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禾谷镰孢菌转录调控因子FgCrz1A的鉴定和功能研究

发布时间:2021-06-21 21:26
  锌指转录因子Crz1是许多生物体中钙依赖性信号传导途径的重要下游调节因子。Crz1具有C2H2锌指基元,当细胞质中Ca2+浓度升高时,Crz1p受到刺激,与下游基因的启动子区结合调控下游基因转录,来响应外界环境的刺激。目前Crz1在小麦赤霉病病原菌(Fusarium graminearum)中的功能尚不清楚。在这项研究中,我们使用同源重组的方法敲除禾谷镰孢菌的FGSG01341、FGSG06311、FGSG10470、FGSG13711基因,通过Ca2+胁迫筛选出禾谷镰孢菌中Crz1的同源基因FgCrz1A,通过southern杂交确认得到的是阳性单拷贝突变体。缺失突变体ΔFgCrz1A在PDA培养基上表现出菌丝生长速率降低,而且分支增多。ΔFgCrz1A不能产生分生孢子,qRT-PCR检测ΔFgCrz1A在无性生殖过程中的相关基因的转录水平,其中AbaA和WetA的转录水平均有不同程度的降低。ΔFgCrz1A的有性生殖被阻断,不能生成子囊壳,通过qRT-... 

【文章来源】:安徽农业大学安徽省

【文章页数】:66 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

禾谷镰孢菌转录调控因子FgCrz1A的鉴定和功能研究


禾谷镰孢菌中转录因子Crz1的鉴定

菌落形态,菌落,气生菌丝,培养基


PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 在 PDA、CM 和 MM 培养基上的菌落形态图,(b)为菌落直(c)PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 的菌落边缘图。Figure 3 Growth rate and colony edges of PH-1, ΔFgCrz1A and FgCrz1A-Colony morphology of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C on PDA, CM, and MM media, (b) colony dplots; (c) Colony borders of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C.果如图 3-a、b 所示,相较于 PH-1 和 FgCrz1A-C,在三种培养基上ΔFgC速率都严重降低,在 MM 培养基中几乎不能生长,菌落不规则,而A 的气生菌丝非常少。 PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 接在表面覆盖 CM 培养基的玻片,25培养 14h,在显微镜下观察菌落边缘。果如图 3-c,我们发现相较于 PH-1 和 FgCrz1A-C,ΔFgCrz1A 的菌落密,分支多,说明 FgCrz1A 不仅影响禾谷镰孢菌气生菌丝的极性生长长受到抑制后产生更多的分支。们怀疑是否在突变体中存在双核现象,将ΔFgCrz1A 的隔膜和细胞核染光显微镜观察。

菌落形态,菌落,菌落直径,生长速率


图 3 PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 的生长速率和菌落边缘(a)PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 在 PDA、CM 和 MM 培养基上的菌落形态图,(b)为菌落直径图;(c)PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 的菌落边缘图。Figure 3 Growth rate and colony edges of PH-1, ΔFgCrz1A and FgCrz1A-C(a) Colony morphology of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C on PDA, CM, and MM media, (b) colony diameterplots; (c) Colony borders of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C.结果如图 3-a、b 所示,相较于 PH-1 和 FgCrz1A-C,在三种培养基上ΔFgCrz1A的生长速率都严重降低,在 MM 培养基中几乎不能生长,菌落不规则,而且ΔFgCrz1A 的气生菌丝非常少。将 PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 接在表面覆盖 CM 培养基的玻片,25℃恒温保湿培养 14h,在显微镜下观察菌落边缘。结果如图 3-c,我们发现相较于 PH-1 和 FgCrz1A-C,ΔFgCrz1A 的菌落边缘非常致密,分支多,说明 FgCrz1A 不仅影响禾谷镰孢菌气生菌丝的极性生长,在极性生长受到抑制后产生更多的分支。

【参考文献】:
博士论文
[1]禾谷镰刀菌KIN1激酶的隔膜孔定位及功能[D]. 罗永平.西北农林科技大学 2014

硕士论文
[1]转录因子Crz1p调控光滑球拟酵母应答酸胁迫的生理机制[D]. 闫冬妮.江南大学 2016



本文编号:3241433

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