控TLR2表达;过表达miR-218-5p或沉默TLR2均可提高细胞存活率,降低细胞凋亡率和炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的含量;过表达TLR2可逆转miR... 

【文章来源】：口腔医学研究. 2020,36(12)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

Western blot检测人牙周膜干细胞TLR2蛋白表达

通过TargetScan预测miR-218-5p的序列中含有与TLR2互补的结合位点,见图2。双荧光素酶报告系统结果表明,与miR-con组相比,miR-218-5p组的野生型WT-TLR2的荧光素酶活性显著下降(P<0.05),突变型MUT-TLR2的荧光素酶活性无明显变化(图3);Western blot结果表明,过表达miR-218-5p可显著下调TLR2蛋白含量,抑制miR-218-5p可显著上调TLR2蛋白含量,均具有统计学意义(P<0.05),见图4。表明miR-218-5p靶向调控TLR2表达。图3 双荧光素酶报告实验检测miR-218-5p与TLR2靶向关系

图3 双荧光素酶报告实验检测miR-218-5p与TLR2靶向关系


本文编号：3589868