烟叶残渣固态培养混合菌制备微生物菌肥

发布时间：2020-07-27 16:24

【摘要】：烟草生产过程中会产生约25%的废弃烟叶以及不合格的新鲜烟叶,直接废弃造成资源的极大浪费。本研究以干烟叶或鲜烟叶提取活性成分后的残渣为培养基,研究了细菌A混合菌株和细菌A混合菌株-细菌B-霉菌A混菌固态培养制备菌肥的条件,考察了残留乙醇和萃余液的影响,最终确定了实验室规模的混菌制备工艺。以提取过活性成分的废弃烟叶残渣为培养基,筛选得到能在烟叶固态培养基上生长的细菌A,考察菌株混合时间和混合方式、烟叶原料性质、料层厚度、含水量等因素对固态培养的影响,进行单因素条件优化。得到干烟叶残渣固态培养细菌A菌肥的工艺条件为:500 mL锥形瓶装60 g烟叶残渣,其含水量为饱和含水量58%,接种量10%,培养温度37?C,培养时间11天~12天,芽孢数达10~122 cfu/g以上。以提取过活性成分的废弃烟叶残渣为培养基,筛选得到能在烟叶固态培养基上生长的细菌B和霉菌A。单因素考察三种菌(细菌B、细菌A和霉菌A)的接种比例、培养温度、料层厚度等对混合菌固态培养的影响。得到干烟叶残渣固态培养混菌菌肥的工艺条件:细菌A/细菌B/霉菌A的种子单独培养,按细菌B:细菌A:霉菌A=6:3:1的初始比例接种10%于固态培养基中,室温15℃~25℃,250 mL锥形瓶中装干烟叶35 g(饱和含水量58%),料层厚度3.5 cm。培养10天后,烟叶中每种菌的芽孢均达到10~(11)cfu/g。放大至500 m L,装70 g干烟叶,料层厚度为4.5 cm,室温15℃~20℃,培养10天,烟叶中每种菌的芽孢数均达到10~9 cfu/g。烟叶原料预处理时以乙醇为溶剂,提取活性组分后有萃余液,因而考察了残留乙醇和萃余液添加对混菌固态培养的影响。烟叶残渣中残留的乙醇(1%~3%)抑制三种菌的生长,但在室温(8℃~15℃)时培养8天总芽孢数仍能达到10~6 cfu/g;用50%~60%的萃余液配制培养基,室温(8℃~15℃)混菌培养7天后,细菌A的芽孢数达到10~8 cfu/g;以提取活性组分后的新鲜烟叶残渣为原料进行混菌固态培养,发现该原料更适合细菌A的固态培养,室温(8℃~15℃)培养7天,细菌A芽孢数可达10~9 cfu/g。在不保持湿度的条件下,10 g干燥残渣可制备含水量约50%的湿菌肥约20 g。1吨废弃烟叶经烟碱和香料成分提取后可获得500 kg干燥残渣,可制备湿菌肥(含水量50%)约1吨。
【学位授予单位】：大连理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：TQ446

【参考文献】

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本文编号：2772081