Bt蛋白Cry1Ab、Cry1F及Cry3B对蚯蚓及其肠道微生物的影响

发布时间：2020-06-13 05:04

【摘要】：转基因植物进行商业化种植的20多年以来,创造了巨大的农艺、环境、经济、健康和社会效益。在转基因作物大面积推广的今天,其生态安全性也成了社会各界日益关注的问题,尤其是转基因植物对非靶标生物的影响。本研究使用Bt蛋白经喂食对蚯蚓进行染毒处理,分析比较经染毒的蚯蚓在生理指标、酶活性、肠道微生物以及体腔细胞的DNA损伤程度的变化,从而评价Bt蛋白的安全性。本实验的主要研究结果如下:(1)使用选定的Bt蛋白喂食蚯蚓,蚯蚓在第7d体重有明显增长,且成活率都在99%以内。第7d及第14d,喂食Bt蛋白的蚯蚓的体重增长率,产卵量以及成活率较对照组无明显差异,说明Bt蛋白对蚯蚓的生长发育没有显著抑制作用。(2)对喂食Bt蛋白蚯蚓体内的两种防御酶SOD、CAT,三种解毒酶POD、GST和AchE,分解有机物的纤维素酶酶活性测定分析表明:喂食Bt蛋白的蚯蚓体内酶活性与对照组的蚯蚓体内的酶活性指标并无显著差异,Bt蛋白对蚯蚓的酶活性无显著影响。(3)应用彗星实验对蚯蚓体腔细胞DNA的损伤进行了检测,结果表明:各处理组的体腔细胞的Olive尾距、尾长及尾部DNA含量值与对照组之间无显著差异,且在Bt蛋白浓度增加时,蚯蚓的体腔细胞的DNA损伤并未呈现出较好的剂量-效应关系,因此Bt蛋白并未加强对蚯蚓的体腔细胞DNA的损伤程度。(4)采用Biolog方法通过多样性指数Shannon、优势度指数Simpson以及均匀度指数McIntosh对喂食Bt蛋白的蚯蚓肠道菌群的多样性进行了分析,结果表明:与对照组相比各组蚯蚓的肠道菌群在菌群的物种多样性、优势菌群以及群落均一度等方面均无显著差异,因此Bt蛋白对蚯蚓肠道菌群微生物无显著影响。
【图文】：

蚯蚓,蛋白含量,蛋白

蚯蚓的体重有了明显的增加，喂食 Bt 蛋白的蚯蚓的体重增长率与著差异。在第 14d 时，部分组的蚯蚓体重增长率较第 7d 时有所降低，分析卵所致，蚯蚓大量产卵后体重有所下降，但是体重增长率在各组之间并没有说明 Bt 蛋白对蚯蚓的生长无显著影响。蚯蚓的产蚓茧数在第 7d 以及第 14d性差异，表明 Bt 蛋白对蚯蚓的产卵行为无显著影响。为进一步对本次实验进行了下一步的生化研究。蛋白对蚯蚓生化反应指标的测定个处理设置 3 个重复，饲养至第 14d 时，于每个重复中随机挑取 3 条蚯蚓，要 9 条蚯蚓分别对其进行总蛋白含量、6 种酶活性、DNA 损伤程度以及肠道的检测。t 蛋白对蚯蚓体内的蛋白含量的影响

蚯蚓,蛋白,有毒物质

山东农业大学硕士学位论文使用 Bt 蛋白 Cry1Ab 在喂食浓度为 1mg/kg 及 10mg/kg 的蚯蚓体内均可以的 Bt 蛋白，使用 Bt 蛋白 Cry1F 及 Cry3B 在喂食浓度为 10mg/kg 的蚯蚓体少量的 Bt 蛋白。结果证明蚯蚓已对 Bt 蛋白进行取食，且在实验结束时还解排出体外。蛋白对蚯蚓体内的超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响物体在受到外界的有毒物质的胁迫时，为及时清除体内的有毒物质，生物活性升高，从而防止有毒物质对生物体的损伤。当蚯蚓受到有毒物质胁迫动防御系统对有毒物质进行防御，提高防御酶活性以更高效地清除体内多保护机体免受外界不良影响的损伤。如图 3-2 所示，喂食 Bt 蛋白的蚯蚓的照稍有增高，但均维持在 35U-37U 之间。
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S188

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