丛枝菌根真菌14-3-3蛋白在共生信号传导以及非生物胁迫反应的作用研究
发布时间：2021-11-04 21:46
丛枝菌根（AM）真菌是一种土传真菌,属于古老的球囊菌门,是丛枝菌根的重要共生体,增强植物养分的获取和对各种非生物逆境的抗性的重要来源。与其显著的生理意义相反,所涉及的分子基础尚不清楚,主要是由于它们的专性生物营养和复杂的遗传学。14-3-3蛋白是一种高度保守的蛋白质家族,它广泛存在于真核细胞中,14-3-3的同源或异源二聚体可以通过与其它蛋白质相互作用参与真核生物的信号传导和代谢活性。本实验以摩西球囊霉（Funneliformis mosseae）的Fm201 EST Tag为起点,分别从摩西球囊霉（Funneliformis mosseae）和根内球囊霉（Rhizophagus irregularis）中分离和鉴定了三个编码丛枝菌根真菌14-3-3 like蛋白的编码基因,并分别命名为Fm201,Ri14-3-3和Ri BMH2。通过荧光定量分析,发现Fm201,Ri14-3-3和Ri RMH2的表达量在前共生（孢子萌发）和共生阶段（附着胞形成,根内菌丝形成,丛枝形成时期）中都出现了明显的激增。因为缺乏有效的丛枝菌根真菌转化系统,为了Fm201,Ri14-3-3和Ri BMH2基因编...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
丛枝菌根的形成过程
图 2. 丛枝菌根真菌接受宿主信号的反应通路模式图Fig. 2 Abasic model of the AM fungi responses to the host signalsBrechenmar 等（2004）利用摩西球囊霉（Funneliformis mosseae）和荷兰芹（Petroselinum crispum）的共培养体系，构建抑制差减杂交文库研究附着胞形成时期真菌的基因表达差异，并推测其中有大约 200 个克隆是菌根共生体特异性的新基因，其中部分基因可能参与共生过程中钙信号调控途径(Magadalene and Natalia, 2004)。其中一个编号为 201 的 EST 序列，可能编码一个 14-3-3-like 蛋白。此外，Porcel R等人(2006) 研究了在干旱环境下丛枝菌根真菌 R.irregularis 中 14-3-3 基因，并检测了该基因共生时期的差异表达，推测丛枝菌根真菌可以通过调节该基因的表达，调节宿主植物的抗逆性反应(Porcel et al., 2006)。Helber 等人（2008）在丛枝菌根真菌的转化方面做了一个有意思的实验。通过基因枪、根癌农杆菌介导等方法将带有丛枝菌根真菌基因的启动子的外源报告基因GFP 和红色荧光蛋白 DsRed 转化到丛枝菌根真菌中，并在丛枝菌根真菌里面观测荧
图 3 gateway 技术示意图Fig. 3 Gateway Technology1.4 14-3-3 蛋白家族介绍14-3-3 蛋白是一类高度保守、分布十分广泛的多功能真核生物蛋白质，最初源于 20世纪 60 年代对哺乳动物脑蛋白进行的分类研究(van Hemert et al., 2001a)。该蛋白有着多种亚型，模式生物拟南芥中含有 15 种亚型(Rosenquist et al., 2001)。这些亚型常以同源或者异源二聚体的形式存在，通过与磷酸化的蛋白质相互作用，参与调节信号转导、细胞代谢、离子转运、细胞凋亡、细胞周期等生命活动过程(H., 2009)。X 射线晶体图 4 14-3-3 蛋白 3D 结构示意图Fig. 4 14-3-3 protein 3D structure
【参考文献】：
期刊论文
[1]基因表达与mRNA结构的关系[J]. 王晓凤,辛秀娟. 中国比较医学杂志. 2010(06)
[2]真核生物mRNA 3′非翻译区的功能[J]. 王海震,王莹,刘定干. 生物化学与生物物理进展. 2008(09)
[3]AM真菌DNA的提取与PCR-DGGE分析[J]. 龙良鲲,羊宋贞,姚青,朱红惠. 菌物学报. 2005(04)
[4]类黄酮对AM真菌及宿主植物的影响研究[J]. 董昌金,周盈,赵斌. 菌物学报. 2004(02)
本文编号：3476468
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
丛枝菌根的形成过程
图 2. 丛枝菌根真菌接受宿主信号的反应通路模式图Fig. 2 Abasic model of the AM fungi responses to the host signalsBrechenmar 等（2004）利用摩西球囊霉（Funneliformis mosseae）和荷兰芹（Petroselinum crispum）的共培养体系，构建抑制差减杂交文库研究附着胞形成时期真菌的基因表达差异，并推测其中有大约 200 个克隆是菌根共生体特异性的新基因，其中部分基因可能参与共生过程中钙信号调控途径(Magadalene and Natalia, 2004)。其中一个编号为 201 的 EST 序列，可能编码一个 14-3-3-like 蛋白。此外，Porcel R等人(2006) 研究了在干旱环境下丛枝菌根真菌 R.irregularis 中 14-3-3 基因，并检测了该基因共生时期的差异表达，推测丛枝菌根真菌可以通过调节该基因的表达，调节宿主植物的抗逆性反应(Porcel et al., 2006)。Helber 等人（2008）在丛枝菌根真菌的转化方面做了一个有意思的实验。通过基因枪、根癌农杆菌介导等方法将带有丛枝菌根真菌基因的启动子的外源报告基因GFP 和红色荧光蛋白 DsRed 转化到丛枝菌根真菌中，并在丛枝菌根真菌里面观测荧
图 3 gateway 技术示意图Fig. 3 Gateway Technology1.4 14-3-3 蛋白家族介绍14-3-3 蛋白是一类高度保守、分布十分广泛的多功能真核生物蛋白质，最初源于 20世纪 60 年代对哺乳动物脑蛋白进行的分类研究(van Hemert et al., 2001a)。该蛋白有着多种亚型，模式生物拟南芥中含有 15 种亚型(Rosenquist et al., 2001)。这些亚型常以同源或者异源二聚体的形式存在，通过与磷酸化的蛋白质相互作用，参与调节信号转导、细胞代谢、离子转运、细胞凋亡、细胞周期等生命活动过程(H., 2009)。X 射线晶体图 4 14-3-3 蛋白 3D 结构示意图Fig. 4 14-3-3 protein 3D structure
【参考文献】：
期刊论文
[1]基因表达与mRNA结构的关系[J]. 王晓凤,辛秀娟. 中国比较医学杂志. 2010(06)
[2]真核生物mRNA 3′非翻译区的功能[J]. 王海震,王莹,刘定干. 生物化学与生物物理进展. 2008(09)
[3]AM真菌DNA的提取与PCR-DGGE分析[J]. 龙良鲲,羊宋贞,姚青,朱红惠. 菌物学报. 2005(04)
[4]类黄酮对AM真菌及宿主植物的影响研究[J]. 董昌金,周盈,赵斌. 菌物学报. 2004(02)
本文编号：3476468
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