番茄灰霉病拮抗菌筛选及复合生物海藻液肥研制
发布时间：2021-01-12 22:47
番茄灰霉病菌是由半知菌亚门灰葡萄孢属（Botrytis cinerea）真菌侵染所引起对番茄危害较重的病害,影响果实产量和品质。筛选灰霉病拮抗菌并制备生物菌肥是生物防治植物病害的重要途径。目前,对生物菌肥的研究大多数针对一种拮抗菌,单一菌株的防病效果较复合菌株低,防治效果不理想。鉴此,本研究从宁波番茄保护地健康植株根际土壤筛选出两株对番茄灰霉病菌有高效抑制作用的菌株LM-Y和LM-N,对其进行鉴定,研究复合菌株对番茄灰霉病的抑菌特性及适宜发酵条件,以海藻液为载体制备复合生物海藻肥,通过室内盆栽试验来初步探究海藻菌肥的防病和促生长效果,为生产复合微生物肥料提供依据。主要研究结果如下:1、番茄灰霉病拮抗菌的分离鉴定。采用稀释涂布及平板划线法分离纯化菌株,平板对峙法初筛得到24株对番茄灰霉病菌具有拮抗作用的生防菌。以水稻赤霉病菌和油菜立枯丝核菌为指示菌,复筛选取对两种病原菌均有拮抗作用的菌株最终得到2株高效抑制番茄灰霉病菌的菌株,分别命名为LM-Y和LM-N。结合形态特征、生理生化分析和16srDNA序列构建系统发育树,鉴定LM-Y为解淀粉芽孢杆菌,LM-N为甲基营养型芽孢杆菌。2、拮抗菌株...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１牛肉膏蛋白胨培养基上菌株的菌落形态??Ｆｉｇ．?２－１?Ｃｏｌｏｎｙ?ｆｏｒｍ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｎ?ｂｅｅｆ?ｅｘｔｒａｃｔ?ｐｅｐｔｏｎｅ?ｍｅｄｉｕｍ??
“＋”表示阳性；表示阴性?Ｎｏｔｅ：“＋”ｐｏｓｉｔｉｖｅ；“－”ｎｅｇａｔｉｖｅ。??２．３．２＿３菌株ＬＭ－Ｙ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ序列测定??ＰＣＲ产物凝胶电泳检测菌株ＬＭ－Ｙ产物长度约为１５００ｂｐ左右（图２－３），??扩增片段经测序获知ＬＭ－Ｙ的１６Ｓ?ｒＤＮＡ序列长度为１４２３ｂ?（图２－４），将该序??１８??
列用ＢＬＡＳＴ软件与ＮＣＢＩ数据库中的序列进行同源性比对发现，ＬＭ－Ｙ菌株１６??Ｓ?ｒＤＮＡ序列与解淀粉芽孢杆菌ａ７ｗ＿ｙ／ｏ／每的序列相似度高达９９．??９９％，在建立的系统发育树上（图２－５）也发现ＬＭ－Ｙ菌株与解淀粉芽孢杆菌具有??较高的同源性，遗传距离紧密。结合以上形态学、生理生化特性及１６Ｓ?ｒＤＮＡ分??子生物学鉴定结果，确定ＬＭ－Ｙ属于芽孢杆菌属ｓｐ．）中的解淀粉芽孢杆??菌（加＾／心ａ—／〇％ｗ吻ｃ／ｅｒａ）。该菌株现保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会??普通微生物中心，保藏编号：ＣＧＭＣＣ?Ｎｏ．１３５４２。??１４２３ｂｐ?￣?１４３７ｂｐ??图２－３拮抗细菌１６ＳｒＤＮＡＰＣＲ扩增结果??Ｆｉｇ．?２－３?Ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔｗｏ?ｓｔｒａｉｎｓ??１９??
【参考文献】：
期刊论文
[1]花生侵脉新赤壳菌果腐病生防芽孢杆菌的分离鉴定及防病效果[J]. 孙伟明,时晨,张梦涛,赵丹,陈璇,冯丽娜,罗永松,郭巍,邢单润. 微生物学报. 2018(09)
[2]抗香蕉枯萎病甲基营养型芽孢杆菌的鉴定及定殖[J]. 周登博,陈宇丰,井涛,起登凤,张妙宜,冯仁军,王飞,谢江辉. 中国农学通报. 2017(36)
[3]甲基营养型芽孢杆菌对西瓜枯萎病菌拮抗作用的研究[J]. 殷晓敏,吴琼,金志强. 热带农业科学. 2017(11)
[4]球毛壳菌生物菌肥对核桃苗生长的影响[J]. 王志敏,米士伟,李超,郭君兴,田叶韩,高克祥,何邦令. 林业科技. 2017(05)
[5]印度梨形孢生物菌肥对小白菜增产作用试验初报[J]. 赵建华,杨亚珍. 中国农技推广. 2017(09)
[6]复合微生物肥料对香蕉枯萎病防控作用研究[J]. 汪军,梁昌聪,周游,王国芬,杨腊英,刘磊,黄俊生. 热带农业科学. 2017(08)
[7]生物菌肥在葡萄上的应用效果研究[J]. 宫英振,李敬川,汉瑞峰,张东风,于祎飞,刘俊. 现代农业科技. 2017(14)
[8]生物菌肥对土壤生态环境改良效果[J]. 焦永刚,郭敬华,董灵迪,杨玉波,胡栋,石琳琪. 北方园艺. 2017(13)
[9]叶面喷施γ-聚谷氨酸生物菌肥对葡萄生长发育的影响[J]. 闫可,申海林,邹利人,孙洪华,齐晓光,温景辉. 中外葡萄与葡萄酒. 2017(04)
[10]海藻生物有机肥对冬小麦光合特性的影响[J]. 段友梅,白廷堂,毕建杰. 农技服务. 2017(11)
博士论文
[1]枯草芽孢杆菌菌株RSS-1对油菜菌核病菌的生防作用及其机制研究[D]. 代玉立.安徽农业大学 2015
[2]解淀粉芽孢杆菌C06防治桃褐腐病菌的机制及其产生的γ-多聚谷氨酸在定殖中的作用[D]. 刘俊.南京农业大学 2010
[3]番茄灰霉病菌抗药性及抗药性控制研究[D]. 王芊.东北林业大学 2007
[4]番茄抗灰霉病和晚疫病基因定位及分子标记多基因辅助选育技术研究[D]. 李君明.中国农业科学院 2005
硕士论文
[1]中国海藻养殖的生态系统服务及其价值评价[D]. 吕韩.浙江大学 2017
[2]解淀粉芽孢杆菌EDR4对葡萄霜霉病的生防作用研究[D]. 伏波.西北农林科技大学 2017
[3]铁皮石斛常见真菌病害的鉴定及复合菌剂的应用研究[D]. 李梦娇.云南农业大学 2017
[4]甲基营养型芽孢杆菌NJ13对人参锈腐病的生防作用研究[D]. 李桐.吉林农业大学 2016
[5]解淀粉芽孢杆菌TS-1203抑菌活性物质分析及制剂研制[D]. 侯宝宏.甘肃农业大学 2016
[6]解淀粉芽孢杆菌L3对西瓜的防病促生作用研究[D]. 李成果.南京农业大学 2016
[7]解淀粉芽孢杆菌BP30对梨采后灰霉病病害的生物防治研究[D]. 曲慧.山东农业大学 2016
[8]解淀粉芽胞杆菌Lx-11防治水稻细菌性条斑病的促生、控病机理研究[D]. 戴秀华.南京农业大学 2015
[9]解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵条件优化及对辣椒根腐病防治效果初探[D]. 张雷.东北农业大学 2014
[10]噻呋酰胺和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）NJ-18菌株联合防治稻、麦纹枯病的研究[D]. 卢靖乐.南京农业大学 2013
本文编号：2973689
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１牛肉膏蛋白胨培养基上菌株的菌落形态??Ｆｉｇ．?２－１?Ｃｏｌｏｎｙ?ｆｏｒｍ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｎ?ｂｅｅｆ?ｅｘｔｒａｃｔ?ｐｅｐｔｏｎｅ?ｍｅｄｉｕｍ??
“＋”表示阳性；表示阴性?Ｎｏｔｅ：“＋”ｐｏｓｉｔｉｖｅ；“－”ｎｅｇａｔｉｖｅ。??２．３．２＿３菌株ＬＭ－Ｙ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ序列测定??ＰＣＲ产物凝胶电泳检测菌株ＬＭ－Ｙ产物长度约为１５００ｂｐ左右（图２－３），??扩增片段经测序获知ＬＭ－Ｙ的１６Ｓ?ｒＤＮＡ序列长度为１４２３ｂ?（图２－４），将该序??１８??
列用ＢＬＡＳＴ软件与ＮＣＢＩ数据库中的序列进行同源性比对发现，ＬＭ－Ｙ菌株１６??Ｓ?ｒＤＮＡ序列与解淀粉芽孢杆菌ａ７ｗ＿ｙ／ｏ／每的序列相似度高达９９．??９９％，在建立的系统发育树上（图２－５）也发现ＬＭ－Ｙ菌株与解淀粉芽孢杆菌具有??较高的同源性，遗传距离紧密。结合以上形态学、生理生化特性及１６Ｓ?ｒＤＮＡ分??子生物学鉴定结果，确定ＬＭ－Ｙ属于芽孢杆菌属ｓｐ．）中的解淀粉芽孢杆??菌（加＾／心ａ—／〇％ｗ吻ｃ／ｅｒａ）。该菌株现保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会??普通微生物中心，保藏编号：ＣＧＭＣＣ?Ｎｏ．１３５４２。??１４２３ｂｐ?￣?１４３７ｂｐ??图２－３拮抗细菌１６ＳｒＤＮＡＰＣＲ扩增结果??Ｆｉｇ．?２－３?Ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔｗｏ?ｓｔｒａｉｎｓ??１９??
【参考文献】：
期刊论文
[1]花生侵脉新赤壳菌果腐病生防芽孢杆菌的分离鉴定及防病效果[J]. 孙伟明,时晨,张梦涛,赵丹,陈璇,冯丽娜,罗永松,郭巍,邢单润. 微生物学报. 2018(09)
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[3]甲基营养型芽孢杆菌对西瓜枯萎病菌拮抗作用的研究[J]. 殷晓敏,吴琼,金志强. 热带农业科学. 2017(11)
[4]球毛壳菌生物菌肥对核桃苗生长的影响[J]. 王志敏,米士伟,李超,郭君兴,田叶韩,高克祥,何邦令. 林业科技. 2017(05)
[5]印度梨形孢生物菌肥对小白菜增产作用试验初报[J]. 赵建华,杨亚珍. 中国农技推广. 2017(09)
[6]复合微生物肥料对香蕉枯萎病防控作用研究[J]. 汪军,梁昌聪,周游,王国芬,杨腊英,刘磊,黄俊生. 热带农业科学. 2017(08)
[7]生物菌肥在葡萄上的应用效果研究[J]. 宫英振,李敬川,汉瑞峰,张东风,于祎飞,刘俊. 现代农业科技. 2017(14)
[8]生物菌肥对土壤生态环境改良效果[J]. 焦永刚,郭敬华,董灵迪,杨玉波,胡栋,石琳琪. 北方园艺. 2017(13)
[9]叶面喷施γ-聚谷氨酸生物菌肥对葡萄生长发育的影响[J]. 闫可,申海林,邹利人,孙洪华,齐晓光,温景辉. 中外葡萄与葡萄酒. 2017(04)
[10]海藻生物有机肥对冬小麦光合特性的影响[J]. 段友梅,白廷堂,毕建杰. 农技服务. 2017(11)
博士论文
[1]枯草芽孢杆菌菌株RSS-1对油菜菌核病菌的生防作用及其机制研究[D]. 代玉立.安徽农业大学 2015
[2]解淀粉芽孢杆菌C06防治桃褐腐病菌的机制及其产生的γ-多聚谷氨酸在定殖中的作用[D]. 刘俊.南京农业大学 2010
[3]番茄灰霉病菌抗药性及抗药性控制研究[D]. 王芊.东北林业大学 2007
[4]番茄抗灰霉病和晚疫病基因定位及分子标记多基因辅助选育技术研究[D]. 李君明.中国农业科学院 2005
硕士论文
[1]中国海藻养殖的生态系统服务及其价值评价[D]. 吕韩.浙江大学 2017
[2]解淀粉芽孢杆菌EDR4对葡萄霜霉病的生防作用研究[D]. 伏波.西北农林科技大学 2017
[3]铁皮石斛常见真菌病害的鉴定及复合菌剂的应用研究[D]. 李梦娇.云南农业大学 2017
[4]甲基营养型芽孢杆菌NJ13对人参锈腐病的生防作用研究[D]. 李桐.吉林农业大学 2016
[5]解淀粉芽孢杆菌TS-1203抑菌活性物质分析及制剂研制[D]. 侯宝宏.甘肃农业大学 2016
[6]解淀粉芽孢杆菌L3对西瓜的防病促生作用研究[D]. 李成果.南京农业大学 2016
[7]解淀粉芽孢杆菌BP30对梨采后灰霉病病害的生物防治研究[D]. 曲慧.山东农业大学 2016
[8]解淀粉芽胞杆菌Lx-11防治水稻细菌性条斑病的促生、控病机理研究[D]. 戴秀华.南京农业大学 2015
[9]解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵条件优化及对辣椒根腐病防治效果初探[D]. 张雷.东北农业大学 2014
[10]噻呋酰胺和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）NJ-18菌株联合防治稻、麦纹枯病的研究[D]. 卢靖乐.南京农业大学 2013
本文编号：2973689
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