黄曲霉野生型及LaeA缺陷型菌株胞外差异蛋白鉴定

发布时间：2017-12-12 13:38

  本文关键词：黄曲霉野生型及LaeA缺陷型菌株胞外差异蛋白鉴定

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【摘要】：【目的】分析黄曲霉野生型产毒株及LaeA缺陷型无毒株在以小麦、玉米为培养基质中生长时的胞外差异蛋白,为进一步明确LaeA因子在黄曲霉产毒调控中的作用提供基础数据。【方法】将小麦及玉米籽粒粉碎后灭菌并加水配制成培养黄曲霉菌的基质,在产毒株(黄曲霉CA14野生型)及无毒株(LaeA缺陷型)培养0、48和72 h时取样,采用SDS-PAGE分别分析黄曲霉毒素B1(AFB1)及胞外差异蛋白,并采用液质联用四极杆飞行时间质谱技术[LC-MS-MS(Q-TOF)]对获得的胞外差异蛋白进行鉴定。【结果】黄曲霉野生型及LaeA缺陷型菌株均能将小麦和玉米基质中的小分子蛋白迅速转化,随着培养时间延长,LaeA缺陷型菌株的胞外蛋白较野生型菌株略少,不产生黄曲霉毒素。产毒株及无毒株胞外差异蛋白条带共有7个,主要为淀粉酶A、碱性蛋白酶、木聚糖酶F3和亮氨酸氨基肽酶A等生理酶类。【结论】黄曲霉产毒株与无毒株的胞外差异蛋白为生理酶类蛋白,该类酶蛋白主要与营养摄入有关,且影响黄曲霉菌丝的生长。
【作者单位】： 河南工业大学生物工程学院;
【基金】：国家自然科学基金项目(31371850);国家自然科学基金青年基金项目(31501575) 河南省属高校基本科研业务费专项项目(2015QNJH06) 河南省教育厅自然科学研究项目(16A180025)
【分类号】：S432.4
【正文快照】： 0引言【研究意义】黄曲霉毒素(Aflatoxin,AF)是由黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillus para-siticus)产生的次生代谢产物,具有极强的毒性,普遍存在于小麦、玉米、花生等大宗农产品中(Georgianna etal.,2010)。据报道,由于食用被黄曲霉毒素污染的饲料,每年给牧畜

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