药用皇菊CmACO和CmDA1基因的同源克隆

发布时间：2023-08-25 20:33

　　药用菊花为菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥头状花序,是我国传统中药材和保健茶饮之一,其活性成分主要包含挥发油、黄酮、绿原酸、微量元素等,具有极高的饮用、药用及观赏价值。1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO)是催化乙烯生物合成途径最后一步的关键酶,控制着乙烯的生成速率。DA1基因编码一种泛素受体,是植物中重要的细胞增殖调节因子,在拟南芥中DA1基因对种子和器官大小起负调节作用。本研究以皇菊为材料,优化了皇菊的再生和遗传转化体系,克隆了皇菊中的CmACO和CmDA1基因并对CmACO和CmDA1基因进行了生物信息学分析,为进一步开展CmACO和CmDA1基因功能研究提供了便利,同时也为药用皇菊的分子育种研究奠定了理论基础。主要研究结果如下:1.对药用皇菊的再生体系进行了优化,获得的最优的诱导药用皇菊叶盘分化出芽的条件为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L,最优的诱导药用皇菊小苗生根的条件为1/2MS+NAA 0.1 mg/L。2.对药用皇菊的遗传转化条件进行了优化,并结合最优的皇菊再生条件获得了最优的遗传转化体系为:预培...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 药用植物的育种研究进展
    1.2 ACO基因研究进展
    1.3 DA1 基因研究进展
    1.4 菊花的基因克隆
    1.5 本研究的目的意义
    1.6 本研究的创新点
第二章 皇菊再生和遗传转化体系优化
    2.1 引言
    2.2 材料、试剂与仪器
        2.2.1 皇菊无菌苗的获得与培养
        2.2.2 农杆菌和植物表达载体
        2.2.3 试剂
        2.2.4 仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 皇菊再生体系的优化
        2.3.2 农杆菌介导的皇菊遗传转化条件的优化
    2.4 实验结果
        2.4.1 皇菊再生体系的优化结果
        2.4.2 皇菊遗传转化条件的优化结果
    2.5 讨论
第三章 CmACO和 CmDA1 基因的同源克隆及序列分析
    3.1 引言
    3.2 材料、试剂与仪器
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 菌株与载体
        3.2.3 试剂
        3.2.4 主要仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 CmACO和CmDA1 基因的同源克隆
        3.3.2 CmACO和CmDA1 基因cDNA序列的 5’和 3’RACE扩增
        3.3.3 CmACO和CmDA1 基因cDNA全长序列的克隆
        3.3.4 CmACO和CmDA1 基因DNA序列的克隆
        3.3.5 生物信息学分析
    3.4 实验结果
        3.4.1 皇菊Total RNA的提取与检测
        3.4.2 皇菊CmACO和CmDA1 基因同源片段的获得
        3.4.3 皇菊CmACO和CmDA1 基因cDNA 5’和 3’RACE序列的获得
        3.4.4 皇菊CmACO和CmDA1 基因cDNA全长序列的获得
        3.4.5 皇菊CmACO和CmDA1 生物信息学分析
    3.5 讨论
第四章 总结
参考文献
致谢
作者简介



本文编号：3843264