斑节对虾谷氨酸脱氢酶基因克隆及氨氮胁迫对其时空表达的影响

发布时间：2017-08-02 15:08

  本文关键词：斑节对虾谷氨酸脱氢酶基因克隆及氨氮胁迫对其时空表达的影响

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【摘要】：采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)获得了斑节对虾(Penaeus monodon)谷氨酸脱氢酶基因(PmGDH)的cDNA序列。该序列全长2386 bp,开放阅读框(ORF)为1677 bp,3'非编码区(UTR)为688 bp,包括含有27个碱基的poly(A)尾,5'非编码区(UTR)为21 bp。ORF可编码558个氨基酸,预测分子量为61.837 k D,理论等电点为6.57。序列含有ELFV dehydrog N与NAD bind 1 Glu DH两个保守结构域,37个磷酸化位点,3个糖基化位点。通过同源性、相似性以及系统进化树分析,斑节对虾的GDH基因与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)GDH基因的同源性和相似性最高,并与其聚为一支。采用荧光定量的方法研究了PmGDH基因在斑节对虾不同组织、氨氮胁迫过程中差异表达情况。结果表明,PmGDH的m RNA在各组织中都有表达,其中,在肌肉组织中表达量最高,其次为眼柄神经,在血淋巴与肠组织中表达量最低。96 h氨氮胁迫后,荧光定量PCR分析结果表明PmGDH在肝胰腺和鳃组织中的表达与对照组相比都具有显著差异(P0.05),都具有不同程度的表达上调。表明PmGDH在氨氮代谢方面具有重要的作用,参与了斑节对虾机体的急性氨氮胁迫应答反应。
【作者单位】： 中国水产科学研究院南海水产研究所农业部南海渔业资源开发利用重点实验室;上海海洋大学水产与生命学院;
【关键词】： 斑节对虾 谷氨酸脱氢酶 氨氮胁迫 基因克隆 组织表达
【分类号】：S917
【正文快照】： 谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenase,EC1.4.1.2,简称GDH)作为一种线粒体酶广泛存在于植物、动物和微生物中,是氨基酸分解代谢的关键性酶,其在动物肝、肾和脑等组织中广泛分布,活性很强,可催化谷氨酸发生氧化脱氨基反应,在甲壳动物氨氮代谢过程中发挥非常重要的作用[1-2]。

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本文编号：609865