菟丝子生防菌“鲁保一号”生物学特性及T-DNA插入突变体库的构建
发布时间：2020-04-14 02:57
【摘要】："鲁保一号"菌剂对杂草菟丝子生防效果良好,但是受制于菌种退化问题其进一步应用受到限制。本研究通过对"鲁保一号"菌的生物学性状进行分析,明确其菌种培养特性:最佳培养基为PDA培养基,最佳培养温度为25~28℃,最佳培养pH值为5~8。同时,利用农杆菌介导的遗传转化方法进行"鲁保一号"菌株转化,并初步构建了约含2300个阳性转化子的T-DNA插入突变体库。转化子经连续继代6次培养后潮霉素B抗性稳定,随机挑取的20个转化子均能PCR克隆出潮霉素基因,转化子是由T-DNA插入引起的,且筛选抗性能够稳定遗传。以上研究为后期筛选获得致病力稳定的遗传改良菌株,并进一步应用奠定了基础。
【图文】：
直径不存在显著差异。但是，综上分析菌丝重量和分图１“鲁保一号”菌株菌落与分生孢子Ｆｉｇ．１ＣｏｌｏｎｙａｎｄｃｏｎｉｄｉａｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎＡ：“鲁保一号”菌落ＣｏｌｏｎｙｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎ；Ｂ：分生孢子ＣｏｎｉｄｉａｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎ．生孢子产量等因素，ＰＤＡ培养基为最适合“鲁保一号”菌株生长和产孢的培养基，培养１０ｄ后其产孢量达到２８５．４×１０９个孢子／皿左右，远远大于其他真菌培养基。２．２．２温度对“鲁保一号”菌生长的影响以ＰＤＡ为基础培养基，研究７个温度梯度下“鲁保一号”菌株生长状况。由表２可以看出，综合分析菌落直径和分生孢子产量，菌株在２５和２８℃培养条件下生长最好，而当温度低于２５℃时或高于２８℃时菌落直径和产孢量均显著下降，而相对高温（大于２８℃）对于菌株生长的影响更大。图２“鲁保一号”菌系统发育树分析Ｆｉｇ．２ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｓｉｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎ２．２．３ｐＨ值对“鲁保一号”菌生长的影响由表３图３“鲁保一号”菌株在潮霉素Ｂ浓度梯度培养基上的耐受实验Ｆｉｇ．３ＴｏｌｅｒａｎｃｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｏｆｔｈｅＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎｏｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇｒａｄｉｅｎｔｏｆｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢ可以看出，“鲁保一号”菌其适应范围较广，在ｐＨ值３～１０上均能生长，其中在ｐＨ４～９下菌落直径不存在显著差异。结合产孢量分析，“鲁保一号”菌最适ｐＨ值为５～８，在该范围内其菌落直径和产孢量均相近
培养基为最适合“鲁保一号”菌株生长和产孢的培养基，培养１０ｄ后其产孢量达到２８５．４×１０９个孢子／皿左右，远远大于其他真菌培养基。２．２．２温度对“鲁保一号”菌生长的影响以ＰＤＡ为基础培养基，研究７个温度梯度下“鲁保一号”菌株生长状况。由表２可以看出，综合分析菌落直径和分生孢子产量，菌株在２５和２８℃培养条件下生长最好，而当温度低于２５℃时或高于２８℃时菌落直径和产孢量均显著下降，而相对高温（大于２８℃）对于菌株生长的影响更大。图２“鲁保一号”菌系统发育树分析Ｆｉｇ．２ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｓｉｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎ２．２．３ｐＨ值对“鲁保一号”菌生长的影响由表３图３“鲁保一号”菌株在潮霉素Ｂ浓度梯度培养基上的耐受实验Ｆｉｇ．３ＴｏｌｅｒａｎｃｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｏｆｔｈｅＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎｏｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇｒａｄｉｅｎｔｏｆｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢ可以看出，“鲁保一号”菌其适应范围较广，，在ｐＨ值３～１０上均能生长，其中在ｐＨ４～９下菌落直径不存在显著差异。结合产孢量分析，“鲁保一号”菌最适ｐＨ值为５～８，在该范围内其菌落直径和产孢量均相近。而当培养基ｐＨ＜５和ｐＨ＞８时其分生孢子产量显著降低。２．３Ｔ－ＤＮＡ插入突变体库的构建２．３．１“鲁保一号”菌株对潮霉素Ｂ的耐受性选劝鲁保一号”菌株为材料，在含不同潮霉素Ｂ浓度的ＰＤＡ培养基上进行培养，结果表明（图３），在潮霉素Ｂ浓度为２５０μｇ／ｍＬ的培养基上，接种的分生孢子不
本文编号：2626785
【图文】：
直径不存在显著差异。但是，综上分析菌丝重量和分图１“鲁保一号”菌株菌落与分生孢子Ｆｉｇ．１ＣｏｌｏｎｙａｎｄｃｏｎｉｄｉａｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎＡ：“鲁保一号”菌落ＣｏｌｏｎｙｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎ；Ｂ：分生孢子ＣｏｎｉｄｉａｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎ．生孢子产量等因素，ＰＤＡ培养基为最适合“鲁保一号”菌株生长和产孢的培养基，培养１０ｄ后其产孢量达到２８５．４×１０９个孢子／皿左右，远远大于其他真菌培养基。２．２．２温度对“鲁保一号”菌生长的影响以ＰＤＡ为基础培养基，研究７个温度梯度下“鲁保一号”菌株生长状况。由表２可以看出，综合分析菌落直径和分生孢子产量，菌株在２５和２８℃培养条件下生长最好，而当温度低于２５℃时或高于２８℃时菌落直径和产孢量均显著下降，而相对高温（大于２８℃）对于菌株生长的影响更大。图２“鲁保一号”菌系统发育树分析Ｆｉｇ．２ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｓｉｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎ２．２．３ｐＨ值对“鲁保一号”菌生长的影响由表３图３“鲁保一号”菌株在潮霉素Ｂ浓度梯度培养基上的耐受实验Ｆｉｇ．３ＴｏｌｅｒａｎｃｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｏｆｔｈｅＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎｏｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇｒａｄｉｅｎｔｏｆｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢ可以看出，“鲁保一号”菌其适应范围较广，在ｐＨ值３～１０上均能生长，其中在ｐＨ４～９下菌落直径不存在显著差异。结合产孢量分析，“鲁保一号”菌最适ｐＨ值为５～８，在该范围内其菌落直径和产孢量均相近
培养基为最适合“鲁保一号”菌株生长和产孢的培养基，培养１０ｄ后其产孢量达到２８５．４×１０９个孢子／皿左右，远远大于其他真菌培养基。２．２．２温度对“鲁保一号”菌生长的影响以ＰＤＡ为基础培养基，研究７个温度梯度下“鲁保一号”菌株生长状况。由表２可以看出，综合分析菌落直径和分生孢子产量，菌株在２５和２８℃培养条件下生长最好，而当温度低于２５℃时或高于２８℃时菌落直径和产孢量均显著下降，而相对高温（大于２８℃）对于菌株生长的影响更大。图２“鲁保一号”菌系统发育树分析Ｆｉｇ．２ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｓｉｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎ２．２．３ｐＨ值对“鲁保一号”菌生长的影响由表３图３“鲁保一号”菌株在潮霉素Ｂ浓度梯度培养基上的耐受实验Ｆｉｇ．３ＴｏｌｅｒａｎｃｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｏｆｔｈｅＬｕｂａｏＮｏ．１ｓｔｒａｉｎｏｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇｒａｄｉｅｎｔｏｆｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢ可以看出，“鲁保一号”菌其适应范围较广，，在ｐＨ值３～１０上均能生长，其中在ｐＨ４～９下菌落直径不存在显著差异。结合产孢量分析，“鲁保一号”菌最适ｐＨ值为５～８，在该范围内其菌落直径和产孢量均相近。而当培养基ｐＨ＜５和ｐＨ＞８时其分生孢子产量显著降低。２．３Ｔ－ＤＮＡ插入突变体库的构建２．３．１“鲁保一号”菌株对潮霉素Ｂ的耐受性选劝鲁保一号”菌株为材料，在含不同潮霉素Ｂ浓度的ＰＤＡ培养基上进行培养，结果表明（图３），在潮霉素Ｂ浓度为２５０μｇ／ｍＬ的培养基上，接种的分生孢子不
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 ;“鲁保一号”菌剂土法生产和应用[J];湖北农业科技;1972年02期
2 ;“鲁保一号”菌种复壮和保藏[J];山东农业科学;1973年01期
3 卢青达;鲁保一号茵剂保存条件试验[J];山东农业科学;1980年01期
4 高昭远;“鲁保一号菌S_(22)变异株”研究成果通过鉴定[J];生物防治通报;1988年01期
5 赵美松;“鲁保一号”菌剂的土法生产和应用[J];皖北农学院学报;1984年01期
6 高昭远,干静娥,温庆英;性状稳定的鲁保一号菌变异株[J];植物保护;1984年03期
7 ;“鲁保一号”菌剂的土法生产与应用[J];辽宁农业科学;1971年07期
8 林伯荃,聂征,郭恒聪;鲁保一号菌的菌种退化[J];微生物学通报;1979年02期
9 ;“鲁保一号”防治大豆黄丝子[J];辽宁农业科技;1972年01期
10 高昭远,干静娥;菟丝子的生物防除——“鲁保一号”的研究进展[J];生物防治通报;1992年04期
本文编号：2626785
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/nykj/2626785.html
