基于生化和分子指标评价莠去津对蛋白核小球藻的毒性效应
发布时间:2021-04-22 20:35
农药对藻类毒性效应的常用评价指标是细胞生长,这一指标简单便捷,能综合反应农药对藻细胞的毒性,却不足以反应出某种农药的特异性毒性效应。从生化和分子水平探索新的毒性评价终点,可以更有针对性地评价毒性,建立多层次反应毒性效应的评价体系,深入了解农药对藻类的毒性机制。本文采用细胞生长、生化和分子指标研究了常见农药莠去津对自养和混合营养条件下蛋白核小球藻的毒性效应,分析了农药处理48和72 h后,与抗氧化系统相关的超氧化物歧化酶、过氧化物酶和丙二醛的生化指标,以及与光合作用有关的chlL基因(编码原叶绿素酯还原酶的L亚基)、psbA基因(编码光系统Ⅱ的D1蛋白)和rbcL基因(编码Rubisco酶的大亚基)的变化。实验结果显示,在自养和混合营养条件下莠去津的处理都抑制了蛋白核小球藻的生长。自养条件下在莠去津(0.0、1.0、2.0、3.0 mg/L)处理48和72 h后,胞内抗氧化酶活性和丙二醛的含量不断增加,在3.0 mg/L莠去津处理72 h后,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性分别提高了49.8%和27.3%,丙二醛的含量增加了109.3%;混合营养(加入0.4%葡萄糖)条件下在莠去津(0....
【文章来源】:南京大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:68 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 莠去津概述
1.1.1 莠去津的结构和理化性质
1.1.2 莠去津的使用价值
1.1.3 莠去津的作用机理
1.1.4 环境中莠去津的使用现状
1.1.5 环境中莠去津的危害
1.2 小球藻概述
1.2.1 生物学特征
1.2.2 小球藻的营养价值
1.2.3 在环境科学研究中的价值
1.3 农药对藻类的作用
1.3.1 农药对藻类生长的影响
1.3.2 农药对藻类的生物膜和光合作用的干扰
1.4 实时荧光定量PCR技术
1.4.1 技术原理
1.4.2 实验条件的确定
1.4.3 应用现状与展望
1.5 本课题的研究内容和意义
参考文献
第二章 生化水平上的毒性终点分析
引言
2.1 实验材料与仪器
2.1.1 实验试剂
2.1.3 实验仪器
2.1.4 培养条件
2.2 实验方法
2.2.1 实验设计
2.2.2 藻细胞计数
50值的计算"> 2.2.3 EC50值的计算
2.2.4 藻细胞的收集与破碎
2.2.5 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度
2.2.6 SOD活性的测定
2.2.7 POD活性的测定
2.2.8 MDA含量的变化
2.2.9 数据处理和分析
2.3 实验结果
2.3.1 葡萄糖对蛋白核小球藻生长的影响
2.3.2 莠去津对蛋白核小球藻生长的影响
50值的确定"> 2.3.3 自养和混合营养条件下EC50值的确定
2.3.4 莠去津处理72小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻抗氧化酶活性的变化
2.3.5 莠去津处理72小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻MDA含量的变化
2.3.6 莠去津处理48小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻抗氧化酶活性的变化
2.3.7 莠去津处理48小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻MDA含量的变化
2.4 讨论与结论
参考文献
第三章 分子水平上的毒性终点分析
引言
3.1 实验材料与仪器
3.1.1 实验试剂
3.1.2 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 藻细胞的收集
3.2.2 总RNA的抽提纯化
3.2.3 第一链cDNA的合成
3.2.4 PCR扩增目的基因和内参基因
3.2.5 PCR产物的检验
3.2.6 实时荧光定量PCR分析
3.2.7 基因相对表达丰度的计算
3.2.8 数据处理和分析
3.3 实验结果
3.3.1 莠去津处理72小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻基因表达丰度的变化
3.3.2 莠去津处理48小时,自养条件下蛋白核小球藻基因表达丰度的变化
3.4 讨论与结论
参考文献
论文的创新之处
硕士期间发表的论文
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]溴氟菊酯对环境生物的安全评价研究[J]. 龚瑞忠,陈悦,陈良燕,蔡道基. 农药学学报. 2001(02)
本文编号:3154426
【文章来源】:南京大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:68 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 莠去津概述
1.1.1 莠去津的结构和理化性质
1.1.2 莠去津的使用价值
1.1.3 莠去津的作用机理
1.1.4 环境中莠去津的使用现状
1.1.5 环境中莠去津的危害
1.2 小球藻概述
1.2.1 生物学特征
1.2.2 小球藻的营养价值
1.2.3 在环境科学研究中的价值
1.3 农药对藻类的作用
1.3.1 农药对藻类生长的影响
1.3.2 农药对藻类的生物膜和光合作用的干扰
1.4 实时荧光定量PCR技术
1.4.1 技术原理
1.4.2 实验条件的确定
1.4.3 应用现状与展望
1.5 本课题的研究内容和意义
参考文献
第二章 生化水平上的毒性终点分析
引言
2.1 实验材料与仪器
2.1.1 实验试剂
2.1.3 实验仪器
2.1.4 培养条件
2.2 实验方法
2.2.1 实验设计
2.2.2 藻细胞计数
50值的计算"> 2.2.3 EC50值的计算
2.2.4 藻细胞的收集与破碎
2.2.5 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度
2.2.6 SOD活性的测定
2.2.7 POD活性的测定
2.2.8 MDA含量的变化
2.2.9 数据处理和分析
2.3 实验结果
2.3.1 葡萄糖对蛋白核小球藻生长的影响
2.3.2 莠去津对蛋白核小球藻生长的影响
50值的确定"> 2.3.3 自养和混合营养条件下EC50值的确定
2.3.4 莠去津处理72小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻抗氧化酶活性的变化
2.3.5 莠去津处理72小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻MDA含量的变化
2.3.6 莠去津处理48小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻抗氧化酶活性的变化
2.3.7 莠去津处理48小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻MDA含量的变化
2.4 讨论与结论
参考文献
第三章 分子水平上的毒性终点分析
引言
3.1 实验材料与仪器
3.1.1 实验试剂
3.1.2 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 藻细胞的收集
3.2.2 总RNA的抽提纯化
3.2.3 第一链cDNA的合成
3.2.4 PCR扩增目的基因和内参基因
3.2.5 PCR产物的检验
3.2.6 实时荧光定量PCR分析
3.2.7 基因相对表达丰度的计算
3.2.8 数据处理和分析
3.3 实验结果
3.3.1 莠去津处理72小时,自养和混合营养条件下蛋白核小球藻基因表达丰度的变化
3.3.2 莠去津处理48小时,自养条件下蛋白核小球藻基因表达丰度的变化
3.4 讨论与结论
参考文献
论文的创新之处
硕士期间发表的论文
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]溴氟菊酯对环境生物的安全评价研究[J]. 龚瑞忠,陈悦,陈良燕,蔡道基. 农药学学报. 2001(02)
本文编号:3154426
本文链接:https://www.wllwen.com/kejilunwen/nykj/3154426.html