紫花苜蓿(Medicago sativa) MsYSL6、MsYSL7基因功能分析

发布时间：2023-04-02 08:52

　　黄色条纹蛋白(Yellow stripe-like protein,YSL)功能重要且广泛。紫花苜蓿YSL蛋白研究报道较少,作用机制尚不明确。紫花苜蓿再生体系的建立也不够完善。本研究以转MsYSL6和MsYSL7烟草为材料,进行后代筛选、亚显微结构观察、光合参数测定实验;分析了转基因烟草对非生物胁迫,金属胁迫的响应;研究了2,4-D与6-BA对肇东苜蓿愈伤组织形成的影响,主要研究结果如下:1.转MsYSL6和MsYSL7烟草后代筛选及性状分析利用卡那培养基对转MsYSL6和MsYSL7烟草种子逐代筛选,得到了T2、T3代抗性苗;对抗性苗进行PCR鉴定,获到7个MsYSL6 T2株系和7个MsYSL7 T3株系。与WT相比,MsYSL6和MsYSL7基因的转入导致烟草叶绿体中类囊体数目增多、淀粉粒增多;叶绿体含量增加;光合参数增加。MsYSL6和Ms YSL7基因导入提高了转基因烟草的光合作用能力。2.转MsYSL6烟草对非生物胁迫的响应盐、碱胁迫下,转MsYSL6烟草叶片黄化程度低于WT;干旱胁迫下,转MsYSL6烟草的种子萌发率、幼苗根长低于WT。MsYSL6基因导入提高了烟草对盐、...

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 植物YSL基因家族
        1.1.1 YSL基因家族的发现
        1.1.2 YSL基因家族的结构
        1.1.3 YSL蛋白的功能
    1.2 紫花苜蓿
        1.2.1 紫花苜蓿的经济价值
        1.2.2 紫花苜蓿的转基因技术
        1.2.3 紫花苜蓿转运蛋白的研究进展
        1.2.4 紫花苜蓿金属营养的研究进展
    1.3 本课题的研究目的和意义
    1.4 技术路线
第2章 转Ms YSL6、Ms YSL7 烟草后代筛选及分析
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 植物材料
        2.2.2 主要仪器设备
        2.2.3 主要试剂
    2.3 实验方法
        2.3.1 转基因烟草种子筛选
        2.3.2 转基因烟草植株PCR鉴定
        2.3.3 亚显微结构观察
        2.3.4 叶绿素含量测定
        2.3.5 光合参数测定
    2.4 结果
        2.4.1 筛选获得转基因烟草植株
        2.4.2 PCR检测结果
        2.4.3 转基因烟草的亚显微结构
        2.4.4 转基因烟草叶绿素含量及光合参数分析
    2.5 讨论
    2.6 本章小结
第3章 转MsYSL6烟草对非生物胁迫的响应
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 植物材料
        3.2.2 主要仪器设备
        3.2.3 主要试剂
    3.3 实验方法
        3.3.1 盐碱胁迫处理烟草叶片
        3.3.2 干旱胁迫烟草种子
        3.3.3 烟草植株竖直培养
    3.4 结果
        3.4.1 转基因烟草叶片表型试验
        3.4.2 干旱胁迫种子萌发试验
        3.4.3 转基因烟草植株竖直培养
    3.5 讨论
    3.6 本章小结
第4章 转Ms YSL6、Ms YSL7 烟草对金属胁迫的响应
    4.1 引言
    4.2 实验材料
        4.2.1 植物材料
        4.2.2 主要仪器设备
        4.2.3 主要试剂
    4.3 实验方法
        4.3.1 铜胁迫处理转基因烟草
        4.3.2 镉胁迫处理转基因烟草
        4.3.3 叶绿素含量测定
        4.3.4 组织化学染色
    4.4 结果
        4.4.1 铜胁迫分析
        4.4.2 镉胁迫分析
    4.5 讨论
    4.6 本章小结
第5章 肇东苜蓿组织培养体系的建立
    5.1 引言
    5.2 实验材料
        5.2.1 植物材料
        5.2.2 主要仪器设备
        5.2.3 主要试剂
    5.3 实验方法
        5.3.1 无菌苗的培养
        5.3.2 外植体的获得
        5.3.3 愈伤组织的诱导
        5.3.4 不定芽的分化
        5.3.5 生根培养
        5.3.6 数据分析
    5.4 结果
        5.4.1 不同处理对肇东苜蓿愈伤组织诱导的影响
        5.4.2 肇东苜蓿愈伤组织的分化
        5.4.3 生根
    5.5 讨论
    5.6 本章小结
结论
参考文献
致谢



本文编号：3778932