转基因抗病烟草和连作甘蓝对根际土壤微生态的影响分析

发布时间：2021-12-19 09:55

　　本研究以转Psc-AFP基因抗病烟草(T-PA)、转LJAMP2基因抗病烟草(T-Lj)、野生型亲本烟草(WT)和转空载质粒烟草(T-Vi)根围土样为研究对象,研究烟草根际土壤可培养微生物数目、土壤酶活性、理化性质和细菌群落多样性的变化。同时,还探讨了连作2年、10年和15年甘蓝根围土壤微生物的变化。其研究结果如下:1.转抗病基因烟草对土壤微生态的影响1.1转抗病基因烟草对土壤可培养微生物数量、土壤酶活和理化性质的影响(1)转抗病烟草对土壤可培养微生物的影响根际土壤微生物数量随着烟草的生长发育而变化,在旺长期或者成熟期达到最大。同一时期不同处理烟草微生物数量有所不同。前三个时期,T-PA抗病烟草与WT烟草比较,细菌、真菌和放线菌的数量均未达到显著性差异,只在成熟期达显著性差异;T-Lj抗病烟草在旺长期达到显著性差异,其他三个时期差异不大。表明T-PA、T-Lj抗病烟草对根际土壤可培养微生物数量具有影响,但是这种影响并不是持续不变的,会随着生长发育的不同而发生改变。.(2)T-PA抗病烟草对根际土壤酶活性的影响过氧化氢酶、蔗糖酶、酸性磷酸酶和脲酶随着烟草的生长发育时期不同而变化,在同一生...

【文章来源】： 西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：82 页

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 转基因植物的发展概况
        1.1.1 转基因技术
        1.1.2 转基因作物种植现状
        1.1.3 转补骨脂植物的研究进展
        1.1.4 转LJAMP2植物的研究进展
    1.2 转基因植物的安全性研究
    1.3 转基因植物对土壤生态系统的影响
        1.3.1 GM植物对土壤理化性质的影响
        1.3.2 GM植物对土壤酶活性的影响
        1.3.3 GM植物对土壤微生物的影响
    1.4 植物连作障碍
    1.5 连作植物对土壤生态系统的影响
    1.6 土壤微生物多样性研究方法
        1.6.1 微生物平板培养法
        1.6.2 Biolog微平板法
        1.6.3 磷脂脂肪酸方法
        1.6.4 单链构象多态性
        1.6.5 变性梯度凝胶电泳
2 引言
    2.1 论文立题依据
    2.2 论文技术路线
    2.3 研究内容及目的意义
        2.3.1 研究内容
        2.3.2 研究目的及意义
3 转Psc-AFP抗病烟草不同生长期对根际土壤环境的影响
    3.1 试验材料
        3.1.1 烟草的种植
        3.1.2 土壤的采集与保存
    3.2 实验方法
        3.2.1 烟草根际土壤微生物数量的测定
        3.2.2 烟草根际土壤酶活的测定
        3.2.3 烟草根际土壤理化性质的测定
        3.2.4 数据处理
    3.3 实验结果与分析
        3.3.1 微生物数量的变化
        3.3.2 土壤酶活性变化
        3.3.3 土壤理化性质变化
    3.4 讨论
    3.5 小结
4 PCR-DGGE分析转Psc-AFP抗病烟草根际土壤细菌多样性
    4.1 实验方法
        4.1.1 土壤微生物总DNA的提取
        4.1.2 土壤细菌16S rRNA基因的PCR扩增
        4.1.3 变性梯度凝胶电泳DGGE
        4.1.4 染色
        4.1.5 DGGE条带回收DNA片段并扩增
        4.1.6 16S rRNA V3区基因片段克隆
        4.1.7 16S rRNA V3区基因片段(阳性克隆)序列测定
        4.1.8 数据分析
    4.2 实验结果与分析
        4.2.1 土壤微生物总DNA的检测
        4.2.2 细菌16S rRNA V3基因的PCR扩增
        4.2.3 DGGE图谱及特异条带回收
        4.2.4 DGGE图谱相关统计分析
    4.3 讨论
    4.4 小结
5 PCR-SSCP分析转LJAMP2抗病烟草对土壤微生物的影响
    5.1 实验材料
    5.2 实验方法
        5.2.1 烟草根际土壤微生物数量的测定
        5.2.2 土壤微生物总DNA的提取
        5.2.3 细菌16S rRNA及V3区基因的PCR扩增及检测
        5.2.4 单链构象多态性(SSCP)
    5.3 实验结果与分析
        5.3.1 土壤微生物数量的测定
        5.3.2 PCR-SSCP图谱相关分析
    5.4 讨论
    5.5 小结
6 PCR-DGGE分析武隆甘蓝连作根际土壤细菌多样性变化
    6.1 研究材料
    6.2 实验结果和分析
        6.2.1 土壤理化性质
        6.2.2 甘蓝连作对土壤酶活性的影响
        6.2.3 甘蓝连作对土壤可培养微生物的影响
        6.2.4 甘蓝连作土壤中细菌16S rDNA多态性分析
        6.2.5 细菌16S rDNA片段的序列分析
    6.3 讨论
    6.4 小结
7 结论
    7.1 转Psc-AFP抗病烟草对根际土壤环境及细菌多样性的影响
    7.2 转LJAMP2抗病烟草对根际土壤微生物的影响
    7.3 连作甘蓝对根际土壤环境及细菌多样性的影响
参考文献
附录
致谢
研究生期间发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]不同耕作处理结合施肥、秸秆还田对土壤微生物多样性的影响 [J]. 吕春莎,王鸿斌,周薇.  安徽农学通报. 2013(24)
[2]转基因(LJAMP2)烟草对紫色土根际微生物和酶的影响 [J]. 王兵,杨星勇,郭涛,张兵新,闫文慧,申鸿.  西南大学学报(自然科学版). 2013(05)
[3]除草剂丁草胺对高产水稻土微生物群落功能多样性的影响 [J]. 张仕颖,夏运生,肖炜,崔晓龙,王永霞,史静,张乃明.  生态环境学报. 2013(05)
[4]根癌农杆菌介导大豆转Bt-cryIA抗虫基因 [J]. 蓝岚,吴帅,申丽威,王志坤,孟凡立,宋波,拓云,刘珊珊.  中国油料作物学报. 2013(01)
[5]DGGE技术在土壤微生物多样性分析上的研究进展 [J]. 刘权钢,金东淳,刘敬爱.  延边大学农学学报. 2012(02)
[6]花生连作对土壤酶活性的影响 [J]. 黄玉茜,韩立思,韩梅,肖亦农,杨劲峰,韩晓日.  中国油料作物学报. 2012(01)
[7]2011年全球生物技术/转基因作物商业化发展态势 [J]. Clive James.  中国生物工程杂志. 2012(01)
[8]非洲菊连作对土壤理化性状与生物性状的影响 [J]. 马海燕,徐瑾,郑成淑,孙霞,束怀瑞.  中国农业科学. 2011(18)
[9]转抗菌肽基因毛白杨的培育及其对溃疡病的抗性 [J]. 贾之春,孙一铭,秦志超,肖训焰,齐代华,罗克明.  林业科学. 2011(07)
[10]转双价(Bt+CpTI)棉种植对土壤速效养分和酶活性的影响 [J]. 娜布其,赵建宁,李刚,杨殿林,红雨,娜日苏,刘玲.  农业环境科学学报. 2011(05)



本文编号：3544211