大丽轮枝菌拮抗芽孢菌株的分离、鉴定及两株菌抑菌特性研究

发布时间：2019-10-29 23:52

【摘要】：从新疆和硕连作棉田根际土壤中分离到146株芽孢细菌.29株对大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb)具有拮抗作用的菌株中有9株拮抗性极强.经鉴定,9株拮抗性极强的菌株中有2株属短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),7株与枯草芽孢杆菌(B.subtilis)相近.抑菌特性实验表明:J-02和J-15的抑菌高峰分别出现在衰亡期和稳定期,对pH的耐受范围分别为5~9和7~9;J-02的热稳定性较好,J-15对温度较敏感,但100℃处理后仍有抑菌活性;J-02能够抑制大丽轮枝菌芽管伸长形成菌丝,J-15可导致大丽轮枝菌菌丝畸形,失去产孢能力.盆栽实验表明,J-02和J-15这2株拮抗菌对棉花黄萎病有明显防治作用.综合结果表明J-02和J-15均有作为棉花黄萎病生防菌的潜能.
【图文】：

菌落形态,拮抗菌株,拮抗菌,大丽轮枝菌

２９６北京师范大学学报（自然科学版）第５３卷小，直径大于１０ｍｍ的菌株有１７株，，占分离菌株总数１１．６％；抑菌圈直径大于２０ｍｍ的菌株９株，为高效拮抗菌，占分离菌株总数６．１％（图１）；其中，Ｊ－０２、Ｊ－１５抑菌圈直径达到２７ｍｍ．图１部分拮抗菌株对大丽轮枝菌的拮抗效果２．２拮抗菌的鉴定２．２．１生理生化鉴定革兰氏染色和芽孢染色结果可确定９株高效拮抗菌株均为芽孢杆菌属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）（表１）．表１部分拮抗菌菌落形态及生理生化特性菌株菌落革兰氏染色芽孢形状芽孢着生位置淀粉水解明胶液化Ｊ－０２－椭圆端生＋＋Ｊ－１０＋椭圆近中生＋＋Ｊ－１５＋椭圆端生＋＋Ｊ－１７＋圆端生＋＋Ｊ－２６＋椭圆端生＋＋Ｊ－２９－椭圆近中生－＋Ｊ－３５＋椭圆端生＋＋Ｊ－３６＋圆中生＋＋Ｊ－１１２＋椭圆近中生＋＋菌株Ｊ－０２菌落圆形光滑、中间突起、乳白色、有光泽、不透明、菌落边缘整齐，革兰氏染色结果为阴性，初步鉴定其为短小芽孢杆菌（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）．菌株Ｊ－１０、Ｊ－１７和Ｊ－３５菌落微黄、无光泽、近圆形、边缘不整齐、表面粗糙有褶皱．其中Ｊ－１０菌落隆起，Ｊ－１７和Ｊ－３５中间凹陷，与枯草芽孢杆菌性状相似；菌株Ｊ－１５白色、边缘不整齐、表面有褶皱，初步鉴定为枯草芽孢杆菌．２．２．２１６ＳｒＤＮＡ鉴定１６ＳｒＤＮＡ序列分析结果表明，９株菌与参比菌株的相似性范围为９６％～１００％（表２）．与ＧｅｎＢａｎｋ中所有已测定的原核生物１

拮抗菌株,系统发育树,基因序列,大丽轮枝菌

ＢａｃｉｌｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓｓｔｒａｉｎＣＩＰ５２．６７（ＮＲ＿１１５３３４．１）１００Ｊ－３５ＫＴ９０１８２２ＢａｃｉｌｌｕｓａｘａｒｑｕｉｅｎｓｉｓｓｔｒａｉｎＬＭＧ２２４７６（ＮＲ＿１１５９２９．１）９９Ｊ－３６ＫＴ９０１８２３ＢａｃｉｌｌｕｓｍｏｊａｖｅｎｓｉｓｓｔｒａｉｎＩＦＯ１５７１８（ＮＲ＿０２４６９３．１）１００Ｊ－１１２ＫＴ９０１８２４ＢａｃｉｌｌｕｓａｘａｒｑｕｉｅｎｓｉｓｓｔｒａｉｎＣＲ－１１９（ＮＲ＿１１５２８３．１）９９图２基于１６ＳｒＤＮＡ基因序列构建的拮抗菌株的系统发育树图３培养时间对Ｊ－０２拮抗大丽轮枝菌活性的影响图４培养时间对Ｊ－１５拮抗大丽轮枝菌活性的影响
【作者单位】：新疆师范大学生命科学学院新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室;北京师范大学生命科学学院抗性基因资源与分子发育北京市重点实验室;
【基金】：新疆维吾尔自治区高校科研计划科学研究重点资助项目(20140705081400714) 新疆维吾尔自治区教育厅重点实验室“新疆特殊环境物种多样性应用与调控重点实验室”资助项目(XJTSWZ-2015-01) 新疆师范大学博士启动基金资助项目(XJNUBS1416) 抗性基因资源与分子发育北京市重点实验室开放基金资助项目(2015GD03)
【分类号】：S435.621.2;S476.1

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