碱性条件下苏云金芽胞杆菌基础代谢分析

发布时间：2017-11-10 14:07

  本文关键词：碱性条件下苏云金芽胞杆菌基础代谢分析

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【摘要】：【目的】探索苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)形成转录差异的碱性条件,明确B.thuringiensis在该条件下的基础代谢途径变化。【方法】采用半定量RT-PCR技术及实时荧光定量PCR技术,确定碱刺激下参考基因psp A存在表达差异的碱性处理条件。在该条件下提取RNA进行Agilent定制B.thuringiensis表达谱芯片杂交,对芯片数据进行差异表达分析、GO富集分析及生物途径富集分析等。【结果】通过检测psp A表达变化,将对数生长中期的菌体加入终浓度为28 mmol/L的Na OH并诱导培养10min,作为B.thuringiensis响应碱刺激的研究条件。富集分析表明碳代谢、脂肪酸合成代谢、氨基酸合成代谢途径变化明显。细胞糖酵解途径至少19个酶促基因上调表达,三羧酸循环中催化α-酮戊二酸转化为苹果酸的大部分酶蛋白编码基因上调2倍以上。【结论】本研究发现在碱性条件下B.thuringiensis基础代谢明显增强,细胞可能通过大量合成酸性物质如乳酸、苹果酸等来提高细胞对于碱性环境的适应能力。
【作者单位】： 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室;东北农业大学生命科学学院;
【基金】：国家自然科学基金(31530095)~~
【分类号】：S476.1
【正文快照】： 苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)是昆虫病原菌,由于其能产生杀虫伴胞晶体(Cry和Cyt毒素蛋白),已成为农业领域广泛应用的微生物农药。在活体实验中B.thuringiensis晶胞混合物毒杀大蜡螟(Galleria mellonella)活性明显高于晶体蛋白[1],说明营养体可能影响晶体蛋白的杀虫

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