草莓FaUVR8基因的cDNA克

发布时间：2017-08-03 23:00

本文关键词：草莓FaUVR8基因的cDNA克隆、生物信息学分析及原核表达条件优化

【摘要】：紫外线B(UV-B)对于植物生长发育具有重要调节作用,其中UV RESISTANCE LOCUS 8蛋白作为UV-B的光受体在植物响应UV-B过程中起关键作用。草莓是一种重要的经济果树,目前关于草莓的UV-B光受体报道较少。为研究草莓中UV-B受体蛋白,本研究采用同源克隆的方法获得‘丰香’草莓中编码UV-B光受体蛋白的c DNA序列,进行了生物信息学的分析并构建了原核生物表达载体p ET32a-UVR8,利用中心点响应面法优化了重组蛋白的诱导条件(包括诱导温度,IPTG浓度,菌液浓度和诱导时间)。结果表明:克隆得到了编码草莓UVR8蛋白的全长c DNA序列,命名为Fa UVR8,生物信息学分析表明该序列长1 317 bp,编码438个氨基酸,预测分子量为47.28 k D,等电点p I为5.85,重建蛋白质三维结构表明该蛋白包含7个β-片状螺旋结构;原核表达得到69.7 k D的融合蛋白,对四个诱导条件优化表明将工程菌培养至菌液OD600=0.7,加入浓度为0.55 mmol/L的IPTG,在27.72℃下诱导9 h,可获得最大量重组蛋白79μg/m L。研究结果可为后期寻找与Fa UVR8蛋白互作的下游蛋白,以及进一步开展其功能研究提供参考。
【作者单位】：四川农业大学园艺学院;
【关键词】：草莓 FaUVR 生物信息学 原核表达
【基金】：全国大学生创新性实验计划(201510626005)资助
【分类号】：S668.4;Q943.2
【正文快照】： *通讯作者,htang@sicau.edu.cnCloning,Bioinformatic Analysis of Strawberry Fa UVR8 Gene and Optimiza-tion of Its Prokaryotic Expression ConditionsLiu Yongqiang Wang Xiran Ye Yuntian Lou Kefei Chen Qing Tang Haoru*College of Horticulture,Sichuan Agricultura

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