生防芽孢杆菌的筛选及其对葡萄灰霉病的防控研究

发布时间：2020-06-19 13:43

【摘要】：灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)是引起多种植物真菌病害的病原菌,对作物的产量和质量影响很大。在葡萄贮藏期,每年因灰霉病造成的损失达到20%-30%。当前化学药剂的使用作为防治葡萄灰霉病的主要方法,不合理施用使环境产生大量的污染,农药残留也影响着人们的身体健康。随着植物病害生物防治研究日趋深入,大量生防菌和其代谢产物被筛选。具有抗逆性强、无毒无害等优点的生防菌日渐得到人们的认可和接受。已有报道利用木霉菌和啶酰菌可以较好地控制番茄、烟草等作物的灰霉病。然而有关利用生防芽孢杆菌控制葡萄灰霉病的研究相对较少。芽孢杆菌作为防治植物病害的生防菌,是一类具有重要经济价值的细菌,为农业可持续发展提供理论依据。因此,本研究通过采集我国新疆、山东、河北昌黎等葡萄园中葡萄根际的土壤,分离芽孢杆菌菌株,与葡萄灰霉病病原菌灰葡萄孢进行对峙培养,获得具有生防效果的芽孢杆菌菌株,并采用形态学观察及分子鉴定的方法,确定芽孢杆菌的分类地位,最后通过生防芽孢杆菌菌粉+微量元素水溶肥联用对设施葡萄灰霉病进行防治,以期获得对寄主植物无害高效的生防细菌菌株。主要取得结果为:(1)分离得到25株芽孢杆菌;通过供试菌株与灰葡萄孢离体的对峙培养,发现HT3、LLong对葡萄灰霉病具有明显的抑制效果,表明HT3和LLong这2株芽孢杆菌可作为防治葡萄灰霉病的潜在拮抗菌株;(2)结合分子鉴定结果,确定HT3菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),LLong菌株为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus);(3)通过田间防治试验,发现枯草芽孢杆菌HT3+微量元素水溶肥混用对葡萄灰霉病的防治效果较好,防效达到85.68%,其次是蜡样芽胞杆菌LLong+微量元素水溶肥联用,防效达到82.07%;与此相比化学药剂腐霉利对葡萄灰霉病的防治效果均低于前两者。本研究为葡萄灰霉病的防治提供科学依据,并为葡萄灰霉病的生防制剂的研发奠定理论基础。
【学位授予单位】：河北科技师范学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S476.1;S436.631.1
【图文】：

图 2-1 4 类芽孢杆菌菌落形态Fig. 2-1 Colony morphology of four types of BacillusA. HT3; B. BO2; C. DY; D. LLong2 不同芽孢杆菌生长曲线测定不同芽孢杆菌菌株在 Bioscreen 全自动生长曲线分析仪中得出：不同菌株在 24-48 h 菌株生长达到稳定期，孢子量达到最大。则选择在 36 h 时与灰葡进行对峙试验（图 2-2，2-3，2-4）。

土壤里分离纯化得到各种不同的芽孢杆菌，根据菌落形态、颜色和菌落，再划线纯化培养，筛选出 20 种芽孢杆菌。如图 2-1 所示四类落（图 2-1）。图 2-1 4 类芽孢杆菌菌落形态Fig. 2-1 Colony morphology of four types of BacillusA. HT3; B. BO2; C. DY; D. LLong同芽孢杆菌生长曲线测定同芽孢杆菌菌株在 Bioscreen 全自动生长曲线分析仪中得出：不同菌4-48 h 菌株生长达到稳定期，孢子量达到最大。则选择在 36 h 时与行对峙试验（图 2-2，2-3，2-4）。

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本文编号：2720871