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miR-26b调控Sox6和Bhlhe22基因表达影响胰岛素分泌的机制研究

发布时间:2022-12-08 03:54
  目的阐明miR-26b通过调控Sox6和Bhlhe22基因介导胰岛素的分泌的机制。方法进行胰岛β细胞INS-1培养,miR-26b的过度表达通过慢病毒转染,miR-26的干扰通过miR-26bminics。INS-1细胞可分为3类:野生型INS-1细胞、miR-26b过表达INS-1细胞和miR-26b抑制INS-1细胞。构建miR-26b沉默细胞株和过表达细胞株与验证,采用慢病毒转染技术再次分别构建Sox6和Bhlhe22基因沉默细胞株和Sox6和Bhlhe22基因过表达细胞株,使用酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测胰岛素含量;采用实时聚合酶链式反应(QT-PCR)和免疫印迹法(Western blotting)方法检测Sox6和Bhlhe22基因及蛋白的表达。结果与对照组相比,miR-26b过度表达组Bhihe22、Sox6基因及蛋白表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05); miR-26b抑制组Bhihe22、Sox6基因及蛋白的表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,miR-26b过度表达组胰岛素释放增加68.9%,而miR-26b抑制组胰岛素释... 

【文章页数】:4 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 主要试剂
    1.2 mi R-26b过表达慢病毒构建
    1.3 INS-1细胞株培养
    1.4 胰岛素ELISA检测
    1.5 免疫印迹实验
    1.6 荧光定量PCR实验
    1.7 统计学处理
2 结果
    2.1 3组Sox6和Bhihe22蛋白及基因表达比较
    2.2 3组胰岛素释放的比较
3 讨论
4 结论


【参考文献】:
期刊论文
[1]急性冠脉综合征患者血清miR-26b、IGF-1表达水平与冠脉病变程度的相关性分析[J]. 王娟,陈丹,谭利国,汪茜.  热带医学杂志. 2019(06)
[2]miR-26a调控Sox6和Bhlhe22表达对胰岛素分泌的影响[J]. 柳岚,桑丹,曾玲,蒋凤秀,陆泽元.  中国社区医师. 2016(34)



本文编号:3713497

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