杉木转基因受体系统建立及遗传转化研究.pdf 全文
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南京林业大学
硕士学位论文
杉木转基因受体系统的建立及遗传转化研究
姓名:席梦利
申请学位级别:硕士
专业:林木遗传育种
指导教师:施季森
20040601
摘要
杉木是我国特有的常绿针叶树种之一。因其生长快,木材质量高,成林又迅速,而成
为重要的商品用材和造林树种。本文以杉木幼胚、成熟合子胚、实生苗的子叶和下胚轴、
试管苗茎段等不同外植体进行器官发生和体细胞胚胎发生研究,探讨了不同因素对器官发
生或体胚发生的影响。在国内外首次诱导出了杉木体细胞胚并再生出植株,填补了国内外
该领域的研究空白;建立了适于杉木遗传转化的稳定高效的组培受体系统:用石蜡切片方
法,观察了不定芽和体胚的发生和发育过程;通过研究7个影响杉木转化效果的因素,初
步确定了杉木茎段较为合适的转化体系,为杉木基因工程育种提供了关键的技术平台。
以杉木成熟合子胚及幼胚为起始外植体,,研究了基本培养基、植物激素、凝固剂种类、
有机附加物、合子胚的发育阶段等因素对杉木愈伤组织的诱导、愈伤组织的继代培养及不
定芽分化的影响。结果表明:1,2MS+2,4一D2mg几十6一BAl-omg/L+KT1.O嘴几+蔗糖309/L
是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基;以该配方诱导幼胚,处于胚胎选择阶段和组织
与器官分化阶段的幼胚,能诱导出松软、晶莹透明的愈伤,诱导频率为2―6%。处于组织
和器官分化及成熟阶段的幼胚,诱导出愈伤的外观形态与成熟合予胚诱导出的愈伤相似,
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本文编号:68561
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