农杆菌介导抗虫基因Cry1Ac/Ab转化大豆的研究

发布时间：2022-02-20 05:25

　　利用农杆菌介导的子叶节遗传转化体系,将Cry1Ac/Ab融合抗虫基因表达载体导入栽培大豆品种GP03-8-23中,通过Cry1Ac/Ab融合基因在大豆中的表达,获得了抗虫转基因大豆新材料。试验共转化子叶节外植体1 540个,再生转化苗经PCR、Southern杂交和Bar试纸条检测,获得85株阳性转基因植株,平均转化率为5.47%。利用实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）检测了目标基因在转基因大豆不同株系及不同组织中的表达量。结果表明:不同转基因株系表达量存在显著差异,目标基因在大豆根、茎、叶、子粒中均有表达,在叶中的表达量最高,根中的表达量较高,茎和子粒中的表达量最低。经室内抗食叶性害虫离体鉴定,获得抗虫性较好的T1代转Cry1Ac/Ab基因大豆材料,其中1份表现为高抗,抗虫性显著优于对照,可为培育抗虫大豆新品系提供新的种质材料。 

【文章来源】：吉林农业大学学报. 2017,39(05)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 植物材料
        1.1.2 基因及载体
        1.1.3 检测引物
    1.2 方法
        1.2.1 植物表达载体p B7RWG-Cry1Ac/Ab在大豆中的遗传转化
        1.2.2 转化植株的分子生物学检测
    1.3 转基因大豆抗食叶性害虫的离体鉴定
2 结果与分析
    2.1 农杆菌介导法获得转Cry1Ac/Ab融合基因大豆植株
    2.2 转化植株的分子生物学检测
    2.3 转基因植株的Southern blot检测
    2.4 T1代转Cry1Ac/Ab融合基因大豆目标基因相对表达情况的分析
    2.5 转基因植株抗食叶性害虫的离体鉴定
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]农杆菌介导的RNAiCP基因在大豆中的转化[J]. 章洁琼,李红艳,胡小南,单志慧,唐桂香.  作物学报. 2013(09)
[2]外源DNA直接导入技术及在大豆育种中的应用[J]. 任海红,任小俊,王英,刘学义.  山西农业科学. 2013(05)
[3]Screening Chinese soybean genotypes for Agrobacterium-mediated genetic transformation suitability[J]. Zhang-yue SONG,Jing-luan TIAN,Wei-zhe FU,Lin LI,Ling-hong LU,Lian ZHOU,Zhi-hui SHAN,Gui-xiang TANG,Hui-xia SHOU.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2013(04)
[4]根癌农杆菌介导大豆转Bt-cryIA抗虫基因[J]. 蓝岚,吴帅,申丽威,王志坤,孟凡立,宋波,拓云,刘珊珊.  中国油料作物学报. 2013(01)
[5]cry2Aa9m抗虫基因植物表达载体构建及对大豆的遗传转化[J]. 朱延明,郜庭,张凤,柏锡,才华,纪巍,罗晓.  东北农业大学学报. 2013(01)
[6]不同转化方法获得的转基因棉花外源基因拷贝数分析[J]. 杨晓杰,刘传亮,张朝军,武芝霞,张雪妍,刘坤,房卫平,李付广.  农业生物技术学报. 2011(02)
[7]cry1Ia1基因转化大豆及抗虫性的初步评价[J]. 武小霞,李静,王志坤,刘珊珊,李海燕,武天龙,李文滨.  上海交通大学学报(农业科学版). 2010(05)
[8]实时荧光定量PCR技术研究进展及其应用[J]. 陈旭,齐凤坤,康立功,李景富.  东北农业大学学报. 2010(08)
[9]利用花粉管通道法将抗虫基因（cryV）转入大豆的研究[J]. 武小霞,刘伟婷,刘琦,李静,马永,李文滨.  大豆科学. 2010(04)
[10]转cry 1Iem基因大豆的培育及抗虫性检测[J]. 陈秀华,柏锡,潘欣,翟红,才华,纪巍,李勇,朱延明.  大豆科学. 2009(06)



本文编号：3634406