解磷解钾特异菌株CX-7的筛选及其应用试验研究
发布时间：2021-04-24 03:11
该研究从8个省份的不同类型土壤分离到297株芽孢杆菌，从中筛选到一株解磷、解钾特异菌株，对其解磷解钾效应、抑菌物质的分离、发酵条件及其试验应用效果进行了评价，主要研究成果如下：一、多功效芽孢杆菌的分离和筛选从全国8个省份分离到297株芽孢杆菌，其中89株具有解磷解钾活性，从中筛选解磷解钾强度高的菌株。1、解磷解钾活性定量分析通过液体摇瓶解磷解钾试验，测定89株菌株培养液中水溶性磷和水溶性钾的含量，以胶冻样类芽孢杆菌K-7（ACCC10013）为参比菌株，遴选出解磷解钾活性较高的BY-3、BY-4、CX-7、CX-14、NX-42、NX-43和SS-12菌株，其中CX-7菌株对磷酸三钙和钾长石的分解能力分别为K-7菌株的1.84和2.53倍。2、病原微生物拮抗试验采用平板对峙法测定BY-3、BY-4、CX-7、CX-14、NX-42、NX-43和SS-12菌株及其培养液对小麦、棉花等病原微生物的拮抗作用试验，证实各菌株均具有拮抗的功效，其中CX-7菌株抗菌谱较广，对棉花黄萎病菌（Verticillium dahliae）、棉花立枯病菌（Rhizoctonia solani）、小麦赤霉病菌...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 引言
1 我国的土壤类型
2 我国土壤的磷钾概况
2.1 土壤中磷概况
2.2 土壤中钾概况
3 土壤中微生物的作用
3.1 解磷微生物
3.1.1 解磷微生物的种类及分布
3.1.2 解磷微生物解磷机理研究
3.1.3 解磷微生物解磷能力研究
3.2 解钾微生物
3.2.1 解钾微生物的种类及分布
3.2.2 解钾微生物解钾机理探讨
3.2.3 解钾微生物解钾能力研究
4 土壤微生物、矿物质和土壤酶活力的相互关系
4.1 土壤酶的主要种类及作用
4.2 土壤微生物与土壤酶活性之间的联系
4.3 土壤酶活性与土壤矿质元素含量之间的关系
5 本研究的目的、意义和必要性
第二章 本研究的技术路线
第三章 不同土壤中解磷解钾芽孢杆菌的分离
1 材料
1.1 土样
1.2 培养基
1.2.1 分离培养基（g/L）
1.2.2 NA 斜面培养基和 NB 种子培养基
1.2.3 解钾平板培养基（g/L）
1.2.4 解无机磷平板培养基（g/L）
1.2.5 解有机磷平板培养基（g/L）
1.3 试剂和仪器
1.3.1 试剂
1.3.2 主要仪器
2 方法
2.1 土样采集
2.2 土壤芽孢杆菌的分离方法
2.3 解磷解钾芽孢杆菌的筛选方法
2.4 土样养分含量的测定
3 结果与分析
3.1 土壤养分含量的测定
3.2 土壤中芽孢杆菌的分离及含量测定
3.3 土壤中解磷解钾芽孢杆菌的筛选
3.4 不同土壤中解磷解钾芽孢杆菌比例
4 讨论
第四章 高活性解磷解钾芽孢杆菌的遴选
1 材料
1.1 菌种
1.2 培养基
1.3 试剂和仪器
2 方法
2.1 解磷能力测定试验
2.1.1 磷标准曲线的绘制
2.1.2 供试菌株解磷能力的测定
2.2 芽孢杆菌解钾能力的测定
2.2.1 钾标准曲线的绘制
2.2.2 供试菌株解钾能力的测定
3 结果与分析
4 讨论
第五章 高活性解磷解钾芽孢杆菌病原微生物拮抗试验
1 材料
1.1 菌种
1.2 培养基
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 芽孢杆菌拮抗病原微生物试验
2.2 芽孢杆菌发酵液拮抗病原微生物试验
3 结果与分析
3.1 芽孢杆菌菌株拮抗病原微生物的效果
3.2 芽孢杆菌菌株培养液对病原微生物的拮抗效果
4 讨论
第六章 高活性解磷解钾芽孢杆菌对玉米促生长试验
1 材料
1.1 菌种和种子
1.2 土壤
1.3 主要仪器
2 方法
3 结果与分析
4 讨论
第七章 芽孢杆菌对土壤酶活力及磷钾养分的影响
1 材料
1.1 供试菌株
1.2 试剂
1.3 仪器
2 方法
2.1 玉米盆栽试验
2.2 土壤样品的预处理
2.3 土壤理化性质及酶活性的测定
3 结果与分析
3.1 土壤蔗糖酶活性的测定
3.2 土壤脲酶活性的测定结果
3.3 土壤磷酸酶活性的测定
3.4 土壤过氧化氢酶的测定
3.5 土壤速效磷含量的测定
3.6 土壤速效钾含量的测定
4 讨论
第八章 解磷解钾特异菌株 CX-7 的分类鉴定
1 材料
1.1 菌种
1.2 培养基
1.3 试剂
1.4 仪器
2 方法
2.1 芽孢杆菌 CX-7 菌株的菌落和菌体形态
2.2 芽孢杆菌 CX-7 菌株生理生化反应
2.3 芽孢杆菌 CX-7 菌株 DNA 的提取
2.4 芽孢杆菌 CX-7 菌株 16S rDNA PCR 扩增
2.5 芽孢杆菌 CX-7 菌株 16S rDNA 序列分析及系统发育树
3 结果与分析
3.1 CX-7 芽孢杆菌菌株的菌落和菌体形态观察
3.2 CX-7 芽孢杆菌菌株 16S rDNA PCR 扩增
3.3 CX-7 芽孢杆菌菌株 16S rDNA 序列分析及系统发育树的构建
3.4 生理生化反应
4 讨论
第九章 解磷解钾特异菌株 CX-7 菌株代谢产物分析
1 材料
1.1 菌种
1.2 培养基
1.3 主要试剂
1.4 主要仪器
2 方法
2.1 CX-7 菌株分泌的有机酸的测定
2.2 CX-7 菌株分泌多糖的测定
2.3 CX-7 菌株拮抗物质的定性分析
2.4 CX-7 菌株抗菌蛋白的提取
2.5 CX-7 菌株抗菌蛋白活性测定
2.6 CX-7 菌株抗菌蛋白的性质分析
2.7 CX-7 菌株抗菌蛋白的分离纯化
3 结果与分析
3.1 CX-7 芽孢杆菌菌株产生的有机酸含量测定
3.2 CX-7 菌株产生的多糖的测定
3.3 CX-7 菌株拮抗物质的性质鉴定
3.4 CX-7 菌株抗菌蛋白的提取
3.5 CX-7 菌株抗菌蛋白最适作用温度及对热稳定性
3.6 CX-7 菌株抗菌蛋白最适作用 pH 值及酸碱稳定性
3.7 金属离子对 CX-7 菌株抗菌蛋白的影响
3.8 CX-7 菌株抗菌物质的分离纯化
3.9 抗菌蛋白组分的纯度和分子质量测定
4 讨论
第十章 CX-7 菌株摇瓶发酵条件研究
1 材料
1.1 菌株
1.2 培养基
1.3 试剂
1.4 仪器
2 试验方法
2.1 CX-7 菌株的培养
2.2 CX-7 菌株的生长曲线
2.3 CX-7 菌株生物量和芽孢形成率的测定
2.4 CX-7 菌株单因子试验和正交试验
2.5 CX-7 菌株最佳培养条件的确定
3 结果与分析
3.1 CX-7 菌株的生长曲线
3.2 CX-7 菌株培养基的优化
3.3 发酵条件对 CX-7 菌株芽孢形成率的影响
4 小结
第十一章 CX-7 菌株发酵工艺条件研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果和讨论
2.1 种子对 CX-7 菌株发酵终点和芽孢生物量的影响
2.2 溶氧对 CX-7 菌株生物量的影响
2.3 接种量对 CX-7 菌株生物量的影响
2.4 培养温度对 CX-7 菌株芽孢生物量的影响
3 小结
第十二章 CX-7 菌株的后处理工艺研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果和讨论
2.1 离心工艺参数的研究
2.2 不同辅料品种对菌粉生物量和保质期的影响
2.3 闪蒸干燥工艺参数的确定
3 结论
第十三章 CX-7 菌株在烟草上的田间试验效果
1 材料和方法
1.1 供试菌株
1.2 供试作物
1.3 试验地基本情况
1.4 试验设计
1.5 物候期的调查及观测
1.6 田间管理
2 结果与分析
3 讨论
第十五章 CX-7 菌株在小麦上的田间试验效果
1 材料和方法
1.1 供试菌种
1.2 供试作物
1.3 试验地基本情况
1.4 试验地点
1.5 试验设计
2 结果与分析
3 讨论
第十六章 结论
创新点
参考文献
在读期间发表的论文
作者简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定土壤有效磷的注意事项[J]. 程乐明,陈良,刘建雷,刘松峰,柳听海. 现代农业科技. 2009(03)
[2]乙酸铵浸提——火焰光度计法测定土壤速效钾[J]. 孙兰香. 现代农业科技. 2008(17)
[3]成都市郊区土壤芽孢杆菌的解磷、解钾潜力[J]. 胡容平,邓香洁,龚国淑,唐志燕,张世熔. 四川农业大学学报. 2008(02)
[4]解磷细菌（PSB）解磷机理及应用研究进展[J]. 叶国平,梁锦锋. 安徽农学通报. 2007(09)
[5]油菜内生生防菌BY-2在油菜体内的定殖与对油菜菌核病的防治作用[J]. 江木兰,赵瑞,胡小加,张银波,王国平. 植物病理学报. 2007(02)
[6]解磷微生物及其应用研究综述[J]. 马春浩. 安徽农学通报. 2007(04)
[7]植物根际解磷菌的研究进展[J]. 席琳乔,冯瑞章. 塔里木大学学报. 2006(04)
[8]根际解磷微生物研究进展[J]. 覃丽金,王真辉,陈秋波. 华南热带农业大学学报. 2006(02)
[9]解磷微生物的研究进展[J]. 金术超,杜春梅,平文祥,关洪宇,徐宝兴. 微生物学杂志. 2006(02)
[10]土壤磷酸酶活性对施肥-种植-耕作制度的响应[J]. 沈菊培,陈利军. 土壤通报. 2005(04)
本文编号：3156557
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 引言
1 我国的土壤类型
2 我国土壤的磷钾概况
2.1 土壤中磷概况
2.2 土壤中钾概况
3 土壤中微生物的作用
3.1 解磷微生物
3.1.1 解磷微生物的种类及分布
3.1.2 解磷微生物解磷机理研究
3.1.3 解磷微生物解磷能力研究
3.2 解钾微生物
3.2.1 解钾微生物的种类及分布
3.2.2 解钾微生物解钾机理探讨
3.2.3 解钾微生物解钾能力研究
4 土壤微生物、矿物质和土壤酶活力的相互关系
4.1 土壤酶的主要种类及作用
4.2 土壤微生物与土壤酶活性之间的联系
4.3 土壤酶活性与土壤矿质元素含量之间的关系
5 本研究的目的、意义和必要性
第二章 本研究的技术路线
第三章 不同土壤中解磷解钾芽孢杆菌的分离
1 材料
1.1 土样
1.2 培养基
1.2.1 分离培养基（g/L）
1.2.2 NA 斜面培养基和 NB 种子培养基
1.2.3 解钾平板培养基（g/L）
1.2.4 解无机磷平板培养基（g/L）
1.2.5 解有机磷平板培养基（g/L）
1.3 试剂和仪器
1.3.1 试剂
1.3.2 主要仪器
2 方法
2.1 土样采集
2.2 土壤芽孢杆菌的分离方法
2.3 解磷解钾芽孢杆菌的筛选方法
2.4 土样养分含量的测定
3 结果与分析
3.1 土壤养分含量的测定
3.2 土壤中芽孢杆菌的分离及含量测定
3.3 土壤中解磷解钾芽孢杆菌的筛选
3.4 不同土壤中解磷解钾芽孢杆菌比例
4 讨论
第四章 高活性解磷解钾芽孢杆菌的遴选
1 材料
1.1 菌种
1.2 培养基
1.3 试剂和仪器
2 方法
2.1 解磷能力测定试验
2.1.1 磷标准曲线的绘制
2.1.2 供试菌株解磷能力的测定
2.2 芽孢杆菌解钾能力的测定
2.2.1 钾标准曲线的绘制
2.2.2 供试菌株解钾能力的测定
3 结果与分析
4 讨论
第五章 高活性解磷解钾芽孢杆菌病原微生物拮抗试验
1 材料
1.1 菌种
1.2 培养基
1.3 主要仪器
2 方法
2.1 芽孢杆菌拮抗病原微生物试验
2.2 芽孢杆菌发酵液拮抗病原微生物试验
3 结果与分析
3.1 芽孢杆菌菌株拮抗病原微生物的效果
3.2 芽孢杆菌菌株培养液对病原微生物的拮抗效果
4 讨论
第六章 高活性解磷解钾芽孢杆菌对玉米促生长试验
1 材料
1.1 菌种和种子
1.2 土壤
1.3 主要仪器
2 方法
3 结果与分析
4 讨论
第七章 芽孢杆菌对土壤酶活力及磷钾养分的影响
1 材料
1.1 供试菌株
1.2 试剂
1.3 仪器
2 方法
2.1 玉米盆栽试验
2.2 土壤样品的预处理
2.3 土壤理化性质及酶活性的测定
3 结果与分析
3.1 土壤蔗糖酶活性的测定
3.2 土壤脲酶活性的测定结果
3.3 土壤磷酸酶活性的测定
3.4 土壤过氧化氢酶的测定
3.5 土壤速效磷含量的测定
3.6 土壤速效钾含量的测定
4 讨论
第八章 解磷解钾特异菌株 CX-7 的分类鉴定
1 材料
1.1 菌种
1.2 培养基
1.3 试剂
1.4 仪器
2 方法
2.1 芽孢杆菌 CX-7 菌株的菌落和菌体形态
2.2 芽孢杆菌 CX-7 菌株生理生化反应
2.3 芽孢杆菌 CX-7 菌株 DNA 的提取
2.4 芽孢杆菌 CX-7 菌株 16S rDNA PCR 扩增
2.5 芽孢杆菌 CX-7 菌株 16S rDNA 序列分析及系统发育树
3 结果与分析
3.1 CX-7 芽孢杆菌菌株的菌落和菌体形态观察
3.2 CX-7 芽孢杆菌菌株 16S rDNA PCR 扩增
3.3 CX-7 芽孢杆菌菌株 16S rDNA 序列分析及系统发育树的构建
3.4 生理生化反应
4 讨论
第九章 解磷解钾特异菌株 CX-7 菌株代谢产物分析
1 材料
1.1 菌种
1.2 培养基
1.3 主要试剂
1.4 主要仪器
2 方法
2.1 CX-7 菌株分泌的有机酸的测定
2.2 CX-7 菌株分泌多糖的测定
2.3 CX-7 菌株拮抗物质的定性分析
2.4 CX-7 菌株抗菌蛋白的提取
2.5 CX-7 菌株抗菌蛋白活性测定
2.6 CX-7 菌株抗菌蛋白的性质分析
2.7 CX-7 菌株抗菌蛋白的分离纯化
3 结果与分析
3.1 CX-7 芽孢杆菌菌株产生的有机酸含量测定
3.2 CX-7 菌株产生的多糖的测定
3.3 CX-7 菌株拮抗物质的性质鉴定
3.4 CX-7 菌株抗菌蛋白的提取
3.5 CX-7 菌株抗菌蛋白最适作用温度及对热稳定性
3.6 CX-7 菌株抗菌蛋白最适作用 pH 值及酸碱稳定性
3.7 金属离子对 CX-7 菌株抗菌蛋白的影响
3.8 CX-7 菌株抗菌物质的分离纯化
3.9 抗菌蛋白组分的纯度和分子质量测定
4 讨论
第十章 CX-7 菌株摇瓶发酵条件研究
1 材料
1.1 菌株
1.2 培养基
1.3 试剂
1.4 仪器
2 试验方法
2.1 CX-7 菌株的培养
2.2 CX-7 菌株的生长曲线
2.3 CX-7 菌株生物量和芽孢形成率的测定
2.4 CX-7 菌株单因子试验和正交试验
2.5 CX-7 菌株最佳培养条件的确定
3 结果与分析
3.1 CX-7 菌株的生长曲线
3.2 CX-7 菌株培养基的优化
3.3 发酵条件对 CX-7 菌株芽孢形成率的影响
4 小结
第十一章 CX-7 菌株发酵工艺条件研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果和讨论
2.1 种子对 CX-7 菌株发酵终点和芽孢生物量的影响
2.2 溶氧对 CX-7 菌株生物量的影响
2.3 接种量对 CX-7 菌株生物量的影响
2.4 培养温度对 CX-7 菌株芽孢生物量的影响
3 小结
第十二章 CX-7 菌株的后处理工艺研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果和讨论
2.1 离心工艺参数的研究
2.2 不同辅料品种对菌粉生物量和保质期的影响
2.3 闪蒸干燥工艺参数的确定
3 结论
第十三章 CX-7 菌株在烟草上的田间试验效果
1 材料和方法
1.1 供试菌株
1.2 供试作物
1.3 试验地基本情况
1.4 试验设计
1.5 物候期的调查及观测
1.6 田间管理
2 结果与分析
3 讨论
第十五章 CX-7 菌株在小麦上的田间试验效果
1 材料和方法
1.1 供试菌种
1.2 供试作物
1.3 试验地基本情况
1.4 试验地点
1.5 试验设计
2 结果与分析
3 讨论
第十六章 结论
创新点
参考文献
在读期间发表的论文
作者简介
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定土壤有效磷的注意事项[J]. 程乐明,陈良,刘建雷,刘松峰,柳听海. 现代农业科技. 2009(03)
[2]乙酸铵浸提——火焰光度计法测定土壤速效钾[J]. 孙兰香. 现代农业科技. 2008(17)
[3]成都市郊区土壤芽孢杆菌的解磷、解钾潜力[J]. 胡容平,邓香洁,龚国淑,唐志燕,张世熔. 四川农业大学学报. 2008(02)
[4]解磷细菌（PSB）解磷机理及应用研究进展[J]. 叶国平,梁锦锋. 安徽农学通报. 2007(09)
[5]油菜内生生防菌BY-2在油菜体内的定殖与对油菜菌核病的防治作用[J]. 江木兰,赵瑞,胡小加,张银波,王国平. 植物病理学报. 2007(02)
[6]解磷微生物及其应用研究综述[J]. 马春浩. 安徽农学通报. 2007(04)
[7]植物根际解磷菌的研究进展[J]. 席琳乔,冯瑞章. 塔里木大学学报. 2006(04)
[8]根际解磷微生物研究进展[J]. 覃丽金,王真辉,陈秋波. 华南热带农业大学学报. 2006(02)
[9]解磷微生物的研究进展[J]. 金术超,杜春梅,平文祥,关洪宇,徐宝兴. 微生物学杂志. 2006(02)
[10]土壤磷酸酶活性对施肥-种植-耕作制度的响应[J]. 沈菊培,陈利军. 土壤通报. 2005(04)
本文编号：3156557
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