球孢白僵菌硫醇/二硫化物氧化还原酶系和两个内吞标志位点蛋白的功能解析
发布时间：2020-12-06 09:46
球孢白僵菌（Beauveria bassiana）是经典的丝状昆虫病原真菌,被广泛用于农林害虫的生物防治。基于球孢白僵菌的制剂在田间应用中常遭受高温、阳光紫外辐射、化学农药等环境因子的胁迫制约,影响其生物防治潜能的发挥。除了环境胁迫因子,生防真菌在进入昆虫体内后还会遭遇到由寄主细胞免疫应答所引起的胁迫。因此,开展白僵菌抗逆生物学研究,揭示抗逆性状的分子基础及其对生防潜能的影响,是合理应用生防真菌制剂防治农林害虫的科学依据。在田间环境及宿主体内双重胁迫作用下真菌细胞不可避免地被活性氧自由基（reactive oxygen species, ROS）损伤。谷氧还蛋白-谷胱甘肽氧化还原酶系（Glutaredoxin-Glutathione Reductase, GRX-GLR）及硫氧还蛋白氧化还原酶系（Thioredoxin-Thioredoxin Reductase,TRX-TRR）是真菌及其重要的抗氧化机制,是抵御ROS损伤含硫生物大分子的主要屏障。然而,这两大抗氧化酶系在昆虫病原性丝状真菌中的生物学功能目前知之不多。因此,研究这两大酶系内部的相互作用及其与超氧化物歧化酶（Superox...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１?ＧＲＸ－ＧＬＲ氧化逐原循环体系．??
ＮＡＤＰＨ??则最终被谷脫甘肤还原酶ＧＬＲ和ＮＡＤＰＨ还原生成??图１．１?ＧＲＸ－ＧＬＲ氧化逐原循环体系．??ＧＳＨ。因此，整个氧化还原循环体系由阶段性的还原?Ｐ．?ｉｉＴｈ?Ｈ?，??Ｆｉｇ．?１．１?Ｔｈｅ?ｒｅｄｏｘ?ｓｙ＾ｅｍ?ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ??ＧＲＸ，?ＧＬＲ?ａｎｄ?ＮＡＤＰＨ?．??型ＧＲＸ、氧化型ＧＲＸ、ＧＳＨ、ＧＬＲ及ＮＡＤＰＨ构成（图??１．１）。??酵母的双硫醇ＧＲＸ酿酒酵母基因组中含有两个同源基因分别编码双硫醇的??ＳｃＧｒｘｌ及ＳｃＧｒｘ２?（Ｌｕｉｋｅｎｈｕｉｓ?ｅ／ａ／．，?１９９８）。尽管序列一致性达６４％，它们仅有部分功??能重叠。从转录调控机制上看，胁迫刺激下的ｇａ／及转录上调分别受到转录因??子Ｍｓｎ２和Ｍｓｎ４的调控（Ｇａｓｄｉ?ｅ／?〇／．，?２０００）。虽然在咕〇２胁迫诱导的ｇｒｘ／及各ｎｒ２表??达水平相似，但在渗透压和热胁巧下的表达量增幅大于ｇｒｘ２。而当茵体生长进??入稳定期后和转录变化则出现相反的趋势（Ｇｒａｎｔ?Ｗ?２０００）〇Ｇｒｘｌ及Ｇｒｘ２??分布枉酵母胞质中
养物抽提液中还原型谷狀甘肋ＧＳＨ和氧化?＃?ＭＯＭ?一ＴＭ句??巧?ｉＪＳＳｊ??型合脫甘肋ＧＳＳＧ的含ｆｉ，其原理如图２．２图２．２ＤＴＮＢ循琳去测定ＧＳＨ含最示意图．??Ｆｉｇ．?２．２?Ａｓｓａｙ?ｏｆ?ａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄ?ＧＳＨ?ｌｅｖｅｌ?ｉｎ??巧不。ＧＳＨ?与一硫代一雅基巧甲酸（ＤＴＮＢ）?ｔｈｅ?ｃｙｃｌｅ?ｒｅａｔｉｏｎ?ｏｆＤＴＮＢ．??反应，生成较稳定黄色的５－硫代二硝基苯甲酸阴离子（ＴＮＢ），在４１２?ｎｍ处测定??其吸收光度则可计算出ＧＳＨ的含ｆｉ（Ｖａｎｄｅｐｉｍｅ?ｅ／?口／．，?１９９４）。谷脫甘化还原巧??（ＧＬＲ）能催化ＧＳＳＧ还原生成ＧＳＨ，通过测定ＧＳＨ的生成Ｓ，可推寡出ＧＳＳＧ??的含?Ｍ（夏亦明．１９９０；Ｔｉｅｔｚｅｅ／口／．，１９６９）。??总谷化甘化含量Ｔ－ＧＳＨ測定将５０?各菌株培养物抽提液与４００?ｎｌ试剂１??２４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]现代杀菌剂抗性研究进展[J]. 祁之秋,王建新,陈长军,周明国. 农药. 2006(10)
[2]具咪唑基杀菌剂的研究开发进展[J]. 王敏,张一宾. 现代农药. 2003(01)
[3]Discovery and demonstration of the teleomorph of Beauve-ria bassiana （Bals.） Vuill.,an important entomogenous fungus[J]. LI Zengzhi, LI Chunru, HUANG Bo & FAN MeizhenResearch Center for Entomogenous Fungi, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China. Chinese Science Bulletin. 2001(09)
[4]球孢白僵菌菌株抗紫外线能力与毒力的关系[J]. 黄长春,汤坚. 森林病虫通讯. 1998(04)
[5]总谷胱甘肽的测定方法[J]. 夏弈明. 营养学报. 1990(01)
本文编号：2901172
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１?ＧＲＸ－ＧＬＲ氧化逐原循环体系．??
ＮＡＤＰＨ??则最终被谷脫甘肤还原酶ＧＬＲ和ＮＡＤＰＨ还原生成??图１．１?ＧＲＸ－ＧＬＲ氧化逐原循环体系．??ＧＳＨ。因此，整个氧化还原循环体系由阶段性的还原?Ｐ．?ｉｉＴｈ?Ｈ?，??Ｆｉｇ．?１．１?Ｔｈｅ?ｒｅｄｏｘ?ｓｙ＾ｅｍ?ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ??ＧＲＸ，?ＧＬＲ?ａｎｄ?ＮＡＤＰＨ?．??型ＧＲＸ、氧化型ＧＲＸ、ＧＳＨ、ＧＬＲ及ＮＡＤＰＨ构成（图??１．１）。??酵母的双硫醇ＧＲＸ酿酒酵母基因组中含有两个同源基因分别编码双硫醇的??ＳｃＧｒｘｌ及ＳｃＧｒｘ２?（Ｌｕｉｋｅｎｈｕｉｓ?ｅ／ａ／．，?１９９８）。尽管序列一致性达６４％，它们仅有部分功??能重叠。从转录调控机制上看，胁迫刺激下的ｇａ／及转录上调分别受到转录因??子Ｍｓｎ２和Ｍｓｎ４的调控（Ｇａｓｄｉ?ｅ／?〇／．，?２０００）。虽然在咕〇２胁迫诱导的ｇｒｘ／及各ｎｒ２表??达水平相似，但在渗透压和热胁巧下的表达量增幅大于ｇｒｘ２。而当茵体生长进??入稳定期后和转录变化则出现相反的趋势（Ｇｒａｎｔ?Ｗ?２０００）〇Ｇｒｘｌ及Ｇｒｘ２??分布枉酵母胞质中
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【参考文献】：
期刊论文
[1]现代杀菌剂抗性研究进展[J]. 祁之秋,王建新,陈长军,周明国. 农药. 2006(10)
[2]具咪唑基杀菌剂的研究开发进展[J]. 王敏,张一宾. 现代农药. 2003(01)
[3]Discovery and demonstration of the teleomorph of Beauve-ria bassiana （Bals.） Vuill.,an important entomogenous fungus[J]. LI Zengzhi, LI Chunru, HUANG Bo & FAN MeizhenResearch Center for Entomogenous Fungi, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China. Chinese Science Bulletin. 2001(09)
[4]球孢白僵菌菌株抗紫外线能力与毒力的关系[J]. 黄长春,汤坚. 森林病虫通讯. 1998(04)
[5]总谷胱甘肽的测定方法[J]. 夏弈明. 营养学报. 1990(01)
本文编号：2901172
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