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源于芒萁的苏云金芽胞杆菌的分离及新型cyt1Aa7基因分析

发布时间:2021-04-18 11:10
  本研究采用醋酸钠-抗生素-热处理的方法,从118份蕨类植物芒萁(Dicranopteris dichotoma)叶面分离到 1 株苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiesis),编号 BRC-HQY1。为了解新菌株的生物学特性,对BRC-HQY1进行形态学和生理生化反应鉴定。该菌株具有Bt的菌落形态特征,30℃培养72 h后显微镜观察,营养体为杆状,所产伴胞晶体为圆形或不规则形。原子力显微镜(AFM)观察显示营养体两端钝圆,表面饱满光滑,周生鞭毛。使用细菌鉴定分析试剂板测定该菌株的生理生化反应,包括糖发酵(蔗糖、甘露糖、葡萄糖)、淀粉水解、乙酰甲基甲醇、脲酶水解、七叶灵利用等指标,发现该菌能利用葡萄糖,能水解淀粉,与乙酰甲基甲醇反应显阴性,与脲酶水解显阳性,能利用七叶灵,能产生精氨酸脱羧酶,与明胶解朊反应阳性。利用10对cry基因通用引物及相应限制性内切酶进行PCR-RFLP检测发现,BRC-HQY1含有cry4Aa、cry4Ba、cry10Aa和cry11Aa 4种亚类基因;利用2对cyt基因特异引物,检测发现该菌株含有cyt1和cyt2共2类基因。SDS-PAGE检测... 

【文章来源】:福建农林大学福建省

【文章页数】:62 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

源于芒萁的苏云金芽胞杆菌的分离及新型cyt1Aa7基因分析


图2.1分离株HQYl菌落形态

源于芒萁的苏云金芽胞杆菌的分离及新型cyt1Aa7基因分析


图5.1?Bt?HQYl??

疏水性,亲水性,蛋白,农林


?福建农林大学硕士学位论文???Gin?(Q)?16?6.43%??Ser?(S)?16?6.43%??Thr?(T)?22?8.83%??Tyr(Y)?7?2.81%??疏水性氨基酸?124?49.81%??Ala?(A)?20?8.03%??Gly?(G)?10?4.02%??lie?(I)?17?6.83%??Leu?(L)?22?8.84%??Met?(M)?6?2.41%??Phe(F)?10?4.02%??Pro?(P)?11?4.42%??Trp?(W)?3?1.20%??Val?(V)?25?10.04%???^?249?100%???::?..:?:?.I??i?ill?■ill??Cys?As??Gil?Gly?Hs?fe?Lys?L〇i?ua?Asn?Pre?Oln?A{g?Sar?Ifr?Vat?Ftp?Tyt??Anno?Add??图5.2?CytlAa7蛋白氨基酸组成??Fig.?5.2?Amino?acid?composition?of?CytlAa7?protein??2.3疏水性分析??利用Bioedit?7.3选择kyte?and?Doolittle?Mean?Hydrophobicity算法进行蛋白质疏水性分析??(图5.3)。CytlAa7蛋白疏水性最小值为-2.333,最大值为1.922。总平均亲水性(GRAVY)??为0.013,是一种亲水性蛋白。??36??


本文编号:3145372

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