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小干扰RNA技术及其介导的转基因食品安全性评价

发布时间:2022-01-15 10:40
  小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)是一种碱基长度为21~24 bp的双链RNA,其主要生物学功能是参与RNA干扰(RNA interference, RNAi)。RNAi是调节基因表达的一种保守机制,通过靶向降解mRNA或阻止mRNA翻译为蛋白质来实现基因沉默。siRNA的检测方法主要有实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)、转录组学(RNA-seq)、诺瑟杂交(northern blot)、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)、质谱法等,主要以"实质等同性"为原则对转基因农产品进行安全性评价。RNAi在改良农作物的遗传特性、提高农产品的营养价值方面发挥出巨大潜力,目前全球已有43个国家批准了转基因作物的商业化种植。但是,自从转基因食品商业化以来,社会及公众对于其安全性的争论一直在持续。本文介绍了siRNA介导的RNAi的机制、siRNA检测技术、siRNA介导的RNAi转基因食品安... 

【文章来源】:食品安全质量检测学报. 2020,11(13)

【文章页数】:8 页

【部分图文】:

小干扰RNA技术及其介导的转基因食品安全性评价


siRNA介导的RNAi原理图[18]

示意图,引物,示意图,反转录酶


茎环RT-qPCR也包括两步反应。如图2,茎环逆转录引物可以形成茎环结构,结合到siRNA的3"末端,在反转录酶的作用下生成cDNA;第二步反应与引物延长RT-qPCR类似[23]。相比传统引物,茎环逆转录引物有更高的特异性和反转录效率。但是,每个siRNA都需要设计茎环逆转录引物,会导致操作复杂,成本高,耗时长,该方法适用于少量靶向siRNA的检测[24]。3.2 RNA-seq

【参考文献】:
期刊论文
[1]纳米级载RNA系统在卵巢癌治疗中的应用研究进展[J]. 崔晓娟,狄文.  肿瘤. 2018(02)
[2]基因胞内传递中的内体逃逸技术[J]. 王文喜,代凯,洪璐,蔡婷,唐岚.  药学学报. 2014(08)
[3]第三代测序技术及其应用[J]. 张得芳,马秋月,尹佟明,夏涛.  中国生物工程杂志. 2013(05)
[4]茎环法RT-qPCR定量检测细胞抗猪瘟病毒siRNA的表达[J]. 刘帅,李江南,袁婷,杨凡力,逄大欣,涂长春.  生物工程学报. 2012(01)

硕士论文
[1]外源dsRNA/siRNA介导的玉米粘虫RNA干扰机制的研究[D]. 张亚楠.内蒙古大学 2016
[2]家蚕转座子来源siRNA的鉴定与分析[D]. 李丹.浙江理工大学 2015



本文编号:3590472

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