玉米矮生突变体das的鉴定和基因定位

发布时间：2023-04-07 05:13

　　株高是农业生产中重要的农艺性状,理想的株高在玉米育种工作中具有重要的意义。矮化植株抗倒伏能力强,可以减少自然灾害带来的损失,增加产量。因此,研究控制玉米株高遗传机制在玉米育种工作中十分重要。本课题获得了一株自发突变矮化表型的玉米突变体das。该突变体株高约为野生型的1/4。节间数目减少,节间长度严重缩短。叶片深绿,叶中脉失绿,雌花发育异常,但雄花可以得到可育的花粉。我们根据突变体das和玉米自交系178重测序结果开发InDel标记,利用玉米自交系178和突变体das的F₂群体,通过图位克隆的方法对引起突变表型的候选基因进行了物理定位。,(1)将突变体das和玉米自交系178的重测序结果分别与B73参考基因组比对,开发并验证了均匀分布在玉米10对染色体上的102个分子标记。利用图位克隆技术将DAS基因初步定位到在5号染色体。(2)进一步设计并验证得到38个具有多态性的分子标记,将定位区间缩短至700 kb之间。(3)激素处理实验表明,突变体das对赤霉素敏感。通过喷施赤霉素,突变体的表型有一定程度的恢复,但不能完全恢复至正常表型。

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 文献综述
    1.1 农作物矮杆突变体的育种现状
        1.1.1 水稻矮杆突变体的育种现状
        1.1.2 小麦矮杆突变体的育种现状
        1.1.3 玉米矮杆突变体的育种现状
        1.1.4 矮化突变体与节间的数目、长度的关系
    1.2 植物激素对植株株高的调控
        1.2.1 赤霉素对株高的调控
        1.2.2 生长素对植株株高的调控
        1.2.3 油菜素内酯对植株株高的调控
    1.3 图位克隆技术在玉米基因克隆研究中的应用
        1.3.1 图位克隆技术的定位原理
        1.3.2 图位克隆技术重要的技术环节
            1.3.2.1 遗传群体的构建
            1.3.2.2 多态性遗传分子标记的开发、筛选及利用
            1.3.2.3 目的基因的初步定位
            1.3.2.4 目的基因的精细定位
            1.3.2.5 候选基因的获得和目的基因的功能验证
            1.3.2.6 图位克隆技术遇到的问题及解决方法
    1.4 本研究的目的与意义
第二章 玉米das突变体的性状鉴定
    2.1 突变体及野生型农艺性状的鉴定
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 玉米性状的统计方法
        2.1.3 突变体及野生型农艺性状的分析
            2.1.3.1 突变体与野生型株高比较
            2.1.3.2 突变体与野生型节间表型的比较
            2.1.3.3 突变体与野生型根部表型的比较
            2.1.3.4 突变体与野生型育性的比较
    2.2 突变体das对植物激素敏感性鉴定
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 试剂
        2.2.3 赤霉素处理步骤
    2.3 结果与分析
        2.3.1 赤霉素处理结果分析
第三章 遗传分子标记的开发
    3.1 InDel分子标记的开发
    3.2 InDel遗传分子标记设计结果
第四章 DAS基因的图位克隆
    4.1 实验材料
    4.2 实验试剂
        4.2.1 实验仪器
        4.2.2 突变体显隐性突变的鉴定
        4.2.3 图位克隆群体的配制
        4.2.4 图位克隆定位F2分离群体叶片DNA提取
        4.2.5 PCR扩增反应体系
        4.2.6 琼脂糖凝胶电泳
    4.3 结果与分析
        4.3.1 DAS基因的遗传分析
        4.3.2 DAS基因的初步定位
        4.3.3 DAS基因的精细定位
        4.3.4 结论分析
第五章 结论与讨论
参考文献
附录
致谢
作者简历



本文编号：3785158