CRISPR/Cas9技术编辑普通烟草NtBRI1基因及其生物学效应研究

发布时间：2025-04-01 01:48

　　烟草是我国重要经济作物,植株的生长发育直接关系到烟叶的品质。油菜素内酯（BRs）是一种重要的、对植物生长发育有着多方面调控作用的激素。油菜素内酯受体BRI1是一个单次跨膜的富含亮氨酸重复序列的类受体蛋白激酶（leucine-rich repeat receptor-like protein kinase,LRR-RLKs）,该蛋白是BR信号转导途径的关键组分,目前对普通烟草中NtBRI1基因的研究较少,对BRI1的功能机制尚不明晰。因此,本实验利用CRISPR/Cas9基因编辑技术编辑普通烟草NtBRI1基因,对T₀突变体的NtBRI1基因进行生物信息学分析,筛选关键结构域改变的突变体测定其NtBRI1基因表达量和观察其表型,以期初步解析普通烟草NtBRI1基因的生物学效应,为后续研究创制新的遗传材料。研究结果如下:（1）CRISPR/Cas9定点突变NtBRI1基因利用CRISPR/Cas9技术编辑NtBRI1基因,获得26株突变体,突变效率为25.7%（26/101）。靶位点1编辑效率为43.8%（91/208）;靶位点2编辑效率为71.2%（148/208）。...

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【部分图文】：

图1.1CRISPR位点特征（KirGetal.，2015）

图1.1CRISPR位点特征（KirGetal.，2015）Fig.1.1FeaturesofCRISPRloci（KirGetal.，2015）/Cas的作用机理[21]分为с个阶段(图1.2)，第阶段是隔区的获得，第二阶段是CRIPSR基因座的....

图1.2II型系统CRISPR作用模式图(方锐.等，2013)

图1.1CRISPR位点特征（KirGetal.，2015）Fig.1.1FeaturesofCRISPRloci（KirGetal.，2015）CRISPR/Cas的作用机理[21]分为с个阶段(图1.2)，第阶段是CRISPR变的间隔区的获得，....

图1.3人工改造的CRISPR系统作用示意图(Hothornetal.,2011)

西南大学硕士学位论文为了将CRISPR/Cas技术更好的应用到日常工作中，科学家对该系。目前，产脓链球菌(StreptococcuspyogenesSF370)的II型系统（最为成功的人工核酸内切酶CRISPR/Cas9[22]。通过人为的将RNA进行改造，再连....

图1.1油菜素内酯信号转导模式图(卫卓赟.等，2011)

在拟南芥中，过量表达AtHSD1提高了植株盐胁迫的抗性[77]。BRs对抗性的调节，可能是由于叶片т气孔密度和气孔开放程度决定的[78]。研究发BR可以促进н胚轴气孔的发育，BR对气孔的调节受到特定环境的影响，可多个水平т对气孔的发育进行调控。BRs介导了植物的高温和....

本文编号：4038755