PEDV S2基因的B细胞表位嵌入型S-层蛋白载体的构建及其抗原性分析

发布时间：2024-01-27 13:35

　　猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)是一种可引起猪严重腹泻的猪肠道疾病,属于Ⅰ类冠状病毒。其发病主要特征是急性水样下痢、脱水和呕吐等症状,仔猪感染该病毒后具有很高的死亡率,并给养猪行业带来了巨大的经济损失。近几年来,随着分子生物学技术的飞速发展,人们对PEDV的基因结构、基因功能及致病分子机理,甚至对该病毒的检测以及预防疫苗等方面都有比较大的突破。虽然有了非常更深入的认识,但是对于全面控制PEDV的流行仍处在初步的研究阶段。本论文的研究内容及结果如下:1.本试验利用生物学软件和在线数据库中筛选出PEDV S2基因的B细胞表位,并通过Overlap PCR方法将其嵌入到嗜酸乳杆菌的S-层蛋白基因中,获得融合基因SLP-EpitopeS2。然后将融合基因SLP-EpitopeS2导入到原核表达载体pGEX-4T-3中,成功构建出了原核表达载体pGEX-SLP-EpitopeS2。2.通过PCR扩增、双酶切及基因测序结果证明融合表达载体pGEX-SLP-EpitopeS2的正确性。SDS-PAGE结果证明融合蛋白SLP-EpitopeS...

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【学位级别】：硕士

图１冠状病毒的结构模型图??Ｆｉｇ．?１?ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｍｏｄｅｌ?ｐｉｃｔｕｒｅ?ｏｆ?Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ??

图２?Ｏｖｅｒｌａｐ?ＰＣＲ技术原理图??Ｆｉｇ．２?Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?Ｏｖｅｒｌａｐ?ＰＣＲ??注：图中ＳＬＰ为Ｓ－层蛋白，Ｂ?Ｅｐｉｔｏｐｅ为Ｂ细胞秦位肽基因??

图6p6〔X一SLp一印itopeSZ里组质粒酶切鉴足与用序结果

图7重组蛋白pGEX一SLP一Ep{topeSZ的SDS一PAGE和Westernblot鉴定结果

本文编号：3887062