金铁锁β-actin基因克隆及其作为内参基因的研究

发布时间：2017-08-18 01:06

  本文关键词：金铁锁β-actin基因克隆及其作为内参基因的研究

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【摘要】：目的:建立金铁锁β-actin基因实时荧光定量PCR方法,为金铁锁实时荧光定量PCR的检测提供了内参基因。方法:根据Gen Bank上β-actin基因保守区域设计特异性引物,利用PCR扩增的方法扩增β-actin目的片段。并以β-actin作为内参基因,利用荧光定量PCR技术对糖基转移酶基因(UGT)在金铁锁根、茎、叶组织中的表达情况进行分析。结果:扩增到金铁锁的β-actin基因序列,长度为153 bp,与王不留行、鹅肠菜、马齿苋的β-actin有较高的同源性。而糖基转移酶基因在以β-actin作为内参基因时能够在金铁锁的不同组织稳定表达。结论:金铁锁β-actin基因是一个可靠的内参基因,适合在金铁锁三萜皂苷生物合成相关功能基因的表达研究中作为内参基因。
【作者单位】： 云南中医学院中药材优良种苗繁育工程中心;
【关键词】： 金铁锁 β-actin 实时荧光定量PCR TapMan探针
【基金】：国家自然科学基金(81260609) 云南省教育厅重点项目(2015119);云南省教育厅科学研究基金(2015J101)
【分类号】：S567.239
【正文快照】： 金铁锁Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu是云南白药等中成药的重要原料药。其药用有效活性成分为齐墩果烷型三萜皂苷〔1,2〕,具有镇痛、抗炎等显著药理活性〔3,4〕。近年来,与金铁锁三萜皂苷有效成分合成相关的关键酶基因逐渐被挖掘。对挖掘到的这些基因进行荧光定量

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本文编号：691936