橘小实蝇半胱氨酸蛋白酶基因克隆及表达模式
本文选题：橘小实蝇 切入点：半胱氨酸蛋白酶 出处：《中山大学学报(自然科学版)》2017年01期 论文类型：期刊论文
【摘要】：为了深入了解半胱氨酸蛋白酶基因的作用和寻求害虫防治新的分子靶标,利用RT-PCR和RACE技术,从橘小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)体内克隆获得半胱氨酸蛋白酶基因Bdcyp的c DNA全长序列(Gen Bank登录号:KU904503),采用生物信息学软件分析了Bdcyp编码蛋白的特性,利用实时定量PCR技术检测其在不同发育阶段和不同组织的表达量。橘小实蝇Bdcyp的c DNA全长为1 955 bp,开放阅读框为1 653 bp,编码551个氨基酸,预测蛋白质相对分子质量和等电点分别为62 900和6.11。Bdcyp具有半胱氨酸蛋白酶的典型特征,即信号肽、3个催化活性区域(Cys-His-Asn)以及2个保守的ERFNIN和GNFD特征基序。系统发育分析表明Bdcyp编码的蛋白质与橄榄实蝇半胱氨酸蛋白酶亲缘关系最近。Bdcyp在三龄幼虫、蛹和成虫期均有表达,其在蛹中期的表达量最高;表达部位主要在幼虫脂肪体,其次为气管和表皮,而在中肠的表达量最低。这些结果为进一步研究Bdcyp基因功能提供了依据。
[Abstract]:In order to understand the role of cysteine protease gene and seek new molecular targets for pest control, RT-PCR and RACE techniques were used. The c DNA full-length sequence of cysteine protease gene Bdcyp was cloned from Bactrocera dorsalis Hendel.Gen#en3# accession number: KU904503 was obtained. The characteristics of Bdcyp encoded protein were analyzed by bioinformatics software. Real time quantitative PCR technique was used to detect the expression of Bdcyp in different developmental stages and tissues. The total length of c DNA of Bdcyp was 1 955 BP, and the open reading frame was 1 653 BP, encoding 551 amino acids. The predicted molecular weight and isoelectric point of protein were 62,900 and 6.11.Bdcyp, respectively, with typical characteristics of cysteine protease. That is, signal peptide, three catalytic active regions Cys-His-Asn) and two conserved characteristic motifs of ERFNIN and GNFD. Phylogenetic analysis showed that the protein encoded by Bdcyp was most closely related to cysteine protease in olive-fly. Both pupae and adult had the highest expression in the middle stage of pupae, mainly in larval fat body, followed by trachea and epidermis, and lowest in midgut. These results provided the basis for further study on the function of Bdcyp gene.
【作者单位】： 贵阳学院生物与环境工程学院//有害生物控制与资源利用贵州省高校特色重点实验室;西南大学植物保护学院//昆虫学及害虫控制工程重庆市市级重点实验室;
【基金】：贵州省特色重点学科基金(ZDXK[2015]11) 贵阳学院高层次人才科研启动费(校人才2014003) 中央高校基本科研业务费专项资金(XDJK2013A017) 贵州省高层次创新型人才培养(黔科合人才[2016]4020)
【分类号】：S433
【参考文献】
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【共引文献】
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本文编号：1606067
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