胆道闭锁遗传易感基因STAT3通过上调IL-8促进中性粒细胞损伤胆管的机制研究

发布时间：2024-12-27 02:29

　　胆道闭锁(biliary atresia,BA)是引起小儿阻塞性黄疸的常见疾病,预后差、病死率高,其典型病理特征是以胆管为中心的进行性炎症反应。然而,BA的发病原因至今尚不明确。相关研究表明某些遗传因素与BA的发生密切相关。我们前期使用GWAS研究表明,BA患儿的STAT3基因表型与正常人群相比存在显著性差异。那么,STAT3会对BA产生怎样的影响?其机制是什么?目的:1.验证BA患儿全基因组关联研究中存在显著性差异的基因位点并做功能预测,同时对BA患儿肝脏STAT3表达水平进行检测;2.研究STAT3表达改变对BA的影响及其机制,为探明胆道闭锁发病机制提供新的思路。方法:本课题分两个部分,第一部分:验证STAT3在BA中的遗传易感性,检测其在BA患儿肝脏中的表达1.利用基因质谱分析法,对前期发现的BA异常基因进行验证并做功能预测;2.采用荧光定量PCR、Western Blot及免疫组化方法,从mRNA和蛋白水平,对胆总管囊肿及BA患儿肝脏的STAT3表达进行检测并做比较。第二部分:STAT3表达下调对BA的影响及其机制表述1.使用轮状病毒(RRV)建立BA小鼠模型,腹腔内注射STAT...

【文章页数】：110 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1.胆通闭锁OWAS结果:324BA班衡与3“正常人，人群中粉在的趁异已通过EIGFNSTRAT矫正

信号转导与转录激活子３?（ＳＴＡＴ３）属于信号转导与转录激活子（ｓｉｇｎａｌ??ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒｓ?ａｎｄ?ａｃｔｉｖａｔｏｒｓ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，ＳＴＡＴ）蛋白家族中的重要成员之一，??通过与靶基因ＤＮＡ结合调控转录。随着ＳＴＡＴ受体磷酸化、聚合和核易位，Ｓ....

图１．胆道闭锁已证易感变异均为ｅＱＴＬ，调控易感基因在ＢＡ中的异常表达

?第一部分遗传易感基因ＳＴＡＴ３在ＢＡ中表达降低???表１．?５００个ＢＡ患者和１５００个正常对照验证关联统计学结果??ＳＮＰ?Ｆｕｎｃ．ｒｅｆｇｅｎｅ?Ｇｅｎｅ．ｒｅｆｇｅｎｅ?Ａ１／Ａ２?Ｆ－Ａ?Ｆ－Ｕ?Ｐ?ＯＲ??ＳＮＰＡ?ｉｎｔｒｏｎｉｃ?ＩＬ－１０?Ｃ／Ｔ?０．２７?０....

图２．新证ＢＡ易感基因ＳＴＡＴ３、比－１０和丨Ｌ－１８潜在互作网络生物信息学预测

ＤＡＶＩＤ和ＧＳＥＡ等，发现这些候选致病基因与已知的疾病致病基因富集在相同??的功能通路上。三个基因为核心的互作网络预测主要基于物理相互作用和共表??达，ＳＴＡＴ３通过信号通路能够与１Ｌ－１０、ＩＬ－１８建立基因网络协同（图２）。??２１??

图３．?ＳＴＡＴ３基因在胆道闭锁患儿肝脏组织中表达显著性下降

我们利用免疫组化的方法对胆道闭锁患儿肝脏组织中的ＳＴＡＴ３基因表达进??行了半定量的测定，结果发现：与胆总管囊肿患儿相比，ＳＴＡＴ３基因在胆道闭??锁患儿肝脏组织中表达明显减少（图３Ａ）。接着，我们又用荧光定量ＰＣＲ的方??法进行测定，结果发现．？与胆总管囊肿患儿（ｎ＝２０）相比....

本文编号：4021001