黄粉虫TmApoD与TmVLDLR基因表达特征与影响调控虫体水分平衡的研究
发布时间：2022-02-14 16:10
脂质参与调控昆虫虫体的水分平衡,对维持昆虫正常的生理活动,尤其是抵抗高温干旱等不良环境胁迫有着重要作用。载脂蛋白D（Apolipoprotein D,Apo D）以及极低密度脂蛋白（Very low density lipoprotein,VLDLR）在昆虫的脂质代谢与运输过程中发挥重要作用。本文拟通过基因克隆、定量PCR以及RNAi等,对黄粉虫Tm Apo D与Tm VLDLR基因的表达特征以及基因功能进行研究,探索这两个基因与黄粉虫虫体水分平衡之间的关系,为提高黄粉虫在人工饲养过程中对湿度等外界条件的适应能力奠定基础。本论文得到的试验结果如下:扩增得到包含基因全长c DNA的Tm Apo D与Tm VLDLR基因。基因表达特征研究结果表明Tm Apo D与Tm VLDLR基因分别在脂肪体与头部高表达,与其它组织部位存在显著差异;其次Tm Apo D与Tm VLDLR基因分别在雌成虫期与1龄幼虫期高表达,与其它发育阶段存在显著差异。表明黄粉虫Tm Apo D与Tm VLDLR基因的表达具有组织特异性以及发育阶段特异性。低湿度胁迫导致黄粉虫Tm Apo D基因的相对表达量极显著高于对照...
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
耐旱胁迫装置图
黄粉虫TmApoD与TmVLDLR基因表达特征与影响虫体水分平衡的研究202.2.9试验数据分析定量PCR的数据采用2－ΔΔct计算基因的相对表达量，结果以方差±标准误表示，采用单因素方差分析方法，Turkey’s法进行多重比较，P<0.05表示差异显著，P>0.05表示差异不显著。除定量PCR以外的数据，如死亡率、失水率以及日失重量等结果以方差±标准误表示，采用T检验分析方法，P<0.01表示差异极显著，P>0.01表示差异不显著。2.3结果与分析2.3.1黄粉虫TmApoD基因序列分析从黄粉虫转录组数据中，通过筛选，比对获取目的基因序列，并通过设计引物，调整PCR条件等扩增得到TmApoD基因的ORF片段（图2.2）。图2.2TmApoD基因扩增条带Figure2.2PCRamplificationofORFofTmApoDgene注：泳道1：DL2000Maker；泳道2：TmApoD基因（693bp）TmApoD基因ORF以ATG为起始密码子，TGA为终止密码子（图2.3）。信号肽预测结果表明，TmApoD基因含有16个氨基酸的信号肽区域，为分泌蛋白（图2.4）。
黄粉虫TmApoD基因表达与功能研究21图2.3TmApoD基因核苷酸与氨基酸序列分析Figure2.3NucleotideacidanddeducedaminoacidsequencesofTmApoDgene注：黄色突出显示的为信号肽区域；红色字体下划线标出的为半胱氨酸。图2.4TmApoD基因信号肽预测Figure2.4SignalpeptidepredictionofTmApoDgeneTmApoD基因全长693bp，编码230个氨基酸，理化性质分析结果如表2.13所示：TmApoD基因去除信号肽的蛋白分子量为23.4kDa，带28个负电荷残疾（Asp+Glu），23个正电荷残基（Arg+Lys）。等电点为5.08，不稳定系数为29.27，脂肪族氨基酸指数为72.52，总疏水系数为-0.328，为亲水性稳定蛋白。
【参考文献】：
期刊论文
[1]畜禽VLDLR基因研究进展[J]. 曹恒,付学言,樊红灯,白俊艳,时坤鹏,卢小宁,陈梦柯,马永康,巩慧荣. 当代畜禽养殖业. 2019(11)
[2]昆虫表皮发育研究进展及展望[J]. 刘晓健,刘卫敏,赵小明,张建珍,马恩波. 应用昆虫学报. 2019(04)
[3]活体黄粉虫对肉蛋兼用鸡产蛋性能及肉蛋中核苷酸含量研究[J]. 李增军,曹克宁,王洪亮. 饲料博览. 2018(12)
[4]日粮添加黄粉虫对断奶仔猪生长性能、养分利用率、血液生化及免疫指标的影响[J]. 罗永光,嵇军亚. 中国饲料. 2018(22)
[5]鸡VLDLR基因在不同组织中的表达分析[J]. 魏瑞,王聪,杨荔,吴静怡,张汤杰. 畜牧与兽医. 2018(07)
[6]RNAi技术在农业害虫防治中的应用研究进展[J]. 王聪,蔡普默,张琪文,杨燕川,陈家骅. 中国植保导刊. 2018(06)
[7]水分胁迫下水稻对褐飞虱转录组的影响[J]. 谭椰,徐文彦,周文武,鹿东东,商晗武,祝增荣. 植物保护学报. 2017(06)
[8]白蜡虫蜡酯合酶基因cDNA全长克隆及原核表达[J]. 刘博文,王雪庆,孙涛,亓倩,于淑惠,杨璞,陈晓鸣. 林业科学研究. 2016(04)
[9]意大利蝗不连续气体交换循环（DGC）呼吸周期历时对高温胁迫的响应[J]. 王冬梅,李爽,张永军,Roman JASHENKO,季荣. 昆虫学报. 2016(05)
[10]温度对黄粉虫幼虫生长的影响[J]. 田海林,何勇,潘丽,胡登乾,李兴美. 农技服务. 2016(03)
博士论文
[1]褐飞虱体表脂质合成通路基因研究[D]. 李丹婷.浙江大学 2019
硕士论文
[1]黄粉虫脂肪酸合成关键基因的发育表达以及超长链脂肪酸延伸酶的功能研究[D]. 郑天祥.浙江农林大学 2017
[2]家蚕Apolipoprotein D基因克隆及功能分析[D]. 陈世达.西南大学 2016
[3]高邮鸭VLDLR基因的序列分析及其多态性与生长和屠宰性状的相关性研究[D]. 赵南南.扬州大学 2015
[4]湛江文昌鱼VLDLR基因的克隆及功能的初步研究[D]. 王海利.辽宁师范大学 2011
[5]荒漠甲虫水分散失和补充过程中血淋巴内离子、能量物质及其能量变化[D]. 宋菁.新疆农业大学 2008
[6]文昌鱼Apolipoprotein D基因结构和调控元件的进化分析及体外表达和功能研究[D]. 丛艺.中国海洋大学 2008
[7]黄粉虫饲养条件及对锌富集情况研究[D]. 肖银波.四川农业大学 2002
本文编号：3624866
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
耐旱胁迫装置图
黄粉虫TmApoD与TmVLDLR基因表达特征与影响虫体水分平衡的研究202.2.9试验数据分析定量PCR的数据采用2－ΔΔct计算基因的相对表达量，结果以方差±标准误表示，采用单因素方差分析方法，Turkey’s法进行多重比较，P<0.05表示差异显著，P>0.05表示差异不显著。除定量PCR以外的数据，如死亡率、失水率以及日失重量等结果以方差±标准误表示，采用T检验分析方法，P<0.01表示差异极显著，P>0.01表示差异不显著。2.3结果与分析2.3.1黄粉虫TmApoD基因序列分析从黄粉虫转录组数据中，通过筛选，比对获取目的基因序列，并通过设计引物，调整PCR条件等扩增得到TmApoD基因的ORF片段（图2.2）。图2.2TmApoD基因扩增条带Figure2.2PCRamplificationofORFofTmApoDgene注：泳道1：DL2000Maker；泳道2：TmApoD基因（693bp）TmApoD基因ORF以ATG为起始密码子，TGA为终止密码子（图2.3）。信号肽预测结果表明，TmApoD基因含有16个氨基酸的信号肽区域，为分泌蛋白（图2.4）。
黄粉虫TmApoD基因表达与功能研究21图2.3TmApoD基因核苷酸与氨基酸序列分析Figure2.3NucleotideacidanddeducedaminoacidsequencesofTmApoDgene注：黄色突出显示的为信号肽区域；红色字体下划线标出的为半胱氨酸。图2.4TmApoD基因信号肽预测Figure2.4SignalpeptidepredictionofTmApoDgeneTmApoD基因全长693bp，编码230个氨基酸，理化性质分析结果如表2.13所示：TmApoD基因去除信号肽的蛋白分子量为23.4kDa，带28个负电荷残疾（Asp+Glu），23个正电荷残基（Arg+Lys）。等电点为5.08，不稳定系数为29.27，脂肪族氨基酸指数为72.52，总疏水系数为-0.328，为亲水性稳定蛋白。
【参考文献】：
期刊论文
[1]畜禽VLDLR基因研究进展[J]. 曹恒,付学言,樊红灯,白俊艳,时坤鹏,卢小宁,陈梦柯,马永康,巩慧荣. 当代畜禽养殖业. 2019(11)
[2]昆虫表皮发育研究进展及展望[J]. 刘晓健,刘卫敏,赵小明,张建珍,马恩波. 应用昆虫学报. 2019(04)
[3]活体黄粉虫对肉蛋兼用鸡产蛋性能及肉蛋中核苷酸含量研究[J]. 李增军,曹克宁,王洪亮. 饲料博览. 2018(12)
[4]日粮添加黄粉虫对断奶仔猪生长性能、养分利用率、血液生化及免疫指标的影响[J]. 罗永光,嵇军亚. 中国饲料. 2018(22)
[5]鸡VLDLR基因在不同组织中的表达分析[J]. 魏瑞,王聪,杨荔,吴静怡,张汤杰. 畜牧与兽医. 2018(07)
[6]RNAi技术在农业害虫防治中的应用研究进展[J]. 王聪,蔡普默,张琪文,杨燕川,陈家骅. 中国植保导刊. 2018(06)
[7]水分胁迫下水稻对褐飞虱转录组的影响[J]. 谭椰,徐文彦,周文武,鹿东东,商晗武,祝增荣. 植物保护学报. 2017(06)
[8]白蜡虫蜡酯合酶基因cDNA全长克隆及原核表达[J]. 刘博文,王雪庆,孙涛,亓倩,于淑惠,杨璞,陈晓鸣. 林业科学研究. 2016(04)
[9]意大利蝗不连续气体交换循环（DGC）呼吸周期历时对高温胁迫的响应[J]. 王冬梅,李爽,张永军,Roman JASHENKO,季荣. 昆虫学报. 2016(05)
[10]温度对黄粉虫幼虫生长的影响[J]. 田海林,何勇,潘丽,胡登乾,李兴美. 农技服务. 2016(03)
博士论文
[1]褐飞虱体表脂质合成通路基因研究[D]. 李丹婷.浙江大学 2019
硕士论文
[1]黄粉虫脂肪酸合成关键基因的发育表达以及超长链脂肪酸延伸酶的功能研究[D]. 郑天祥.浙江农林大学 2017
[2]家蚕Apolipoprotein D基因克隆及功能分析[D]. 陈世达.西南大学 2016
[3]高邮鸭VLDLR基因的序列分析及其多态性与生长和屠宰性状的相关性研究[D]. 赵南南.扬州大学 2015
[4]湛江文昌鱼VLDLR基因的克隆及功能的初步研究[D]. 王海利.辽宁师范大学 2011
[5]荒漠甲虫水分散失和补充过程中血淋巴内离子、能量物质及其能量变化[D]. 宋菁.新疆农业大学 2008
[6]文昌鱼Apolipoprotein D基因结构和调控元件的进化分析及体外表达和功能研究[D]. 丛艺.中国海洋大学 2008
[7]黄粉虫饲养条件及对锌富集情况研究[D]. 肖银波.四川农业大学 2002
本文编号：3624866
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3624866.html
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