鸡卵清蛋白基因调控序列的克隆与载体构建

发布时间：2017-08-17 17:22

  本文关键词：鸡卵清蛋白基因调控序列的克隆与载体构建

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【摘要】：卵清蛋白(ovalbumin)基因在鸡基因组中只有一对等位基因,却能每天合成分泌多达2 g的蛋白,占据卵白蛋白质的50%以上,是外源基因载体表达调控构件的首选。该研究从输卵管特异性启动子方面着手,通过对卵清蛋白基因启动子的筛选优化,找出启动子增强因子的位置以及组织特异性区域。将卵清蛋白基因上游-922~-2 073和-2 801~-3 100区域平均分成12个长度约为150 bp的序列,分别插入到-921~+38序列的上游,成功构建12个系列表达载体,为进一步筛选短缩版优化启动子提供材料;卵清蛋白基因第一内含子区域截断成300 bp左右的迷你内含子序列,成功构建8个迷你内含子系列载体,为筛选优化的迷你内含子提供必要的材料;成功分离鸡输卵管上皮细胞并优化电转染条件,通过荧光素酶活性检测初步筛选出具有最强活性重组质粒pGL4-UP-1412和内含子重组质粒pGL4-mini-intron-3,同时推断出若干包含增强子序列区域。
【作者单位】： 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;
【关键词】： 卵清蛋白基因 调控序列 载体 荧光素酶活性
【基金】：浙江省自然科学基金资助项目(LQ12C17002)
【分类号】：S831;Q78
【正文快照】： 卵清蛋白(Ovalbumin)在鸡基因组中只有一对等位基因,却能每天合成分泌多达2 g的蛋白,占据卵白蛋白质的50%以上,自然成为外源基因载体表达调控构件的首选。至今,以家禽输卵管定位表达为目标的基因导入研究,绝大部分采用了卵清蛋白基因的调控序列。然而,即便采用了卵清蛋白的调

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本文编号：690217