太平洋鳕Fas/FasL基因的克隆与功能研究

发布时间：2024-01-20 18:38

　　太平洋鳕神经坏死病毒(Pacific cod nervous necrosis virus,PCNNV)是太平洋鳕繁育过程中易感染并导致鱼苗大量死亡的主要病毒。本研究从太平洋鳕中克隆获得Fas和FasL基因,对其进行生物信息学分析、原核表达、亚细胞定位以及对EPC细胞系的效应等研究,以期从FasL/Fas信号通路探索PCNNV暴发时太平洋鳕的免疫调节机制,为实现太平洋鳕的人工繁育提供理论依据。太平洋鳕FasL cDNA长1388 bp,5′UTR占315 bp,3′UTR占500 bp,ORF含有573 bp,ORF编码190个氨基酸,预测的编码蛋白含有一个较为保守的TNF家族同源结构域(THD)。构建了pET-32a-FasL原核表达载体,体外获得蛋白分子量约为39 kDa的FasL重组蛋白,蛋白质谱鉴定结果与预期氨基酸序列一致。MTT法检测FasL重组蛋白对EPC细胞系的效应,结果显示,高浓度的FasL重组蛋白可诱导EPC细胞大量死亡。Fas是FasL的受体,太平洋鳕Fas基因cDNA全长1975bp,5′UTR占106 bp,3′UTR占867 bp,ORF含有1002 bp,O...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

本文编号：3881347