两个褐飞虱海藻糖转运蛋白基因的结构及调控海藻糖代谢功能

发布时间：2023-05-14 07:45

　　【目的】海藻糖是昆虫中的主要血糖物质,在昆虫的发育及生理活动中发挥重要功能。其中,海藻糖转运蛋白(Tret)在将海藻糖从其生成组织(例如脂肪体)运输到其消耗组织的过程中起着重要作用。本研究通过分析褐飞虱(Nilaparvata lugens)两条Tret1的序列结构,进一步抑制Nl Tret1的表达,探讨这两个Nl Tret1在褐飞虱体内的生物学功能。【方法】以褐飞虱两条Tret1序列为研究对象,利用生物信息学技术分析其蛋白结构以及与其他昆虫之间的同源性。采用RNAi(RNA interference)技术将合成的外源ds RNA(double-stranded RNA)注射到实验室饲养褐飞虱种群体内,抑制其体内Nl Tret1的表达,分别在注射48 h后取材,抽取总RNA并用反转录试剂盒合成第一链c DNA,采用q RT-PCR(quantitative real-time PCR)技术检测ds Nl Tret1的干扰效果以及RNAi后褐飞虱体内海藻糖代谢通路中相关基因的表达,最后测定葡萄糖、海藻糖和糖原含量以及海藻糖酶活性。【结果】生物信息学分析表明,Nl Tret1-like X...

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
0 引言
1 材料与方法
    1.1 Nl Tret1及蛋白序列分析
    1.2 供试昆虫
    1.3 褐飞虱总RNA的抽提及第一链c DNA的合成
    1.4 ds RNA的合成
    1.5 褐飞虱的显微注射
    1.6 RNAi后褐飞虱体内海藻糖代谢通路相关基因表达量测定
    1.7 总糖原、海藻糖、葡萄糖含量以及海藻糖酶活性测定
    1.8 数据分析
2 结果
    2.1 Nl Tret1蛋白序列分析
    2.2 Nl Tret1系统进化树
    2.3 RNAi后褐飞虱体内两个Nl Tret1的表达情况
    2.4 RNAi后褐飞虱体内海藻糖代谢通路相关基因的表达情况
    2.5 RNAi后对褐飞虱体内糖原、海藻糖和葡萄糖含量的影响
    2.6 RNAi后对褐飞虱体内海藻糖酶活性的影响
3 讨论
4 结论



本文编号：3817483