水稻种子特异表达基因OsbZIP76的功能研究

发布时间：2022-09-29 13:40

　　水稻是世界上最重要的粮食作物之一。胚乳是水稻种子的重要组成部分,胚乳的发育状态直接影响水稻产量和稻米品质,因此对水稻胚乳发育调控机理的研究具有非常重要的意义。近年来发现印记基因对于拟南芥种子的发育十分重要,然而迄今为止,关于控制水稻胚乳发育的水稻印记基因的作用还未得到很好的认识,同时研究证明转录因子广泛参与水稻胚乳发育的调控。因此,本项目拟对一个bZIP转录因子家族中潜在的印记基因OsbZIP76展开研究,探索其在水稻胚乳发育过程中作用。具体研究结果如下:1.前人研究表明OsbZIP76是母本特异表达印记基因,但是实验结果表明在五丰（W）和豫6（Y）的正反交组合中主要表达豫6的等位基因,当东乡野生稻（D）作为母本分别与荣丰（R）和豫6（Y）杂交后主要表达东乡野生稻（D）的等位基因,当东乡野生稻（D）作为父本分别与荣丰（R）和豫6（Y）杂交后母本等位基因和父本等位基因以2:1的比例表达。因此,在我们所选取的这四组正反交组合中OsbZIP76并不呈现印记表达模式,表明OsbZIP76是一个背景依赖性的印记基因。2.烟草亚细胞定位结果表明OsbZIP76主要定位在烟草表皮细胞细胞核中,这与O... 

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
第一章 文献综述
    1.1 水稻胚乳发育的研究进展
        1.1.1 水稻胚乳的发育进程
        1.1.2 水稻胚乳发育的分子调控
    1.2 印记基因的研究进展
        1.2.1 印记基因的发现
        1.2.2 印记基因的进化理论
        1.2.3 印记基因与胚乳发育
    1.3 植物bZIP转录因子的研究进展
        1.3.1 植物转录因子家族的研究
        1.3.2 植物bZIP转录因子结构
        1.3.3 植物bZIP转录因子生物学功能
    1.4 本研究的目的和意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 载体构建
        2.2.1 OsbZIP76过表达和OsbZIP76 RNAi载体构建
        2.2.2 OsbZIP76 CRISPR/Cas9载体构建
    2.3 定量RT-PCR分析
        2.3.1 水稻组织总RNA提取
        2.3.2 第一链cDNA的合成
        2.3.3 定量RT-PCR
    2.4 印记基因验证
    2.5 烟草亚细胞定位
    2.6 原位杂交
    2.7 转录激活活性检测
    2.8 酵母双杂交
    2.9 双荧光素酶检测试验(LUC)
    2.10 双分子荧光互补试验(BiFC)
    2.11 树脂切片
第三章 结果和分析
    3.1 OsbZIP76的印记表达模式验证
    3.2 OsbZIP76表达模式
    3.3 OsbZIP76亚细胞定位
    3.4 OsbZIP76异常表达造成种子发育较小
    3.5 osbzip76突变体胚乳细胞化提前
    3.6 转录组分析
    3.7 OsbZIP76和OsNF-YB1/9互作
第四章 小结与讨论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]植物种子发育的分子机理[J]. 刘春明,程佑发,刘永秀,孙蒙祥,薛红卫.  中国基础科学. 2016(02)
[2]植物NF-Y转录因子的生物学功能及其研究进展[J]. 宋秋明,李大勇,张慧娟,宋凤鸣.  植物生理学报. 2015(05)
[3]植物基因组印迹的表观遗传学机制及其演化研究[J]. 李玥,赖思晨,张云峰,田宝强,严胜柒.  分子植物育种. 2014(05)
[4]bZIP转录因子与植物抗逆性研究进展[J]. 曹红利,岳川,王新超,杨亚军.  南方农业学报. 2012(08)
[5]核因子Y在植物中的分类及其功能概述[J]. 李文滨,李胜畅,王志坤.  东北农业大学学报. 2012(01)
[6]植物bZIP转录因子的生物学功能[J]. 张计育,渠慎春,郭忠仁,杜小丽,都贝贝,章镇.  西北植物学报. 2011(05)
[7]Polycomb Group蛋白复合体与植物春化作用[J]. 安艳荣,徐建斌,安海龙.  遗传. 2011(03)
[8]拟南芥的印记基因和印记表达调控[J]. 张红宇,徐培洲,杨华,吴先军.  遗传. 2010(07)
[9]植物bZIP转录因子的研究进展[J]. 杨颖,高世庆,唐益苗,冶晓芳,王永波,刘美英,赵昌平.  麦类作物学报. 2009(04)
[10]水稻胚乳游离核的分裂及其影响因素[J]. 刘满希,王忠,吴小美,陈义芳,顾蕴洁.  中国水稻科学. 2008(03)

博士论文
[1]组蛋白甲基化与DNA甲基化的相互作用及其表观遗传机制的研究[D]. 陈香嵩.华中农业大学 2012



本文编号：3682697