小菜蛾ABCC2基因的克隆与表达特征分析

发布时间：2019-07-23 13:21

【摘要】：在室内采用浸叶法测定湘北三个蔬菜产区(岳阳鲇鱼须镇；常德沧港镇；益阳沙头镇)的田间小菜蛾对7种药剂的抗药性。实验结果表明,小菜蛾对高效氯氰菊酯抗性达到极高水平(抗性倍数为257.13)；对阿维菌素,和茚虫威抗性属于高抗水平(抗性倍数为135.15和103.08)；对溴虫腈,甲氨基阿维菌素苯甲酸盐属于中抗水平；对氯虫苯甲酰胺和苏云金杆菌相对敏感。因此,湘北地区的小菜蛾防治应该注重溴虫腈,甲氨基阿维菌素苯甲酸盐,氯虫苯甲酰胺和苏云金杆菌交替使用,停止高效氯的使用,以便延缓抗药性的产生与发展。ABCC2基因在昆虫体内起着转运内源和外源有毒物的重要作用。本文利用RT-PCR和RACE技术首次克隆了小菜蛾(Plutella xylostella)的ABCC2基因cDNA全长(GenBank登录号：KM103521)。测序结果表明该基因全长4260bp,开放阅读框(ORF)长4044 bp,编码1347个氨基酸,5’-UTR长132 bp,3'-UTR长84 bp。分析蛋白质氨基酸序列,包含9个跨膜区域,没有发现信号肽,具有ABC转运体家族典型的TMD1-NBD1-TMD2-NBD2结构域排列顺序；包含Walker A, Walker B和ABC signature等ABC转运蛋白高度保守基序。采用实时荧光定量RT-PCR技术测定了小菜蛾ABCC2基因的表达特征以及小菜蛾ABCC2基因对不同药剂处理、不同种群之间的表达量差异。结果表明：不同龄期小菜蛾ABCC2基因相对表达量有差异,其中幼虫期的表达量不断升高,成虫表达量最高,分别是3龄的4.27、4龄的2.20倍、蛹期的9.98倍。4龄幼虫的ABCC2基因在中肠中的表达量最高,分别是马氏管、脂肪体、精巢的4.51倍、9.12倍、16.88倍,在头和体壁的表达量最低。三种杀虫剂不同致死浓度处理过的小菜蛾幼虫ABCC2基因的表达量都与致死浓度呈正相关,小菜蛾茚虫威抗性品系中ABCC2的表达量是敏感品系小菜蛾的6.7倍。结果表明小菜蛾ABCC2基因过量表达可能与小菜蛾抗药性相关。
【学位授予单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S433.4

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本文编号：2518181