井冈霉素对灰飞虱生殖的抑制作用及机制

发布时间：2020-08-03 18:09

【摘要】：灰飞虱(SBPH)Laodelphax striatellus(Fallen),对中国的水稻、小麦和玉米造成严重危害。抗生素类杀菌剂井冈霉素由于毒性低,残留低,成本低等特点,可以有效防治水稻纹枯病。而在水稻生长期灰飞虱(SBPH)和水稻纹枯病(RSB)总是同时期出现。其中的关键科学问题是井冈霉素如何有效的控制了田间水稻纹枯病同时控制了灰飞虱的种群。本试验通过井冈霉素与对照处理灰飞虱进行蛋白质组学分析,筛选出灰飞虱经井冈霉素处理后下调表达的关键蛋白,以阐明井冈霉素抑制灰飞虱生殖的分子机制,同时为田间精准用药提供了参考依据。1、井冈霉素与对照处理间灰飞虱的比较蛋白质组学分析本试验进行了井冈霉素处理过的灰飞虱蛋白组分析,筛选出井冈霉素处理灰飞虱与对照差异表达的蛋白,以阐明井冈霉素抑制灰飞虱生殖的分子机制,同时揭示井冈霉素喷雾处理抑制灰飞虱生殖的原因。(JGM)井冈霉素处理组vs(Control)对照处理组共分析得到95个显著表达差异蛋白(其中62个上调,33个下调)。并将差异蛋白参照数据库对比注释与富集分析获得关键的生物学信息,挑选出井冈霉素处理(JGM)vs对照(Control)组中和脂肪酸和蛋白质代谢关系密切且显著下调的葡萄糖脱氢酶GDH作为候选蛋白进一步研究。2、干扰葡萄糖脱氢酶基因对灰飞虱生殖的影响根据灰飞虱GDH已知片段序列克隆得到GDH全长序列。分别通过RNAi饲喂dsGDH和井冈霉素喷雾处理灰飞虱雌虫,JGM处理组GDH表达量显著低于Control处理组(↓72%)、Control+dsGDH处理组比Control处理组也显著下降(↓74%)。同时JGM处理组和Control+dsGDH处理组显著影响了灰飞虱雌虫产卵量(分别下降35.7%和48.6%)。生化试验表明井冈霉素处理和dsGDH处理总脂肪和脂肪酸的含量及体重明显比对照的雌虫下降。此外,两个处理的雌虫卵巢解剖均没有观察到明显的卵细胞。
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S433
【图文】：

条形图,条形图,绿色,名称

图２差异蛋白质的条形图。Ｘ轴：比较组的名称；Ｙ轴：差异蛋白数量。红色柱：上调；绿色柱：下调。逡逑逦逦邋逦表邋３．下调蛋白（ＣｏｎｔｒｏｌＶＳＪＧＭ）逦逡逑Ｃｏｖｅ邋Ｕｎｉｑｕｅ逦Ｆｏｌｄ逡逑

进程,蛋白质,基因功能,基础表

４．３定量重复分析逡逑ＣＶ为标准偏差（ＳＤ）与平均值的比值。使用ＣＶ值来评估重现性，ＣＶ越低，重复性逡逑越好（图３）。逡逑ＣＶ邋ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ逡逑：逡逑§：…ｍｅａｎｃｖ邋：邋０．０７７逡逑＿逦１０％：逦０．７６９逡逑２０％邋：邋０．９４０逡逑３０％邋：邋０．９７９逦々逡逑＾逦Ｈ逦４０％邋：邋０．９９２邋－Ｓ邋＼逡逑Ｈ逦５０％邋：邋０．９９６逦茺逡逑ｇ＊逦ｏ逦６０％邋：邋０．９９８逦ｐ逡逑ｔ逦§－逦■逦７０％：逦０．９９９逦１逡逑＇逦８０％邋：邋０．９９９逦。逡逑１逦９０％邋：邋０．９９９邋＿0逡逑１００％：邋１．０００邋＾逡逑＞１００％邋：邋１．０００逡逑Ｉ邋Ｉ逦Ｓ逡逑■邋■逡逑。１邋Ｈ邋ｉｌ邋—卿逦Ｌ０逡逑１０％逦２０％逦３０％逦４０％逦５０％逦６０％逦７０％逦８０％逦９０％逦１００％逦＞１００％逡逑％ｖａｒｔａｔｉｏｎ逡逑图３复制中的ＣＶ分布。Ｘ轴是重复样品的蛋白质比率之间的偏差。Ｙ轴是在某一角度的蛋白质包含逡逑定量蛋白质的百分比。逡逑４．４已鉴定蛋白质ＧＯ注释逡逑为了识别使用ｉＴＲＡＱ技术鉴定的蛋白质的功能，我们进行了基因本体注释。在灰飞逡逑虱样品中鉴定出总共的４７４９个蛋白中，有２３１４个映射到基因功能分类数据库中，对应的逡逑生物进程、细胞组成和分子功能三个项（ｏｎｔｏｌｏｇｙ）分别有１６２４、１１６３和１９９６个蛋白质，逡逑被分到５２个ＧＯ项中，生物进程２２个，细胞组成１６个，分子功能１４个。逡逑蛋白质生物进程分类的基础表明，被注释的蛋白质主要参与细胞进程（２０．５９％），代逡逑谢进程（１９．６２％）

功能分布,分子,部分相关,细胞器

我们发现大多数类别与细胞部分相关（２３．６９％），细胞器（１５．１３％），大分子复合物逡逑（１１．３４％）（图５）。在分子功能的基础上，我们研究中的蛋白质涉及催化活性（４５．０４％），逡逑结合（３９．６８％），结构分子活性（５．５５％）（图６）。逡逑

【参考文献】