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RGS17,一个新的结直肠肿瘤抑癌基因

发布时间:2023-04-22 03:57
  近年来,结直肠肿瘤的高发病率和高死亡率使其成为当今世界临床肿瘤学上迄待解决的难题。肿瘤表观遗传学研究中,抑癌基因的缺失和失调普遍被认为是肿瘤发生和发展的重要机制。G蛋白受体信号通路作为肿瘤发病机制研究中的关键信号调节通路之一被广泛关注,而G蛋白受体信号通路调节蛋白(RGS)蛋白在肿瘤发生和发展中的重要性也被逐渐认识。目的:G蛋白受体信号通路调节蛋白RGS17,可通过激活Gα蛋白水解蛋白,终止G蛋白受体信号通路。已有研究证明,该基因与许多其他类型肿瘤相关,但其在结直肠肿瘤中的研究却很少见到。本研究的目的就是探究RGS17在结直肠肿瘤中表达水平的变化,这种变化具体起到何种作用,对肿瘤的进展有没有影响及其具体机制。方法:利用RT-PCR和Western-blot研究RGS17的在结直肠肿瘤细胞中的表达水平;运用免疫组化实验及统计学分析评估RGS17在结直肠肿瘤组织中的表达水平及其与肿瘤临床病理特征的关联性;通过稳定转染构建RGS17稳转细胞株进行增殖、迁移、钙离子浓度检测、凋亡实验评估RGS17对肿瘤细胞的生理性功能的调节能力,利用Western-blot摸索RGS17对细胞信号通路及相关蛋...

【文章页数】:81 页

【学位级别】:硕士

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致谢
中文摘要
英文摘要
缩略语及中英文对照
1 引言
2 材料与方法
    2.1 实验试剂和仪器
    2.2 人结直肠组织标本
    2.3 细胞培养
    2.4 动物饲养
    2.5 稳定转染RGS17的大肠癌细胞株的构建
    2.6 半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)
    2.7 CCK-8法检测细胞生存活力
    2.8 平板克隆形成实验
    2.9 细胞划痕实验
    2.10 TRANSWELL细胞迁移实验
    2.11 流式细胞仪检测细胞凋亡
    2.12 流式细胞仪检测细胞周期
    2.13 流式细胞仪检测胞质钙离子浓度
    2.14 蛋白免疫印迹(WESTERN-BLOT)分析
    2.15 免疫组化及其分析方法
    2.16 人大肠癌裸鼠皮下种植瘤模型
    2.17 统计学分析
3 结果
    3.1 RGS17在结直肠肿瘤细胞中低表达
    3.2 RGS17在结直肠肿瘤组织中低表达
    3.3 RGS17与结直肠癌患者临床病理特征及预后因素的相关性研究
    3.4 RGS17抑制结直肠肿瘤细胞增殖和迁移能力
    3.5 RGS17转染后对结直肠肿瘤细胞凋亡能力的影响
    3.6 RGS17对CASR及胞质钙离子浓度的影响
    3.7 RGS17通过CASR调节WNT/B-CATENIN信号途径及细胞凋亡
    3.8 RGS17对结直肠肿瘤细胞体内成瘤能力的影响
4 讨论
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
个人简介



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