转录因子Clp在产酶溶杆菌抗菌次级代谢产物合成中的功能研究
发布时间：2021-08-19 07:34
产酶溶杆菌OH11 （Lysobacter enzymogenes OH11）是本实验室从辣椒根际土壤中分离到的一株新型生防细菌。该菌属于黄单胞科,溶杆菌属,GC含量较高,并具有滑行能力。OH11能产生多种胞外酶,对多种植物病原菌均有较强的抑制能力,具有十分广阔的应用前景。本文的宗旨是研究与产酶溶杆菌OH11生防相关的次级代谢产物及surface motility的调控网络。几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶的功能已有文献报道。在本文中,我们通过基因敲除的方法,研究了产酶溶杆菌中另外两种重要胞外酶α-水解蛋白酶与纤维素酶的功能。平板拮抗实验显示,这两种胞外酶编码基因的缺失均不影响产酶溶杆菌OH11对病原菌的拮抗能力。这些结果表明,这两种胞外酶均不是OH11拮抗病原菌所必需的。热稳定抗真菌因子HSAF （heat-stable antifungal factor）是最近被报道的一种次级代谢产物。在产酶溶杆菌OH11中,我们构建了pks-nrps缺失突变株△pks。与野生型OH11相比,△pks失去了对病原菌的抑制能力,HSAF产量也显著降低。此外,从野生型OH11中提取的HSAF能抑制病原菌...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：143 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１溶杆菌属细菌在相差显微镜下的形态??Ｆｉｇ．?１－１?Ｐｈａｓｅ?ｃｏｎｔｒａｓｔ?ｐｈｏｔｏｍｉｃｒｏｇｒａｐｈｓ?ｏｆ?始ｒ．?（ａ），（ｂ），ａｎｄ?（ｄ）?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?Ｌ?幻灼说？／〇化：Ｗ?ｓｔｒａｉｎ??
?在固体培养基表面，由于溶巧菌具有滑行能力，因此该菌的菌落经常呈现出散布??或泳动状态，菌落较薄而面积较大（图１－２，１－３）（艮ｅｉｃｈｅｎｂａ浊，２００６）。??＇?＊．?＜?Ｋ?一?叫＂＂巧??歡遠编??巧巧峡．＇識￣Ｔ—．．．猶；??图１－２溶杆菌属细菌菌落??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?Ｌｙｓｏｂａｃｔｅｒ?ｃｏｌｏｎｙ．?Ｂａｒｓ＝ｌ?ｍｍ．?（ａ），?（ｂ），?ａｎｄ?（ｃ）?Ｌ?ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｕｓ?ｓｔｒａｉｎ?ＵＡＳＭ?Ｌ１７?ｇｒｏｗ＾ｎ?ｏｎ??ｄｉ瓶ｉ＾ｅｎｔ?ｍｅｄｉａ?ｆｏｒ?７?ｄ巧ｓ?ａｔ?２ＣＴＣ：?（ａ），?ｏｎ?ＣＡ２?ａｇａｒ?（０．０７５％?ＫＮ０３，?１％?ｇｌｕｃｏｓｅ）；化），ｏｎ?ＭＹＸ?ａｇａｒ??（０．５〇／〇?Ｎａ?呂ｌｕｔａｍａｔｅ，?０．１％?ｙｅａｓｔ?ｅｘｔｒａｃｔ，?０．２〇／〇?ｇｌｕｃｏｓｅ）；?ａｎｄ?（ｃ），ｏｎ?ＣＹ?ａｇａｒ，?（ｄ）?ａｎｄ?（ｅ）?ｔｈｅ??ｃｈｉｔｉｎｏｃｌａｓｔｉｃ?ｓｔｒａｉｎ?（ＮＣＩＢ?８５０１）?ｏｆ?Ｖｅｌｄｋａｍｐ?（１９５５）：?（ｄ）?ｇｒｏｗｎ?ｏｎ?ＣＡ２?ａｇａｒ；?（ｅ）?ｇｒｏｗｎ?ｏｎ?仁Ｙ?ａｇａｒ；??ｂｏ?化?７?ｄａｙｓ?ｏｌｄ?（２（ＴＣ）．?（ｆ）?Ｉ．?ｅｗｑ’ｗｏ各ｅ?旅ｓｓｔｒａｉｎ?ＵＡＳＭ?４％?ｇｒｏｗｎ?ｏｎ?ＣＡ２?ａｇａｒ?ｆｏｒ?７?ｄａｙｓ?ａｔ?２（ＴＣ．?Ｉｎ??ａｌｌ?ｃａｓｅｓ
菌株ＯＨｌｌ直到２１世纪初才被报道。姜英华等人从作物根际筛选分离生防菌时，??从１０５６株细菌中筛选到７株具有生物防效的细菌。分子生物学鉴定结果发现，其中??有一株属于产酶溶杆菌，命名为ＯＨ１１?（图１－５）（姜英华ｅｔａｌ．，２００巧。??Ｉ?Ｆｌａｖｏｈｉｃｉａｉｕｎｉ?ｍｉｚｕＵ＂化加?ＤＳＭＨＴＷ??????如ｈｉｎｇｏｈｃｌｃｒｉｕｍ?ｍｕｌｔｉｖｏｎｉｍ?＜ＡＢ０２０２０５＞??Ｌｙｓｏｂｆｋｒｌ＂?ｎｗｙｍｏ护ｎｅｓ?ＤＳＭ２０４＂?｛ＡＪ巧Ｍ９。??Ｌｙｗｂａｃ析巧—Ｓｈｉｉ？ｈＵ＂？ｈ３?（ＡＩＭ?２１７７４）??ｇｊｉｔ?〇ｍｉ（ＡＶＷ７５２９？??＾?Ｌｙｓｏｂｅｃｔｃｒ?ｅｎｚｙｎｗｇｅｔｉｅｓ?ｓｐ．?Ｃ３?（ＡＹ０７４７９３）??。―?ＬｙｗｌｎｅＫｒ?ｅｎｚｙｍｏｇｅｎｅｓ?ＩＰ．Ｎ４－７?…巧９乂
【参考文献】：
期刊论文
[1]产酶溶杆菌OH11菌株胞外酶调控相关基因ctp的克隆及功能的初步分析[J]. 蒋淑贞,钱国良,刘轶儒,范加勤,胡白石,刘凤权. 中国生物防治学报. 2011(01)
[2]Identification and Characterization of Lysobacter enzymogenes as a Biological Control Agent Against Some Fungal Pathogens[J]. QIAN Guo-liang,HU Bai-shi,JIANG Ying-hua and LIU Feng-quan Department of Plant Pathology,College of Plant Protection,Nanjing Agricultural University/Key Laboratory of Monitoring and Management of Crop Diseases and Pest Insects,Ministry of Agriculture,Nanjing 210095,P.R.China. Agricultural Sciences in China. 2009(01)
[3]产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达[J]. 朱慧,王云霞,胡白石,刘凤权. 江苏农业学报. 2008(02)
[4]产酶溶杆菌OH11菌株几丁质酶基因的克隆与表达[J]. 朱慧,王云霞,胡白石,刘凤权. 南京农业大学学报. 2008(01)
[5]产酶溶杆菌OH11菌株α-水解蛋白酶基因的克隆与表达[J]. 朱慧,王云霞,胡白石,刘凤权. 中国生物防治. 2007(04)
[6]植物土传病原菌拮抗细菌的筛选与鉴定[J]. 姜英华,胡白石,刘凤权. 中国生物防治. 2005(04)
[7]纤维素酶的研究进展[J]. 宋波,邓晓皋,施雷霆. 上海环境科学. 2003(07)
硕士论文
[1]结核分枝杆菌新型转录因子的筛选与鉴定[D]. 郭曼曼.华中农业大学 2009
[2]一种新型生防菌菌株OH11的鉴定和生防效果研究[D]. 姜英华.南京农业大学 2006
本文编号：3350997
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：143 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１溶杆菌属细菌在相差显微镜下的形态??Ｆｉｇ．?１－１?Ｐｈａｓｅ?ｃｏｎｔｒａｓｔ?ｐｈｏｔｏｍｉｃｒｏｇｒａｐｈｓ?ｏｆ?始ｒ．?（ａ），（ｂ），ａｎｄ?（ｄ）?ｉｎｄｉｃａｔｅｓ?Ｌ?幻灼说？／〇化：Ｗ?ｓｔｒａｉｎ??
?在固体培养基表面，由于溶巧菌具有滑行能力，因此该菌的菌落经常呈现出散布??或泳动状态，菌落较薄而面积较大（图１－２，１－３）（艮ｅｉｃｈｅｎｂａ浊，２００６）。??＇?＊．?＜?Ｋ?一?叫＂＂巧??歡遠编??巧巧峡．＇識￣Ｔ—．．．猶；??图１－２溶杆菌属细菌菌落??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?Ｌｙｓｏｂａｃｔｅｒ?ｃｏｌｏｎｙ．?Ｂａｒｓ＝ｌ?ｍｍ．?（ａ），?（ｂ），?ａｎｄ?（ｃ）?Ｌ?ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｕｓ?ｓｔｒａｉｎ?ＵＡＳＭ?Ｌ１７?ｇｒｏｗ＾ｎ?ｏｎ??ｄｉ瓶ｉ＾ｅｎｔ?ｍｅｄｉａ?ｆｏｒ?７?ｄ巧ｓ?ａｔ?２ＣＴＣ：?（ａ），?ｏｎ?ＣＡ２?ａｇａｒ?（０．０７５％?ＫＮ０３，?１％?ｇｌｕｃｏｓｅ）；化），ｏｎ?ＭＹＸ?ａｇａｒ??（０．５〇／〇?Ｎａ?呂ｌｕｔａｍａｔｅ，?０．１％?ｙｅａｓｔ?ｅｘｔｒａｃｔ，?０．２〇／〇?ｇｌｕｃｏｓｅ）；?ａｎｄ?（ｃ），ｏｎ?ＣＹ?ａｇａｒ，?（ｄ）?ａｎｄ?（ｅ）?ｔｈｅ??ｃｈｉｔｉｎｏｃｌａｓｔｉｃ?ｓｔｒａｉｎ?（ＮＣＩＢ?８５０１）?ｏｆ?Ｖｅｌｄｋａｍｐ?（１９５５）：?（ｄ）?ｇｒｏｗｎ?ｏｎ?ＣＡ２?ａｇａｒ；?（ｅ）?ｇｒｏｗｎ?ｏｎ?仁Ｙ?ａｇａｒ；??ｂｏ?化?７?ｄａｙｓ?ｏｌｄ?（２（ＴＣ）．?（ｆ）?Ｉ．?ｅｗｑ’ｗｏ各ｅ?旅ｓｓｔｒａｉｎ?ＵＡＳＭ?４％?ｇｒｏｗｎ?ｏｎ?ＣＡ２?ａｇａｒ?ｆｏｒ?７?ｄａｙｓ?ａｔ?２（ＴＣ．?Ｉｎ??ａｌｌ?ｃａｓｅｓ
菌株ＯＨｌｌ直到２１世纪初才被报道。姜英华等人从作物根际筛选分离生防菌时，??从１０５６株细菌中筛选到７株具有生物防效的细菌。分子生物学鉴定结果发现，其中??有一株属于产酶溶杆菌，命名为ＯＨ１１?（图１－５）（姜英华ｅｔａｌ．，２００巧。??Ｉ?Ｆｌａｖｏｈｉｃｉａｉｕｎｉ?ｍｉｚｕＵ＂化加?ＤＳＭＨＴＷ??????如ｈｉｎｇｏｈｃｌｃｒｉｕｍ?ｍｕｌｔｉｖｏｎｉｍ?＜ＡＢ０２０２０５＞??Ｌｙｓｏｂｆｋｒｌ＂?ｎｗｙｍｏ护ｎｅｓ?ＤＳＭ２０４＂?｛ＡＪ巧Ｍ９。??Ｌｙｗｂａｃ析巧—Ｓｈｉｉ？ｈＵ＂？ｈ３?（ＡＩＭ?２１７７４）??ｇｊｉｔ?〇ｍｉ（ＡＶＷ７５２９？??＾?Ｌｙｓｏｂｅｃｔｃｒ?ｅｎｚｙｎｗｇｅｔｉｅｓ?ｓｐ．?Ｃ３?（ＡＹ０７４７９３）??。―?ＬｙｗｌｎｅＫｒ?ｅｎｚｙｍｏｇｅｎｅｓ?ＩＰ．Ｎ４－７?…巧９乂
【参考文献】：
期刊论文
[1]产酶溶杆菌OH11菌株胞外酶调控相关基因ctp的克隆及功能的初步分析[J]. 蒋淑贞,钱国良,刘轶儒,范加勤,胡白石,刘凤权. 中国生物防治学报. 2011(01)
[2]Identification and Characterization of Lysobacter enzymogenes as a Biological Control Agent Against Some Fungal Pathogens[J]. QIAN Guo-liang,HU Bai-shi,JIANG Ying-hua and LIU Feng-quan Department of Plant Pathology,College of Plant Protection,Nanjing Agricultural University/Key Laboratory of Monitoring and Management of Crop Diseases and Pest Insects,Ministry of Agriculture,Nanjing 210095,P.R.China. Agricultural Sciences in China. 2009(01)
[3]产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达[J]. 朱慧,王云霞,胡白石,刘凤权. 江苏农业学报. 2008(02)
[4]产酶溶杆菌OH11菌株几丁质酶基因的克隆与表达[J]. 朱慧,王云霞,胡白石,刘凤权. 南京农业大学学报. 2008(01)
[5]产酶溶杆菌OH11菌株α-水解蛋白酶基因的克隆与表达[J]. 朱慧,王云霞,胡白石,刘凤权. 中国生物防治. 2007(04)
[6]植物土传病原菌拮抗细菌的筛选与鉴定[J]. 姜英华,胡白石,刘凤权. 中国生物防治. 2005(04)
[7]纤维素酶的研究进展[J]. 宋波,邓晓皋,施雷霆. 上海环境科学. 2003(07)
硕士论文
[1]结核分枝杆菌新型转录因子的筛选与鉴定[D]. 郭曼曼.华中农业大学 2009
[2]一种新型生防菌菌株OH11的鉴定和生防效果研究[D]. 姜英华.南京农业大学 2006
本文编号：3350997
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