Hras12V转基因小鼠雌雄差异性肝肿瘤发生的蛋白质组学分析
发布时间：2022-01-22 10:48
目的:肝癌的发生发展是多基因参与、多步骤协同的复杂过程。现有研究表明,男性是肝癌发生的独立风险因素,但其具体机制尚不清楚。本研究旨在对Hras12V转基因小鼠性别差异性肝肿瘤发生的蛋白质组学进行分析,探究肝肿瘤发生发展性别依赖的分子机制。方法:通过对Hras12V原癌基因在肝细胞中的特异性表达诱导形成的转基因肝癌小鼠模型进行研究,探索性别差异性肝肿瘤发生发展的蛋白质组学的特点。1.对H-ras12V转基因肝癌小鼠及正常C57BL/6J（10月龄雄性、10月龄雌性、15月龄雌性,各组9只,共计54只）小鼠进行剖检,观察和统计肝脏的病变情况;应用HE染色,检测小鼠肝组织病理变化情况。2.对上述病理证实的正常小鼠肝组织及Hras12V小鼠肝肿瘤组织及肿瘤周围组织（10月龄雄鼠和15月龄雌鼠）进行蛋白质的提取。用Western blot方法检测磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（p-MEK）、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（p-ERK1/2）、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-m TOR）的蛋白水平。3.对上述病理证实的正常小鼠肝...
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
通过MALDI-TOF/TOF-MS鉴定差异表达的蛋白质点和初步分析
可能具有重要的作用。5. 鉴定结果的蛋白质印迹验证为了验证 2D-DIGE 蛋白质组学数据的真实性和重复性，随机选取 7 个差异蛋白 HSP90B1、β-actin、Albumin、APOA1、CALR、FABP5 和 PRDX6，并重新选择一组小鼠（正常非转基因 10-M 和 15-F 小鼠，各 2 只；Hras12V 转基因 10-M 和15-F 小鼠，各 3 只）进行蛋白质印迹实验对 2D-DIGE 结果进行验证。在雌性和雄性小鼠中，HSP90B1、β-actin、Albumin、APOA1、CALR、FABP5 这六个蛋白的变化趋势均与 2D-DIGE 结果一致。而 PRDX6 蛋白在雄性小鼠中变化趋势与2D-DIGE 结果一致，而在雌鼠肿瘤组织中的表达水平较肿瘤周围组织和正常组织较低，与 2D-DIGE 检测上升趋势不符。这表明 PRDX6 蛋白可能存在其他未检测到的亚型（见图 4）。上述结果表明，本研究中的 2D-DIGE 结果是真实可靠的。
大连医科大学硕士学位论文 DHDH）、代谢（ATP5D 和 FDPS）、对缺氧的反应（UBQLN1）、DNA 填充（白 H4、组蛋白 H2AA 和组蛋白 H2AB）、DNA 修复（SLF2）、稳态（PDIA6发育（TPM1）。雄性依赖下调的 3 种蛋白质均被归类为代谢（ALDH1L1、PG SCP2）。雌性依赖的下调蛋白主要参与代谢（ACOX1、AHCY 和 BHMT2）、化剂（GSTA3）、转录（BNC2）、细胞周期（CALM1）和发育（PFN1）。在雌上调的 3 种蛋白质是 APOA4（运输）、EEF2（翻译）和 HSPA8（蛋白质折叠雄性和雌性中反向调节的四种蛋白质是 GPX1 和 PRDX6（抗氧化）、CYB5A（）和 HSPE1（蛋白质折叠）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Sorafenib-based combined molecule targeting in treatment of hepatocellular carcinoma[J]. Jian-Jun Gao,Zhen-Yan Shi,Ju-Feng Xia,Yoshinori Inagaki,Wei Tang. World Journal of Gastroenterology. 2015(42)
本文编号：3602059
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
通过MALDI-TOF/TOF-MS鉴定差异表达的蛋白质点和初步分析
可能具有重要的作用。5. 鉴定结果的蛋白质印迹验证为了验证 2D-DIGE 蛋白质组学数据的真实性和重复性，随机选取 7 个差异蛋白 HSP90B1、β-actin、Albumin、APOA1、CALR、FABP5 和 PRDX6，并重新选择一组小鼠（正常非转基因 10-M 和 15-F 小鼠，各 2 只；Hras12V 转基因 10-M 和15-F 小鼠，各 3 只）进行蛋白质印迹实验对 2D-DIGE 结果进行验证。在雌性和雄性小鼠中，HSP90B1、β-actin、Albumin、APOA1、CALR、FABP5 这六个蛋白的变化趋势均与 2D-DIGE 结果一致。而 PRDX6 蛋白在雄性小鼠中变化趋势与2D-DIGE 结果一致，而在雌鼠肿瘤组织中的表达水平较肿瘤周围组织和正常组织较低，与 2D-DIGE 检测上升趋势不符。这表明 PRDX6 蛋白可能存在其他未检测到的亚型（见图 4）。上述结果表明，本研究中的 2D-DIGE 结果是真实可靠的。
大连医科大学硕士学位论文 DHDH）、代谢（ATP5D 和 FDPS）、对缺氧的反应（UBQLN1）、DNA 填充（白 H4、组蛋白 H2AA 和组蛋白 H2AB）、DNA 修复（SLF2）、稳态（PDIA6发育（TPM1）。雄性依赖下调的 3 种蛋白质均被归类为代谢（ALDH1L1、PG SCP2）。雌性依赖的下调蛋白主要参与代谢（ACOX1、AHCY 和 BHMT2）、化剂（GSTA3）、转录（BNC2）、细胞周期（CALM1）和发育（PFN1）。在雌上调的 3 种蛋白质是 APOA4（运输）、EEF2（翻译）和 HSPA8（蛋白质折叠雄性和雌性中反向调节的四种蛋白质是 GPX1 和 PRDX6（抗氧化）、CYB5A（）和 HSPE1（蛋白质折叠）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Sorafenib-based combined molecule targeting in treatment of hepatocellular carcinoma[J]. Jian-Jun Gao,Zhen-Yan Shi,Ju-Feng Xia,Yoshinori Inagaki,Wei Tang. World Journal of Gastroenterology. 2015(42)
本文编号：3602059
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3602059.html
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