核糖体基因GmRPL12对大豆低硫耐性的调控作用研究

发布时间：2023-03-19 20:49

　　为研究大豆中核糖体基因对大豆耐低硫胁迫功能的调控作用,从科丰1号根中克隆1个大豆核糖体蛋白编码基因GmRPL12。分析基因结构和低硫胁迫下不同组织中的表达情况,将基因过表达载体和干扰载体转化科丰1号毛状根,获得转基因嵌合体,并进行基因表达分析和植株表型分析。序列分析结果表明:基因编码区全长576 bp,预测蛋白C端包含1个核糖体蛋白L7/L12保守结构域RPL12。该基因在根中表达量较高,表达水平受低硫诱导,不同品种中该基因对低硫响应的模式不同。通过毛状根遗传转化获得GmRPL12基因过表达、RNA干扰以及空载体对照的大豆嵌合体。低硫处理与正常硫水平处理相比,GmRPL12基因过表达的大豆嵌合体植株倒一叶和倒二叶SPAD、株高、地上部鲜重和干重、地下部鲜重和干重显著增加,RNA干扰下调大豆嵌合体植株的以上指标。GmRPL12基因的过量表达能显著增加低硫处理时地上部、地下部的无机硫含量,以及正常硫水平处理时地上部的无机硫含量。研究结果暗示GmRPL12基因可能参与大豆对低硫耐性和大豆硫代谢的调控。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 试验设计
    1.3 方法
        1.3.1 大豆核酸提取及cDNA第一链的合成
        1.3.2 基因克隆
        1.3.3 生物信息学分析
        1.3.4 实时定量PCR
        1.3.5 过表达载体与干扰载体的构建
        1.3.6 转化毛状根
        1.3.7 转基因嵌合体表型指标测定
    1.4 数据分析
2 结果与分析
    2.1 GmRPL12基因的克隆
    2.2 大豆GmRPL12基因的表达分析
        2.2.1 不同组织中GmRPL12基因的表达分析
        2.2.2 不同硫水平下GmRPL12基因表达分析
    2.3 转基因嵌合体的低硫诱导分析
        2.3.1 不同硫水平下转基因大豆嵌合体中GmRPL12基因表达分析
        2.3.2 不同硫水平下转基因嵌合体的根量分析
        2.3.3 不同硫水平下转基因嵌合体植株的SPAD和株高分析
        2.3.4 不同硫水平下转基因嵌合体植株地上部和地下部鲜重、干重分析
        2.3.5 过表达GmRPL12基因嵌合体植株不同硫水平下植株无机硫含量
3 讨 论
4 结 论



本文编号：3765950