沙漠土壤拟诺卡氏菌次级代谢产物的研究
发布时间：2021-06-02 21:25
本论文以采自新疆塔克拉玛干沙漠南麓的土壤稀有放线菌拟诺卡氏菌为研究对象,采用大孔吸附树脂和高效液相色谱,建立了空白培养基与菌株发酵次级代谢产物指纹图谱,以此为基础,开展了以下三方面的研究：一、对6株分离自我国新疆特殊生境具有抗金黄色葡萄球菌活性的拟诺卡式菌进行平行发酵,通过相同的处理方法,建立了空白培养基与次级代谢产物对比以及各菌株间对比的指纹图谱,为后续新抗生素发现奠定了基础。二、通过建立指纹图谱,发现产生Amicoumacin的目标菌株R2A14A-1。对菌株进行发酵,从发酵产物中分离纯化得到具有抗金黄色葡萄球菌活性的二氢异香豆素类化合物FFF-13,经过现代波谱分析结合文献比对,确定该化合物为Amicoumacin B,结构如图1所示。通过文献调研发现此化合物确实是首次在拟诺卡氏菌中得到报道。图1Amicoumacin B的化学结构式三、由于本文是首次从拟诺卡氏菌中分离得到Amicoumacin类化合物,为了验证该结论的可靠性,我们对菌株R2A14A-1进行了形态特征,培养特征,最适生长盐浓度,最适生长温度,生理生化特征,16S rRNA序列分析等多方面的研究。研究结果表明：其各...
【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
英文缩略表一览
综述
1、吡喃酮类
2、聚酮类大环内酯化合物
3、肽类化合物
4、吡喃萘醌类化合物
5、其他抗生素类型
总结与展望
中文摘要
Abstract
1 前言
2 实验材料
2.1 主要仪器
2.2 主要试剂
2.3 菌株及培养基
2.3.1 6株具有抗金黄色葡萄球菌拟诺卡氏菌株
2.3.2 沙漠土壤放线菌R2A14A-1
2.3.3 放线菌保存发酵培养基
2.3.4 检定菌(金黄色葡萄球菌)培养基
2.3.5 形态特征观察培养基
2.3.6 鉴定菌
3 具有抗金黄色葡萄球菌活性的拟诺卡氏菌指纹图谱的建立.
3.1 鉴定菌平皿的制备
3.2 实验用拟诺卡氏菌株的活化
3.3 拟诺卡氏菌株的发酵
3.4 大孔吸附树脂的处理
3.5 发酵液的处理
3.6 空白培养基以及发酵产物不同洗脱部分指纹图谱的建立
4 化合物FFF-13的分离鉴定
4.1 对选取的菌株R2A14A-1进行个洗脱部分指纹图谱的再鉴定
4.2 化合物FFF-13的分离纯化
4.3 化合物FFF-13的结构鉴定
5 菌株R2A14A-1的鉴别
5.1 形态特征
5.2 培养特征
5.3 盐浓度及温度耐受实验
5.4 (G+C)mol%含量测定
5.5 菌株R2A14A-1的分子分类
6 指纹图谱结果
6.1 各个菌株的指纹图谱
7 菌株R2A14A-1代谢产物
7.1 菌株R2A14A-1代谢产物指纹图谱及活性追踪
7.2 化合物FFF-13的分离纯化
7.3 化合物FFF-13纯度测定
7.4 化合物FFF-13的结构鉴定
8 菌株R2A14A-1的分类鉴定
8.1 形态特征
8.2 培养特征及耐受实验
8.3 菌株系统发育分析
8.4 (G+C)mol%含量
讨论
参考文献
硕士期间参与发表的文章以及申请的专利
致谢
附表及附图
【参考文献】：
期刊论文
[1]稀有放线菌产生抗菌药物的多样性[J]. 李子强,贾云宏,杨殿深. 中国现代应用药学. 2013(12)
[2]Amicoumacin类抗生素的研究进展[J]. 韩晓艳,刘少伟,王飞飞,刘佳萌,陈川,胡辛欣,蒋忠科,游雪甫,尚广东,张玉彬,孙承航. 国外医药(抗生素分册). 2013(03)
[3]塔克拉玛干沙漠南麓土壤放线菌资源勘探及抗菌活性筛选[J]. 董艳萍,郭琳,旭格拉·哈布丁,刘佳萌,陈川,蒋忠科,李昕,朱霞琳,曹存巍,张玉彬,孙承航. 中国抗生素杂志. 2013(04)
[4]罗布泊来源胀果甘草根际枯草芽孢杆菌GA21次生代谢产物结构与活性初步研究[J]. 靳婧,旭格拉·哈布丁,刘少伟,郭琳,蒋忠科,栾迎春,李展先,潘臻,孙承航. 中国医药生物技术. 2012(01)
[5]塔克拉玛干沙漠腹地胡杨林土壤细菌多样性分析[J]. 包慧芳,王炜,王宁,房世杰,詹发强. 微生物学报. 2011(01)
[6]Chelex-100快速提取放线菌DNA作为PCR扩增模板[J]. 周双清,黄小龙,黄东益,胡新文,陈吉良. 生物技术通报. 2010(02)
[7]塔克拉玛干沙漠腹地梭梭（Haloxylon ammodendron）蒸腾耗水规律[J]. 许浩,张希明,闫海龙,孙红叶,单立山. 生态学报. 2008(08)
[8]稀有放线菌产生的抗生素[J]. 李一青,李艳琼,李铭刚,李勤,赵江源,崔晓龙,彭谦,文孟良. 中国抗生素杂志. 2008(04)
[9]拟诺卡氏菌16S rRNA,gyrB,sod和rpoB基因的系统发育分析[J]. 杨玲玲,职晓阳,李文均. 微生物学报. 2007(06)
[10]沧州高盐环境嗜盐放线菌多样性研究[J]. 吕志堂,张利平,李艳华,石楠,李丽. 河北大学学报(自然科学版). 2006(01)
本文编号：3210779
【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
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英文缩略表一览
综述
1、吡喃酮类
2、聚酮类大环内酯化合物
3、肽类化合物
4、吡喃萘醌类化合物
5、其他抗生素类型
总结与展望
中文摘要
Abstract
1 前言
2 实验材料
2.1 主要仪器
2.2 主要试剂
2.3 菌株及培养基
2.3.1 6株具有抗金黄色葡萄球菌拟诺卡氏菌株
2.3.2 沙漠土壤放线菌R2A14A-1
2.3.3 放线菌保存发酵培养基
2.3.4 检定菌(金黄色葡萄球菌)培养基
2.3.5 形态特征观察培养基
2.3.6 鉴定菌
3 具有抗金黄色葡萄球菌活性的拟诺卡氏菌指纹图谱的建立.
3.1 鉴定菌平皿的制备
3.2 实验用拟诺卡氏菌株的活化
3.3 拟诺卡氏菌株的发酵
3.4 大孔吸附树脂的处理
3.5 发酵液的处理
3.6 空白培养基以及发酵产物不同洗脱部分指纹图谱的建立
4 化合物FFF-13的分离鉴定
4.1 对选取的菌株R2A14A-1进行个洗脱部分指纹图谱的再鉴定
4.2 化合物FFF-13的分离纯化
4.3 化合物FFF-13的结构鉴定
5 菌株R2A14A-1的鉴别
5.1 形态特征
5.2 培养特征
5.3 盐浓度及温度耐受实验
5.4 (G+C)mol%含量测定
5.5 菌株R2A14A-1的分子分类
6 指纹图谱结果
6.1 各个菌株的指纹图谱
7 菌株R2A14A-1代谢产物
7.1 菌株R2A14A-1代谢产物指纹图谱及活性追踪
7.2 化合物FFF-13的分离纯化
7.3 化合物FFF-13纯度测定
7.4 化合物FFF-13的结构鉴定
8 菌株R2A14A-1的分类鉴定
8.1 形态特征
8.2 培养特征及耐受实验
8.3 菌株系统发育分析
8.4 (G+C)mol%含量
讨论
参考文献
硕士期间参与发表的文章以及申请的专利
致谢
附表及附图
【参考文献】：
期刊论文
[1]稀有放线菌产生抗菌药物的多样性[J]. 李子强,贾云宏,杨殿深. 中国现代应用药学. 2013(12)
[2]Amicoumacin类抗生素的研究进展[J]. 韩晓艳,刘少伟,王飞飞,刘佳萌,陈川,胡辛欣,蒋忠科,游雪甫,尚广东,张玉彬,孙承航. 国外医药(抗生素分册). 2013(03)
[3]塔克拉玛干沙漠南麓土壤放线菌资源勘探及抗菌活性筛选[J]. 董艳萍,郭琳,旭格拉·哈布丁,刘佳萌,陈川,蒋忠科,李昕,朱霞琳,曹存巍,张玉彬,孙承航. 中国抗生素杂志. 2013(04)
[4]罗布泊来源胀果甘草根际枯草芽孢杆菌GA21次生代谢产物结构与活性初步研究[J]. 靳婧,旭格拉·哈布丁,刘少伟,郭琳,蒋忠科,栾迎春,李展先,潘臻,孙承航. 中国医药生物技术. 2012(01)
[5]塔克拉玛干沙漠腹地胡杨林土壤细菌多样性分析[J]. 包慧芳,王炜,王宁,房世杰,詹发强. 微生物学报. 2011(01)
[6]Chelex-100快速提取放线菌DNA作为PCR扩增模板[J]. 周双清,黄小龙,黄东益,胡新文,陈吉良. 生物技术通报. 2010(02)
[7]塔克拉玛干沙漠腹地梭梭（Haloxylon ammodendron）蒸腾耗水规律[J]. 许浩,张希明,闫海龙,孙红叶,单立山. 生态学报. 2008(08)
[8]稀有放线菌产生的抗生素[J]. 李一青,李艳琼,李铭刚,李勤,赵江源,崔晓龙,彭谦,文孟良. 中国抗生素杂志. 2008(04)
[9]拟诺卡氏菌16S rRNA,gyrB,sod和rpoB基因的系统发育分析[J]. 杨玲玲,职晓阳,李文均. 微生物学报. 2007(06)
[10]沧州高盐环境嗜盐放线菌多样性研究[J]. 吕志堂,张利平,李艳华,石楠,李丽. 河北大学学报(自然科学版). 2006(01)
本文编号：3210779
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/nykj/3210779.html
