拟南芥β-葡葡糖苷酶19基因启动子关键DNA功能区段分析

发布时间：2022-02-18 11:21

　　自然界的植物为了满足生长与发育的需求可以根据外部环境的变化来相应地驱动特定基因在某组织部位表达,从而适应复杂且不断变化的生长环境。启动子是DNA序列中可以起始转录、识别RNA聚合酶并结合DNA,位于结构基因5’端上游区域启动基因转录的一段序列。植物基因启动子中有多种重要顺式作用元件,这些元件在转录水平上参与调节相应下游基因的表达,从而使植物可以抵抗外界环境的胁迫而更好的生长发育。据研究,当植物中启动子转录调控受到影响后,有可能会引起基因表达甚至会使其生长发育出现不良反应,所以研究植物启动子对于我们更好的了解基因转录调控的表达模式及其调控机制是非常重要的。本实验室以前的研究发现拟南芥β-葡萄糖苷酶19（Beta-glucosidase,BGLU19）基因启动子是具有种子特异性表达的启动子,它可以控制外源基因在植物种子中高效表达而非植物的其他部位中表达,以及避免在转基因植株中非特异表达所引起的能量负荷和物质浪费,减少对植物的不利影响。本研究将从分子水平上通过对AtBGLU19启动子进行缺失突变继而获得转基因拟南芥纯合体,以此来确定决定种子特异性表达元件和关键DNA区域,以及研究β-葡萄糖苷... 

【文章来源】：曲阜师范大学山东省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词
第一章 文献综述
    1.1 β-葡糖苷酶概述
        1.1.1 β-葡糖苷酶及其结构特性
        1.1.2 β-葡糖苷酶的来源及研究进展
        1.1.3 β-葡糖苷酶的理化性质
        1.1.4 β-葡糖苷酶的功能及应用
        1.1.5 β-葡糖苷酶的基因结构的研究
    1.2 植物启动子的研究进展
        1.2.1 植物启动子概念
        1.2.2 植物启动子的结构特征
        1.2.3 启动子的类型及功能
        1.2.4 启动子的研究方法
    1.3 主要研究内容与研究意义
第二章 实验材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 拟南芥及培养材料
        2.1.2 菌株
        2.1.3 载体
        2.1.4 生化试剂及酶
        2.1.5 相关引物的合成及测序
        2.1.6 实验仪器
        2.1.7 常用溶液、培养基及GUS染色液的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 CTAB法提取拟南芥基因组DNA
        2.2.2 AtBGLU19启动子缺失片段克隆载体的构建
        2.2.3 AtBGLU19启动子缺失片段表达载体的构建
        2.2.4 表达载体转化农杆菌
        2.2.5 浸花法侵染拟南芥
        2.2.6 转基因拟南芥植株的筛选
        2.2.7 转基因纯系拟南芥GUS组织化学染色
第三章 结果与分析
    3.1 AtBGLU19启动子及缺失启动子组织特异性元件分析
        3.1.1 AtBGLU19启动子序列组织特异性元件分析
        3.1.2 AtBGLU19启动子及各缺失启动子缺失突变分析
    3.2 AtBGLU19启动子缺失克隆载体构建
        3.2.1 缺失片段PCR扩增
        3.2.2 缺失克隆载体构建
    3.3 AtBGLU19启动子缺失表达载体的构建
        3.3.1 表达载体的菌落PCR扩增
        3.3.2 表达载体双酶切鉴定
    3.4 转基因拟南芥纯合株系的获得及GUS组织化学染色
        3.4.1 转基因拟南芥纯合株系的获得
        3.4.2 AtBGLU19启动子与缺失启动子的GUS组织化学染色
第四章 结论与讨论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]植物组织特异性启动子研究进展[J]. 焦勇,柳小庆,江海洋,陈茹梅.  中国农业科技导报. 2019(01)
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[3]微生物纤维素酶的研究概况及应用前景[J]. 张凤梅.  青海畜牧兽医杂志. 2016(03)
[4]华山松凋落针叶上的真菌多样性及4株真菌的纤维素分解能力[J]. 许秀兰,杨春琳,田莎,姜欣华,刘韩,刘应高.  林业科学. 2016(01)
[5]植物诱导型启动子及相关顺式作用元件研究进展[J]. 李濯雪,陈信波.  生物技术通报. 2015(10)
[6]植物启动子研究进展[J]. 李田,孙景宽,刘京涛.  生物技术通报. 2015(02)
[7]穿膜肽-β-葡萄糖苷酶偶联物的制备及活性鉴定[J]. 王光文,周洁,王启辉,刘云龙.  山东医药. 2013(38)
[8]产β-葡萄糖苷酶真菌的筛选鉴定、纯化及酶学性质分析[J]. 陈静,郝伟伟,王春梅,陈惠,吴琦,韩学易.  食品科学. 2013(05)
[9]β-葡萄糖苷酶I、L-6和IL-12在诊断新生儿坏死性小肠结肠炎中的应用价值[J]. 李晓霞.  中国现代医生. 2012(23)
[10]产β-葡萄糖苷酶微生物育种研究进展[J]. 石彩蕊,王义强,陈介南,张伟涛.  生物技术通报. 2011(03)

硕士论文
[1]拟南芥β-葡糖苷酶19基因启动子的克隆及功能初析[D]. 陈慧清.曲阜师范大学 2016
[2]β-葡萄糖苷酶基因的克隆及其表达[D]. 潘海芳.福建师范大学 2006



本文编号：3630742