野油菜黄单胞菌中烯脂酰ACP还原酶的功能鉴定

发布时间：2017-10-21 18:38

  本文关键词：野油菜黄单胞菌中烯脂酰ACP还原酶的功能鉴定

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【摘要】：烯脂酰ACP还原酶是细菌脂肪酸合成的关键酶之一.本研究通过生物信息学分析发现,野油菜黄单胞菌Xanthomonas campestris(Xcc)8004基因组中XC_0119(Xccfab V)注释为反-2-烯脂酰Co A还原酶基因.但其编码产物与铜绿假单胞菌的烯脂酰ACP还原酶Fab V具有较高的同源性,并含有相同的催化活性中心Tyr-(Xaa)8-Lys序列.用携带Xccfab V的质粒载体互补大肠杆菌fab I温度敏感突变株JP1111,转化子能在42℃生长,表明Xccfab V能遗传互补大肠杆菌fab I突变.体外重建脂肪酸合成反应表明,Xcc Fab V能催化不同链长的烯脂酰ACP还原为脂酰ACP,且催化活性不受三氯森抑制.遗传学研究表明,Xccfab V是必需基因,不能获得Xccfab V基因敲除突变株.将携带大肠杆菌fab I的外源质粒导入野生菌后,可敲除染色体上的fab V基因,获得的替换突变株生长特性和脂肪酸组成未发生显著变化,但替换突变株对三氯森敏感.上述结果证实,野油菜黄单胞菌fab V是必需基因,编码烯脂酰ACP还原酶,参与脂肪酸从头合成反应,且Fab V是Xcc对三氯森耐受的根本原因.
【作者单位】： 广东食品药品职业学院;华南农业大学生命科学学院/广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室;
【关键词】： 野油菜黄单胞菌 脂肪酸合成 烯脂酰ACP还原酶 三氯森耐受性
【基金】：国家自然科学基金(31200028,31471743) 广东省自然科学基金(2014A030313455) 广东食品药品职业学院院级课题(2015ZY006)资助项目~~
【分类号】：S432.4
【正文快照】： 细菌采用Ⅱ型脂肪酸合成系统从头合成脂肪酸,每步反应都由独立的酶催化[1].烯脂酰ACP还原酶(ENR)催化脂肪酸合成循环的最后一步反应,是脂肪酸合成的关键酶,已作为抗菌药物筛选靶标,用于新型抗菌药物的筛选[2-3].目前已报道的烯脂酰ACP还原酶有四种类型:Ⅰ型(Fab I)[4]、Ⅱ型(F

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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